收藏本站
《北京中医药大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

益气养阴活血法改善糖尿病合并脑缺血大鼠记忆能力及神经再生研究

韩辉  
【摘要】:1.目的 前期研究结果显示,气阴两虚、瘀血阻络是糖尿病合并脑缺血的最常见的基本证候,首先建立气阴两虚、瘀血阻络型糖尿病合并脑缺血大鼠模型,观察高血糖对大鼠空间学习记忆能力的影响,以及对海马DG区神经细胞的增殖、分化、存活及BDNF通路的影响,然后观察益气养阴活血中药体内和体外的干预作用,并运用工具药证实BDNF通路在其中的作用。 2.方法 2.1采用持续力竭性游泳、甲状腺素片混悬液灌胃、腹腔注射STZ以及线栓法制作糖尿病合并脑缺血气阴两虚、瘀血阻络证大鼠模型,从大鼠的血糖、神经功能、TTC和HE染色结果、一般状态、舌象以及最终的成功率等方面来探讨糖尿病合并脑缺血(气阴两虚、瘀血阻络)病证结合模型的可行性。 2.2将30只大鼠分为假手术组、脑缺血组以及糖尿病合并脑缺血组,每组10只,用Brdu掺入法结合免疫组化观察糖尿病对脑缺血后大鼠海马齿状回(DG)神经细胞的新生、分化和存活的情况,免疫组化法观察BDNF表达情况,并用Morris水迷宫实验评估糖尿病对脑缺血大鼠空间学习和记忆能力的影响。 2.3将大鼠分为假手术组、糖尿病合并脑缺血(气阴两虚、瘀血阻络证)模型对照组、益气养阴活血组、益气养阴活血+K252a(BDNF的Trk受体抑制剂)组、益气活血组,每组10只,选用了具有益气养阴活血作用的人参、川芎、玉竹、黄精组合,运用Brdu掺入法、免疫组化和Morris水迷宫实验来观察益气养阴活血法对糖尿病合并脑缺血大鼠空间学习记忆的作用和神经再生机制。 2.4神经干细胞培养分为4组:正常对照组、缺血再灌注模型组、缺血再灌注后高糖模型组、缺血再灌注后高糖加益气养阴活血药物血清组。Brdu掺入法观察神经干细胞的增殖,甲基噻唑基四唑比色实验检测细胞活性。 3.结果 3.1动物模型研究结果表明,糖尿病合并脑缺血(气阴两虚、瘀血阻络)病证结合模型的最终成功率为63%,大鼠在表征、舌象、神经功能缺损、脑组织形态学以及大鼠最终的存活率等几方面指标的综合评价符合该模型的评价体系。 3.2糖尿病对脑缺血大鼠空间记忆、海马神经再生及BDNF表达的影响 本研究结果显示,与假手术组和模型组比较,长期高血糖能加重脑缺血大鼠的Morris水迷宫空间学习记忆能力损伤(P0.05),但糖尿病对于脑缺血后大鼠神经细胞的增殖没有显著的影响(P0.05),而对于脑缺血后大鼠新增殖细胞的存活及向神经元分化具有明显的抑制作用(P0.001)。我们的研究还发现,糖尿病合并脑缺血大鼠海马齿状回BDNF表达较单纯脑缺血明显降低(P0.001)。由于BDNF与神经再生相关,推测糖尿病可能通过抑制BDNF而影响神经再生。 3.3益气养阴活血药物在糖尿病合并脑缺血大鼠模型中,通过BDNF调节海马的神经再生,并促进空间学习记忆的恢复 研究结果显示,糖尿病合并脑缺血可使海马齿状回颗粒下层新生细胞增多,但益气养阴活血药物不能促进糖尿病合并脑缺血大鼠新生细胞的进一步增加(P0.05,)。与糖尿病合并脑缺血组比较,益气养阴活血药物和益气活血药物均可以明显提高新生细胞的存活率、促进新生细胞向神经元分化(P0.05),同时增加海马齿状回BDNF的表达(P0.01),并促进糖尿病合并脑缺血大鼠的空间记忆能力的恢复(P0.05-0.01),其中益气养阴活血药物效果优于益气活血药物(P0.05)。侧脑室注射BDNF抑制剂K252a可以抑制益气养阴活血药物促进新生细胞存活和向神经元分化的作用(P0.001),并抑制糖尿病合并脑缺血大鼠的空间记忆能力的恢复(P0.001)。 3.4益气养阴活血药物血清对高糖合并缺血再灌注培养模型中大鼠神经干细胞增殖和活力的影响 结果显示,与正常组比较,脑缺血再灌注后神经干细胞增值显著增加(P0.01),细胞活力下降(P0.01);高糖可抑制神经干细胞的增殖(P0.05-0.01),降低细胞活力(P0.05-0.01);益气养阴活血药物血清可促进神经干细胞的增殖(P0.01),提高其活力(P0.01)。我们的体外培养结果证实了益气养阴活血药物能促进脑缺血再灌注合并高糖培养条件下神经干细胞的增殖,提高细胞活力。 4.结论 4.1腹腔注射链脲佐菌素、持续力竭性游泳、甲状腺素片混悬液灌胃以及线栓法制作糖尿病合并脑缺血(气阴两虚、瘀血阻络)大鼠模型,从表征、舌象、神经功能缺损、脑组织形态学以及存活率等方面综合评价大鼠病证结合模型是成功的; 4.2糖尿病可能通过降低BDNF的表达,从而抑制再生神经存活和向神经元分化,进而加重脑缺血后的空间学习记忆障碍; 4.3益气养阴活血药物可能通过BDNF介导的神经再生和向神经元定向分化而改善空间记忆功能; 4.4益气养元活血药物可促进脑缺血再灌注后高糖培养大鼠神经干细胞的增殖,提高细胞活力。
