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《北京中医药大学》 2004年
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益气温阳活血通络法对糖尿病性皮肤溃疡愈合的作用机制研究

李光善  
【摘要】:糖尿病性皮肤溃疡是糖尿病发展过程中常见 多发 难治的皮肤溃疡性病变统称 严重 危害糖尿病病人的健康 降低生活质量 在糖尿病病人的各种皮肤溃疡性改变中 糖尿病性 肢端坏疽 糖尿病足为多见 我们认为消渴日久 肾肝虚损 脾胃失运化 虚瘀毒损皮络是糖尿病性皮肤溃疡基本病 机 并提出治疗以益气温阳活血通络为法 标本兼治 益气温阳活血通络法是依据回阳生肌 理论的思路 大胆创新 注重益气温阳的同时突出了 虚瘀毒互为因果 虚瘀毒损皮络 的 理论 拓展了糖尿病性皮肤溃疡辨治的新理论 新思路 为了初步探讨糖尿病性皮肤溃疡发病机制和益气温阳活血通络法对糖尿病皮肤溃疡愈合 的作用机制 我们建立了糖尿病大鼠皮肤创面模型并观察中药对体外培养糖尿病大鼠皮肤创 面 FB 增殖的影响以及观察疡愈涂剂对糖尿病大鼠皮肤创面的影响 以组织病理学 免疫组 化法和苦味酸 天狼星红染色法 检测了糖尿病皮肤创面 FB 增殖 ECM MMPs TIMPs 创面愈合等变化 多时相 动态观察了糖尿病皮肤创面愈合过程 其结果如下 (1)黄芪多糖浓度 156ug/ml 39ug/ml 9.75ug/ml 桂皮醛浓度22.4ug/ml 11.2ug/ml 5.6ug/ml 川芎嗪浓度31ug/ml 7.75ug/ml 1.94ug/ml麝香酮浓度2ug/ml 1ug/ml 0.5ug/ml 时可促进 FB 的增殖或对 FB 的作用稳定 四种药物有效浓度之间不同配伍中,益气 温阳活血通络组浓度在 58.45ug/ml 和 29.225ug/ml 时 FB 增殖和迁移作用优于其他组 且 58.45ug/ml 浓度作用优于29.225ug/ml 浓度作用 (2) 模型组创面愈合时间 27.13 1.81天 与对照组创面愈合时间 15.25 1.67天 相比 明显延迟(P0.001) 模型组创面愈合率显著小于对照组 模型组创面 FB 数量缓慢增加 而 对照组在第 7 天时 FB 生长达到高峰 随后缓慢下降 在第 3 7 9 11 天时 模型组创面 FB数量均明显少于对照组 两组PCNA表达与FB数量之间均呈现正相关性 模型组 型胶原比值明显小于对照组 模型组各时间点 型胶原缓慢增加 而对照组增加明显 两组 型胶原均递减 对照组 型胶原递减比模型组明显 模型组 TIMP-1 的表达低水平缓慢增 加 与创面FB 数量之间呈正相关性 对照组TIMP-1 表达第11 天达到高峰 随后有明显下 降 与创面FB 数量之间呈正相关性 模型组创面MMP-1 表达缓慢增多 到第11 天达到高 峰 以后缓慢下降 对照组创面MMP-1 表达第 3 天有大量表达 第 7 天达到高峰 随后明 显下降 但模型组第11 15 30天MMP-1表达显著高于对照组 对照组创面MMP-13的表 达在第 7 天达到高峰 随后明显减少 模型组创面 MMP-13 表达缓慢增加 到第 11 天达到 高峰 随后缓慢下降 第11 15天时模型组创面MMP-13表达明显高于对照组 (3) 疡愈涂剂大剂量组(16.38 1.19 天) 中剂量组(17.5 1.2 天) 小剂量组(21.38 1.3 天) 与模型组(27.13 1.81天)相比 创面愈合时间均有显著性差异(P0.01) 大 中剂量组与小剂 量组相比 创面愈合时间均显著缩短 大 中剂量组之间创面愈合时间无显著性差异 P0.05 大 中 小剂量组创面愈合率与模型组相比每个时间点均有显著性差异 P0.01 第7 11 WP=5 2 益气温阳活血通络法对糖尿病性皮肤溃疡愈合的作用机制研究 15天 大 中剂量组创面愈合率与小剂量组相比有显著性差异 P0.05或P0.01 大 中 小剂量组创面FB数量与模型组相比 每个时间点均明显增多 大 中剂量组FB增殖与小剂 量组相比有显著性差异(P0.05 或 P0.001) 第 5 7 9 天 大 中剂量组 PCNA 表达与小 剂量组相比明显增加 大 中剂量组 PCNA 表达量之间无显著性差异 P0.05 中剂量组 创面 PCNA 表达与创面FB 数量呈正相关 第7 9 天 大 中 小剂量组PCNA 表达与模 型组相比明显增加 (4) 第5 7 9 天 大 中剂量组创面FN 表达与小剂量组相比明显增多 大 中剂量组FN 表达间无显著性差异(P0.05) 大 中 小剂量组FN表达与模型组相比 各时间点均有显著 性差异 P0.05 或 P0.01 或 P0.001 大剂量组 FN 表达与 PCNA 表达呈正相关 中剂量 组FN表达与PCNA表达呈正相关 第3 5 7 9 11天 大 中剂量组与小剂量组 模型 组相比 创面胶原含量 型胶原量均明显增多 而大 中剂量组间无显著性差异(P0.05) 第3 5 7 9 11天 小剂量组创面胶原量比模型组明显增多 第9 11天 小剂量 型胶 原量比模型组明显增多 (5)第3 5 7 9 11天 大 中 小剂量组TIMP-1表达均比模型组明显增多 第5 7 9 天 大 中剂量组 TIMP-1 表达与小剂量组相比明显增高 第 7 天 大 中剂量组 TIMP-1 表达有显著性差异(P0.05) 第 11 天,大 中 小剂量组间无显著性差异(P0.05) 大 中剂 量组TIMP-1表达均与FB增殖呈正相关 第3 5 7 9天 大 中 小剂量组MMP-13表 达均比模型组明显增多 第 11 天大 中 小剂量组 MMP-13 表达比模型组明显减少 大 中剂量组 MMP-13 表达明显低于小剂量组 第 11 天,大 中 小剂量组 MMP- 1 TIMP-1 比值与模型组比明显小
【学位授予单位】:北京中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R259.8

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