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《北京中医药大学》 2011年
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海鞘醇类似物LQC-X6抗实验性肝纤维化的研究

尹旭  
【摘要】:肝纤维化(HF)是各种致病原因引起的细胞外基质(ECM)在肝内过多沉积的病理过程。我国是肝纤维化的高发区,延缓肝纤维化进展和肝纤维化并发症的发生是非常重要的。本实验主要是探讨具有抗乙肝作用的中药单体LQC-X6对肝纤维化的保护作用,从而为筛选出有效治疗肝纤维化的药物而提供实验依据。 目的: 采用腹腔注射四氯化碳(CCl4)复制小鼠急性肝损伤,大鼠慢性肝纤维化模型,探讨具有抗乙肝作用的中药单体海鞘醇类似物LQC-X6对急慢性肝细胞损伤的保护作用。 方法: 1分组: ①选用昆明小鼠40只,体重20g左右。随机分成三组:空白组,模型组,LQC-X6组。②选用SD大鼠74只,体重140g左右。随机分成六组,空白组:正常SD大鼠,不做处理;模型组:造模不干预治疗;阳性药组:设立阳性对照药物,在造模第一天起,灌胃给予联苯双酯10.05 mg/kg/d;中剂量组:灌胃给予LQC-X6 14mg/kg/d;高剂量组:灌胃给予LQC-X6 28mg/kg/d;纯药物组:灌胃给予LQC-X6 28mg/kg/d。 2造模: ①昆明小鼠除空白组外,模型组、高剂量组腹腔注射用橄榄油配制的0.2%CCl4制造急性肝损伤模型。每周五下午注射,每周一次,共两次,每次0.1 ml/10g。②SD大鼠除正常组、纯药物组外,其它各组动物经腹腔注射用橄榄油配制的40% CCl4制造肝纤维化模型。每周二、周五下午注射两次,每次2ml/kg,连续注射70天。 3取材: ①饲养昆明小鼠两周后,禁食不禁水24小时,然后采用眼球取血方法,收集小鼠静脉血。静置,待检;并且迅速取其肝脏,剔除脂肪及结缔组织,放入固定液中,待做病理形态学指标。②饲养大鼠70天后,麻醉大鼠,腹主动脉取血,待检;取肝脏、脾脏并称重,记录数值。然后取肝左叶放入固定液中,待做病理形态学指标。 4指标: ①观察实验动物:一般情况、死亡数量、体重变化。②计算实验动物肝脏系数,脾脏系数。③肝功能检测:丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)在实验动物血清中的变化情况。④免疫组织化学方法检测大鼠肝组织中转化生长因子-β1(TGF-β1),血管内皮生长因子(VEGF),E-钙粘附素(E-cad)的表达情况。 5统计学处理: 实验数据用x±s表示,统计软件采用SPSS17.0。组间比较使用单因素方差分析(One-way.ANOVA),以P0.05作为差异标准,有统计学意义。 结果: 1.一般情况 空白组动物一般情况良好。模型组在腹腔注射CCl4后均出现精神萎靡,食欲不振,反应迟钝,体重下降,皮毛颜色晦暗,毛质变硬等情况。各治疗组实验动物的一般体征均好于模型组。 2.常规指标 ①复制小鼠急性肝损伤模型时,存活率100%。复制大鼠肝纤维化模型时除空白组和纯药物组无死亡外,其余各组在造模过程中均有动物死亡,但治疗各组动物死亡数量均少于CCl4模型组。 ②复制大鼠慢性肝纤维化模型时,纯药物对肝脾系数无明显影响。与空白组比较,模型组肝脏系数显著升高(P0.01),脾脏系数也显著升高(P0.01)。与模型组比较,治疗各组肝脏系数和脾脏系数均有下降趋势(P0.05),其中在肝脏系数中,高剂量组与模型组相比有明显统计学差异(P0.01)。高剂量组与中剂量组比较有差异(P0.05),高剂量组与阳性组比较也有统计学差异(P0.05)。高剂量组的肝脏系数在治疗各组中数值最小。在脾脏系数中,中高剂量组和阳性组组间比较均无明显差异(P0.05)。 ③复制大鼠慢性肝纤维化模型时光镜下可见:空白组肝脏组织结构正常,肝细胞未见病变。模型组肝脏正常结构破坏,低倍镜下可见圆形假小叶形成,高倍镜下肝细胞排列异常紊乱,肝细胞胞质增多,肝细胞空泡样变性、坏死,偶见核固缩。局灶性出血,并混有少量炎症细胞浸润及杂乱排列的纤维支架结构。阳性组呈现肝细胞弥漫性轻、中度坏死变性。中剂量组肝细胞坏死变性较模型组减轻,但仍有不规则散在分布的溶解坏死灶。高剂量组肝脏正常组织结构紊乱减轻,肝细胞呈轻、中度坏死变性,炎细胞数量较模型组减少。坏死病灶较模型组也相对较少。纯药物组可见正常肝组织结构,肝索,肝血窦清晰可见,肝细胞大小、形态一致。 3.肝功能指标 ①小鼠急性肝损伤时,与空白组比较,模型组ALT和AST显著升高。与模型组比较,高剂量组ALT和AST明显下降(P0.01),有统计学意义。 ②大鼠慢性肝纤维化时药物对肝功能无明显不良作用。与空白组比较,模型组ALT和AST显著升高(P0.01)。与模型组比较,治疗各组ALT和。AST明显下降。其中对于ALT:阳性组与模型组比较有明显差异(P0.01),高剂量组与模型组比较有差异(P0.05)。对于AST:阳性组,中剂量组与模型组相比有明显差异(P0.01),高剂量组与模型组相比有差异(P0.05)。 4.TGF-β1在纤维化大鼠肝组织中的表达情况 空白组肝组织中TGF-β1几乎无表达,模型组可见明显棕色或棕黄色颗粒在汇管区周围表达增多,治疗各组表达减少,以高剂量组减少更加明显。纯药物组肝组织中也少有表达,说明:TGF-β1在正常肝组织中也有表达,但随着肝损伤的加重,TGF-β1的表达逐渐增加,它可以作为判断肝脏损伤程度的一个重要指标。 5.VEGF在纤维化大鼠肝组织中的表达情况 空白组肝组织的血管周围VEGF无明显表达,模型组可见VEGF阳性表达增强,血管周围有明显阳性物质沉积。治疗各组VEGF表达较模型组减弱,其中高剂量组阳性物质沉积比阳性组、中剂量组更少。纯药物组血管周围偶见阳性物质沉积。 6.E-cad在纤维化大鼠肝组织中的表达情况 空白组肝组织汇管区未见E-cad明显表达,模型组可见肝小叶中央静脉周围、汇管区有E-cad呈阳性表达。治疗各组E-cad表达较模型组减弱,其中高剂量组阳性物质沉积少于阳性组、中剂量组。纯药物组可见散在少量的E-cad阳性物质沉积。 结论 抗乙肝作用的中药单体LQC-X6对肝损伤有保护作用。其抗肝纤维化作用可能通过降低动物死亡数量,降低动物肝脾系数,降低动物血清中ALT,AST的数值,抑制肝组织中TGF-β1、VEGF和E-cad的表达来达到减少肝细胞损伤的目的。这说明具有抗乙型肝炎病毒的中药单体LQC-X6,同样具有抗肝纤维化作用。
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1 朱冰;抗纤Ⅰ号方药抗实验性大鼠肝纤维化作用及其分子机制研究[D];河北医科大学;2003年
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