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《北京中医药大学》 2002年
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黄连解毒汤抗疱疹病毒物质基础研究

朱静  
【摘要】: 黄连解毒汤是清热解毒方中的经典方剂,本方由黄连(九克)、黄芩(六克)、黄柏(六克)、栀子(九克)四药组成,具有清热泻火解毒之功效,主治一切实热火毒、三焦热盛之证。对黄连解毒汤有效组分药液进行体外抗病毒实验发现其对11种病毒有不同程度的抑制作用,尤其对疱疹病毒Ⅰ、Ⅱ效果最佳,确定为有效部位群。本论文分三部分对黄连解毒汤抗疱疹病毒物质基础进行研究。 第一部分黄连解毒汤的文献综述研究。分别对全方及单味药的药剂学,药理学及所含化学成分进行综述,共引用文献70篇。 第二部分黄连解毒汤的实验研究。 1 对黄连解毒汤抗疱疹病毒有效部位群进行提取、分离,得到13个单体化合物,运用各种色谱、光谱(包括UV、IR、EI-MS、FAB-MS、HR-MS、~1HNMR、~(13)CNMR等)技术或化学方法鉴定了其中的11个。其中生物碱三个,分别是小檗碱、巴马亭、药根碱、黄酮及黄酮苷三个,分别是黄芩苷、汉黄芩素、木犀草素。有机酸三个,分别是绿原酸,熊果酸、藏红花酸。环烯醚萜苷一个,为栀子苷。甾醇一个,为β-谷甾醇。此11个化合物均为首次从黄连解毒汤中得到,经文献检索知小檗碱、巴马亭、药根碱来源于黄连、黄柏;黄芩苷、汉黄芩素来源于黄芩;有机酸类和栀子苷来源于栀子;β-谷甾醇在黄芩、黄柏、栀子中均存在;其中木犀草素为首次从该复方中得到,且所组成的四味单味药也未见报道分离得到此成分。 2 初步建立了黄连解毒汤抗疱疹病毒有效部位群的高效液相图谱,通过分析比较发现有28个色谱峰是供试品所共有的,通过单味药黄连、黄柏、黄芩、栀子及阴性相应部位与全方有效部位群HPLC色谱图的比较,基本确认了各峰的归属,并通过单味药黄连、黄柏相应部位的HPLC色谱图的比较,用HPLC色谱图将二者区分。通过与标准品对照确认峰14为黄芩苷,峰16为小檗碱,峰12为药根碱,峰15为巴马亭。 3 对黄连解毒汤抗疱疹病毒有效部位群的总生物碱进行了含量测定,小檗碱标准曲线为y=63.525x+0.0081,r=0.9997,表明小檗碱在范围4.0-20.0mg/mL之间与吸收度之间呈良好的线性关系。测得全方有效部位群沉淀部分含量为21.46%,RSD为0.87%,全方有效部位群大孔树脂柱醇洗部分为8.80%,RSD为2.73%,计算得全方有效部位群总生物碱含量为13.89%。单味药黄连相应部位总生物碱含量为51.34%,单味药黄柏相应部位总生物碱含量为9.82%,计算得黄连、黄柏对全方的贡献分别为15.02%、1.16%。并建立了黄连解毒汤抗疱疹病毒有效部位群中黄芩苷、栀子苷的HPLC定量分析方法:栀子苷回归方程为y=126502x+99484,r=0.9995。表明栀子苷在范围0.572-1.716μg之间具有良好的线性关系,测得 2&连解赶汤抗泡疹j山啦物质沾础研冗 全方有效部位群沉淀部分中桅子菩含量极低,全方有效部位群大孔树脂柱醇洗部 分中桅子普含量为13.31%,RSD为0.19%,力样回收率为102.5%,RSD为1.sl%, 计算得全方有效部位群中桅子苦含量为7.96%;黄冬普回归方程为 g=279214x-22079,r二0.9992。表明黄芬普在范围 2.02-18.18 u g之问具有良好 的线性关系。测得全方有效部位群沉淀部分中黄苏苦含量为18.7汛,RSD为2.03儿 全方有效部位群大孔树脂柱醇洗部分中为4.04兄RSD为3.60兄计算得全方有效 部位群中黄芍苦含量为 9.96%。加样回收率为 99.2巩 RSD为 1.94览 第三部分 对各实验结果进行分析讨论。
【学位授予单位】:北京中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R289.5

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