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糖克煎剂对2型糖尿病大鼠模型胰岛素抵抗影响的分子机制实验研究

王东  
【摘要】: 本论文分为理论研究、师承经验和实验研究三部分。 第一部分理论研究,围绕本论文的实验研究内容,对胰岛素抵抗(IR)的中医药研究进展、脂代谢紊乱与2型糖尿病(DM)间的关系、肿瘤坏死因子α(TNF-α)与IR间的关系进行了综述。综述1,包括IR与2型糖尿病、高血压病和代谢综合征的中医病机和辨证分型之间的关系、中医药改善IR的研究进展及存在的问题;综述2,主要是关于肥胖与脂代谢紊乱、脂代谢紊乱与IR及脂代谢紊乱对胰岛β细胞脂毒性的研究进展;综述3,主要是关于TNF-α与IR的相关性、TNF-α致IR的作用机理及作用途径、以及针对TNF-α的IR的治疗的研究进展。 第二部分师承经验,介绍了导师“从毒论治”的学术思想,导师提出的消渴的“脾虚致毒”的病机、以及从“脾虚致毒”论治消渴的观点。 第三部分实验研究,采用尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)加喂饲高热量饲料的方法,复制出2型糖尿病IR的大鼠模型;将实验大鼠分为正常对照组、模型组、中药糖克煎剂治疗组和胰岛素增敏剂罗格列酮治疗组;以胰岛素敏感指数(ISI)衡量糖克煎剂对IR的影响,并从糖克煎剂对脂代谢异常、对脂肪源性TNF-α、对胰岛素信号转导等方面的影响,探讨其作用机制。实验1,观测了各组实验鼠的血脂、血游离脂肪酸(FFA)和血一氧化氮(NO)水平;实验2,观测了各组实验鼠脂肪组织的TNF-α信使核糖核酸(mRNA)的表达水平、及葡萄糖转运体4(GLUT4)在骨骼肌组织中的表达情况;实验3,观测了各组实验鼠纯化的骨骼肌细胞胰岛素受体的酪氨酸激酶(TPK)活性及其β亚单位的酪氨酸磷酸化情况、以及各组实验鼠骨骼肌细胞的GLUT4的转位情况。结果表明,糖克煎剂可使2型糖尿病IR模型大鼠的脂质代谢异常得到改善,尤其是能够降低其血FFA和甘油三酯(TG)水平;能使模型大鼠的血NO水平升高,改善其血管内皮细胞功能;能使模型大鼠的脂肪组织TNF-α的mRNA表达水平降低;能使模型大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体的TPK活性提高、并使其β亚单位的酪氨酸磷酸化增加;能使模型大鼠骨骼肌细胞的GLUT4的转位增加,但对GLUT4的蛋白含量可能无影响。通过以上作用,糖克煎剂可使2型糖尿病IR的大鼠模型的IR得到改善。


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