【学位授予单位】:北京中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R259

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 靳瑾;李旭芳;孙侃;王敏哲;;辛伐他汀对糖尿病大鼠大血管病变的干预作用及机制研究[J];现代医药卫生;2011年17期
2 朱梅佳;刘磊;贾茜;鹿伟;;血管内皮细胞生长因子在糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注模型中的表达[J];中国糖尿病杂志;2007年08期
3 赵伟成;杨承祥;王汉兵;李晓宏;;氯胺酮对糖尿病痛性周围神经病变大鼠机械痛阈的影响[J];广东医学;2011年14期
4 周媛媛;李超彦;;P物质对糖尿病大鼠胃肠功能及血清SOD、MDA的影响[J];卫生职业教育;2011年11期
5 韦安阳;杨勇;何书华;罗新贵;张涛;刘洋;;miR-145在糖尿病性勃起功能障碍大鼠发病机制中的作用[J];南方医科大学学报;2011年06期
6 邢邯英;野战鹰;张冬会;付玲娣;裴华颖;;改变血红素加氧酶-1水平对糖尿病大鼠氧化应激状态及肾功能的影响[J];中国老年学杂志;2011年14期
7 王晓东;张伟生;梅宏亮;王淑秋;;银杏提取物对糖尿病大鼠肾组织MMP-2和MMP-9表达的影响[J];牡丹江医学院学报;2011年03期
8 刘宽芝;王战建;李玉坤;王伟超;温进坤;韩梅;;基质金属蛋白酶9表达和活性与2型糖尿病大鼠大血管病变的相关性研究[J];中国糖尿病杂志;2007年12期
9 吴静;雷闽湘;柳岚;王珊;;罗格列酮对2型糖尿病大鼠主动脉内皮依赖性血管舒张功能的影响[J];中国糖尿病杂志;2007年10期
10 赵伟;孙国志;;用于非酶糖化抑制剂实验大鼠模型比较研究[J];黑龙江医药科学;2011年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 邓建平;方强;宋波;;ICCs细胞在糖尿病大鼠膀胱中的密度分布及其在糖尿病膀胱功能改变中的作用[A];第十六届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2009年
2 韩艳秋;陈秋惠;饶明俐;;糖尿病大鼠脊髓及背根神经节BDNF、NT-3表达变化[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
3 黄娟;;缬沙坦对2型糖尿病大鼠肾脏保护作用的研究[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年
4 文秀英;廖秋红;徐文光;卢坤;余杰;;SIK1在糖尿病并发高血压中的作用[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
5 陈奇;陈雪梅;刘秋琼;陈松海;;复方姜黄合剂对糖尿病大鼠视网膜新生血管形成的干预[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
6 牛轶雯;谢挺;曹小赞;缪明远;董叫云;葛奎;戎柳;花兰女;陆树良;;糖尿病大鼠创面愈合中FGF2相关事件发生的研究[A];中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年
7 吴亮;;棉酚对2型糖尿病大鼠大脑皮层、海马神经元凋亡与认知功能的影响[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年
8 沈丽;殷峻;;抗性淀粉改善糖尿病大鼠子代空腹血糖[A];第13届全国临床营养学术会议资料汇编[C];2011年
