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《北京中医药大学》 2003年
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慢性束缚应激大鼠中枢内GR与β-EP变化及中药复方的影响

杨建新  
【摘要】: 自从1936年,Hans Selye借物理学中“应激(stress)”一词,定义了发生于病人的特定的精神和生理变化至今,应激学说已成为一种整体生理学和病理学的新理论,有关应激的研究在人类健康和疾病领域中占据了十分显著的位置。随着现代医学模式的转变,相当多的社会不良刺激给人体造成损害,更是不容忽视。由于应激的机理尚不十分明确,西医界目前尚无肯定的药物可对抗此作用。近年来,对中医肝脏功能实质的研究进一步表明,肝的生理功能和病理变化与机体应激状态下导致的神经、内分泌紊乱、免疫功能异常等密切相关。因此,从中医药学角度探讨应激的机理及治疗方向,具有重要意义。 本研究为国家自然科学基金委课题(NO:30000216)与霍英东教育基金会(NO:81037)资助项目组成部分之一,分理论研究和实验研究两部分。以中医理论为基础,通过理论研究、实验研究两部分探讨应激的机理以及中医药对应激的作用。其主要内容包括: 理论研究 1.应激的研究 应激是机体在受到各种强烈因素(应激原)刺激时所出现的一系列神经内分泌反应,以及由此而引起的各种机能和代谢的改变。HPA轴的激活是应激反应的最重要特征,其机制十分复杂。海马能够参与整合感知的信息、解释环境信息的意义及调节行为反应和神经内分泌反应。许多应激原可引起人血浆β-内啡肽明显增多,内阿片系统及其受体在应激的调节中起着不可忽视的作用。在应激原作用下,机体交感-肾上腺髓质系统和下丘脑-垂体-肾上腺皮质系统发生变化,同时免疫系统功能也发生改变,神经内分泌免疫网络对应激反应的调节起着相当重要的作用。 2.应激与中医肝脏的关系 中医肝脏功能与机体应激状态下神经内分泌紊乱,免疫功能异常等密切相关。中医肝主疏泄的功能在机体应激中起着重要作用。肝脏通过对气机、血液和情志等的影响,调节人体的应激反应。 3.中医药抗应激的作用机理 中医理论中,对有关应激和应激反应机制的认识,归结为气机的改变。认为气机失调引起的气血运行失调紊乱和脏腑功能失常是引起应激性疾病的主要原因之一。中医药抗应激主要是通过调整阴阳、调节气血和调节脏腑三个方面的作用来实现的。 实验研究 任何应激反应都是个过程,从适应角度将应激分为三个阶段,即警戒期,抵抗期和衰竭期。本实验采取了目前较为纯粹的束缚应激方式制造大鼠模型,观察了动物行为学以及神经内分泌学等多项指标,并且探讨了疏肝方药柴胡疏肝散和逍遥散对此种应激的调节作用。结 WP=5 果如下: 1.一般状态观察:从外观看,模型组大鼠出现神态倦怠、扎堆懒动、毛发无光泽、饮食量减少伴大便稀溏表现。与正常对照组相比,模型组体重增长速度下降,进食量较正常组明显减少。 2.行为学观察: 鼠尾悬挂实验:第一,与正常组相比较,21天模型组大鼠静止时间明显延长;而疏肝中药组大鼠不动时间较其它各组明显减少(P0.05)与21天模型组比较差异极显著(P0.01);第二,与正常组相比较,两个模型组大鼠挣扎次数均明显减少(P0.05),并随着束缚时间的延长,21天模型组大鼠挣扎次数更少。与21天模型组比较,三个给药组挣扎次数均明显增多(P0.05),与正常组比较并无明显差异(P0.05)。 大鼠旷场实验:第一,与正常组大鼠比较,模型组大鼠随着束缚时间的延长穿格数明显减少(P0.05),各中药组较之模型组均显著增多(P0.05);第二,与正常组大鼠比较,模型组中央格停留时间延长,且21天模型组较正常组明显延长(P0.05),三个给药与21天模型组相比中央格停留时间明显缩短(P0.05),尤以疏肝组缩短最为明显;第三,各组大鼠理毛修饰次数并无明显差异(P0.05)。 3.计算肾上腺指数、胸腺指数:与正常组大鼠比较,7天模型组大鼠的肾上腺指数显著增大(P(0.05),21天模型组大鼠肾上腺指数较7天模型组明显减小(P(0.05),但较正常组仍明显升高(P(0.05),三给药组较之7天模型组明显缩小(P(0.05),但与正常组大鼠比较仍有增大(P(0.05);各组大鼠的胸腺指数无明显差异, 但21天模型组胸腺指数最小,提示模型组大鼠胸腺正在发生胸腺萎缩。 4.免疫组织化学染色方法测定大鼠相关脑区糖皮质激素受体的变化:第一,与正常组相比较7天模型组大鼠海马CA1区、皮层和齿状回糖皮质激素受体的含量及免疫反应强度均明显增强(P(0.05),而21天模型组上述部位糖皮质激素受体的含量及免疫反应强度均明显减弱(P(0.05);第二与21天模型组相比三个给药组均能提高大鼠相关脑区糖皮质激素受体的含量及免疫反应强度(P(0.05),其中以疏肝药组表现最为明显。 5.免疫组织化学染色方法测定大鼠下丘脑β-EP的变化:与正常组相比,7天模型组未见明显差异,21天模型组大鼠下丘脑β-EP免疫反应强度、阳性细胞数目及阳性细胞平均总面积均明显增强、增多、增大(P(0.05);与21天模型组比较逍遥散组及肾气丸组能显著降低下丘脑β-EP免疫反应阳性强度,减少下丘脑β-EP免疫反应阳性细胞数目,减小下丘脑β-EP免疫反应阳性细胞平均总面积;而四君子汤组与21天模型组没有明显差异。 综上所述,本研究复制了慢性束缚应激模型,通过综合评定,观察到该应激模型
【学位授予单位】:北京中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R228

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