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《北京中医药大学》 2011年
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从表征和尿液代谢组学角度判别2型糖尿病大鼠中医证候属性的实验研究

潘秋  
【摘要】:目的:建立并优化糖尿病大鼠表征采集表和表征采集方法;建立高脂饲料叠加链脲佐菌素诱发的2糖尿病大鼠模型,探索大鼠证候属性的判断方法;探索具有补脾益气、祛痰化瘀功效的中药复方干预病证结合2型糖尿病大鼠的疗效及其评价方法;从尿液代谢组学的角度阐释病证结合2型糖尿病大鼠的证候相关生物学基础和中药复方干预大鼠模型的药效机制。 方法:实验研究一即腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病大鼠模型,初步建立病证结合糖尿病大鼠模型的表征采集表,检测阳性表征及血糖、激素、代谢笼、体温、体重等指标,以临床证候诊断标准及文献报道的相关专家观点为大鼠证候属性的判断依据,对糖尿病大鼠进行初步的证候属性判断;实验研究二即高脂饲料叠加链脲佐菌素复制2型糖尿病大鼠模型,根据动物实验一所建立的表征采集表对大鼠模型进行表征采集,检测血糖、血脂、血流变及激素等指标,结合上述结果判断大鼠模型的证候属性;实验研究三根据方证相应理论,采用具有补脾益气、祛痰化瘀功效的中药复方(高、中、低三个剂量组)干预2型糖尿病大鼠,检测血糖、血脂、胰腺和肝脏病理变化等一般理化指标,结合阳性表征结果,初步评价中药复方的疗效;实验研究四采用气质联用技术对2型糖尿病大鼠(中药高剂量组、西药组、模型组、对照组)的尿液进行检测,根据尿液代谢物的结果,阐释不同组、前后两个时间点(时间点一代表脾气亏虚证为主的阶段,时间点二代表痰湿瘀滞证为主的阶段)大鼠模型的证候及其演变规律的相关生物学基础,以及中药复方干预大鼠模型的疗效机制。 结果:实验研究一建立并优化了实验性糖尿病大鼠的表征采集表,制定了操作简便的表征采集方法;实验研究二以临床证候诊断标准及文献报道的相关专家观点为依据,以业已建立的采集表征表为主要工具,初步建立了病证结合2型糖尿病大鼠的证候属性判断方法。实验研究二建立的2型糖尿病大鼠模型,第1-3周模型组大鼠表征出现形体消瘦、行为呆滞、毛色黄、耳、鼻、唇、舌、爪颜色淡白和尾部重度角化,抓力下降及体质量减低,但饮食量、饮水量、尿量、体温与对照组相比没有差别。第4-6周模型组大鼠部分表征发生进一步变化,与前3周相比,上述阳性表征的比率有上升趋势,并且舌色暗红及大便黏滞松软比率明显增加;实验研究三建立的2型糖尿病大鼠模型经过中药复方干预6周后,一般理化指标和阳性表征均有不同程度的改善。中药高剂量组大鼠模型的血糖、胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、尿素氮、谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平明显降低。在中药复方改善大鼠模型表征方面,中药高剂量组大鼠的行为活跃比率、耳鼻唇爪颜色淡白比率、舌暗红比率、以及大便黏滞松软比率均有明显改善,出现表征改善的时间点多在中药复方干预的中后期;实验研究四尿液代谢物鉴定结果显示,与时间点一比较,时间点二模型组大鼠尿液中二羟基苯甲酸、L-抗坏血酸、D-葡萄糖酸十八烷酸和戊二酸含量均明显增加;时间点二中药高剂量组大鼠的尿液中L-抗坏血酸含量减少, 结论:实验研究一制定的表征采集表可全面、动态地采集糖尿病大鼠的宏观表征,大鼠成模后第3-7周的表征基本稳定,结合一般理化指标,初步推测模型组大鼠证候特征为早期胃热炽盛证为主,后期脾气亏虚证为主。实验研究一大鼠的证候属性尚不属于文献报道的糖尿病临床常见证型范畴;实验研究二结合大鼠阳性表征和一般理化指标,发现2型糖尿病大鼠第1-6周的表征基本稳定,初步推测模型组大鼠证候特征为前期脾气亏虚证为主,后期痰湿瘀滞证为主。实验研究二大鼠的证候属性属于糖尿病临床常见证型范畴,可作为方证相应研究的合格载体;实验研究三显示高剂量中药复方具有改善2型糖尿病大鼠表征和一般理化指标的作用,从方证相应的角度证明了2型糖尿病大鼠的证候属性可能为脾气亏虚、痰湿瘀滞证。笔者认为从表征和一般理化指标两个方面对2型糖尿病大鼠进行证候疗效评价具有可行性;实验研究四显示,大鼠尿液代谢物的变化可在一定程度上揭示病证结合2型糖尿病大鼠的证候相关生物学基础及中药药效的机制。
【学位授予单位】:北京中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R259

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【参考文献】
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