9 贺学林;陈以平;;糖尿病大鼠早期肾脏CoLⅣ及MMP-2/TIMP-2改变的实验研究[A];第七届全国中西医结合肾脏病会议论文汇编[C];2003年
10 陆颖理;吴晖;庞玉萍;朱惠;;PPAR-γ配体对糖尿病大鼠心肌超微结构、心房利钠肽mRNA表达影响的研究[A];2006年中华医学会糖尿病分会第十次全国糖尿病学术会议论文集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 刘华;雌二醇可减轻大鼠模型急性胰腺炎的器官损害[N];医药导报;2004年
2 ;电针对帕金森病大鼠模型抗氧化酶有影响[N];中国中医药报;2005年
3 张艳 方素清 姜凯 宋婷婷;慢心衰气虚血瘀证大鼠模型[N];中国中医药报;2006年
4 内蒙古医学院中医学院 任秀玲;“肺气虚”大鼠模型微观基础表达的实验研究[N];中国中医药报;2007年
5 姜之炎 吴玉晶;小儿敷贴粉可改善哮喘大鼠气道反应[N];中国医药报;2005年
6 张超群 范晓莉;山西医大用新法制备2型糖尿病大鼠模型[N];中国医药报;2005年
7 张中桥;中药能调节胃泌素水平[N];中国医药报;2005年
8 记者 王华锋;用中药抗老年性痴呆前景看好[N];中国医药报;2006年
9 张中桥;宝宝乐能调节胃泌素和CCK[N];中国中医药报;2006年
10 ;ALS治疗新方向[N];医药经济报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 韩辉;益气养阴活血法改善糖尿病合并脑缺血大鼠记忆能力及神经再生研究[D];北京中医药大学;2011年
2 刘桠;参芪复方调控GK大鼠血管PTEN/PI3K通路与血管新生的实验研究[D];成都中医药大学;2010年
3 孙凤平;参芪复方对GK大鼠肾脏NF-κB及PPARγ的影响[D];成都中医药大学;2011年
4 王继红;枸杞多糖对糖尿病大鼠血—视网膜屏障的保护作用及ROCK通路表达的机理研究[D];辽宁中医药大学;2010年
5 陈敏;参芪复方调控GK大鼠大血管病变炎症状态及血管内皮凋亡的实验研究[D];成都中医药大学;2010年
6 潘秋;从表征和尿液代谢组学角度判别2型糖尿病大鼠中医证候属性的实验研究[D];北京中医药大学;2011年
7 刘慧丽;GDNF在糖尿病神经病理性疼痛大鼠模型中的作用研究[D];中国协和医科大学;2007年
8 廖洁;血糖波动对糖尿病内皮依赖性血管舒张功能的影响及机制研究[D];中南大学;2010年
9 陈俊;糖胃康对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦SCF-Kit信号途径影响的研究[D];湖北中医药大学;2010年
10 王建枫;锌对大鼠肝脏硬脂酰辅酶A去饱和酶-1(SCD-1)的影响及其调控机理研究[D];浙江大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 高洪博;局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠外周血内皮祖细胞数量的变化及其意义和机制[D];山东大学;2010年
2 刘芬芬;SDF-1α及其受体在糖尿病大鼠肾脏中表达及作用的研究[D];泰山医学院;2010年
3 李洁;荞精复方制剂对2型糖尿病大鼠心肌病变的影响[D];华北煤炭医学院;2010年
4 赵晓琴;2型糖尿病大鼠心脏损伤中心肌硫氧还蛋白系统变化及作用分析[D];山西医科大学;2010年
5 王宝岗;局部胰岛素干预影响2型糖尿病大鼠种植体骨结合的研究[D];第四军医大学;2010年
6 张喜娟;糖尿病大鼠胃动力变化与胃血管变化关系的研究[D];兰州大学;2010年
7 郭学敬;糖尿病大鼠治疗后膀胱和腰骶背根神经节中神经生长因子的表达[D];河北医科大学;2011年
8 赵锡武;糖尿病大鼠骨折愈合过程中BMP-7、TGF-β1、b-FGF变化的实验观察[D];山东大学;2010年
9 余静;吡格列酮对STZ诱导的糖尿病大鼠十二指肠病理及免疫炎性指标的影响[D];天津医科大学;2010年
10 李大伟;白花丹参叶对糖尿病大鼠的治疗作用及其机制研究[D];泰山医学院;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026