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《北京中医药大学》 2004年
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瓜蒌甘草颗粒对流感病毒FM_1所致肺炎的免疫炎症机制研究

余如瑾  
【摘要】:成人病毒性肺炎是威胁人类健康的重大疾病之一,具有病情重和较高病死率的特点, 目前缺乏特效治疗手段。发挥传统中医防治病毒性肺炎的优势,并探讨其疗效机制,是提 高病毒性肺炎的防治水平的重要途径之一。本研究在此背景下,进行了成人病毒性肺炎中 医病机及瓜蒌甘草颗粒(GLGC)对其作用机制的研究,以期为提高中医药防治成人病毒 性肺炎的水平提供一定的理论和实验依据。 本研究分为理论研究和实验研究。 1 理论研究 在文献回顾及导师相关经验总结的基础上,提出成人病毒性肺炎属于中医风温肺热病 和疫病的范畴;成人病毒性肺炎病机与痰、热、毒、虚、瘀等有关;正气不足是其发病的 内伤基础;内生之毒续生是其重要的病理环节;痰热毒互结、肺气壅塞是其重要的病机特 点;瘀血阻络是其后续病理表现;正邪对比是决定其预后转归的关键因素。进而提出病毒 性肺炎的重要病理状态是痰热毒壅肺、正气不足,清热化痰,解毒益气是其重要治法之一。 2 实验研究 2.1 目的 药效学研究是为证实以清热化痰、解毒益气为法的瓜蒌甘草颗粒治疗流感病毒FM1所 致病毒性肺炎的有效性而设;在此基础上,进一步从病理形态学、氧自由基损伤、免疫调 节、免疫炎症相关因子的分泌情况来探讨瓜蒌甘草颗粒对流感病毒FM1感染所致的病毒性 肺炎免疫炎症机制的作用。 2.2 方法 药效学研究:以小鼠酚红排泄实验方法观察瓜蒌甘草颗粒的祛痰作用;以小鼠经鼻吸 入流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株(FM1)复制小鼠病毒性肺炎模型,并用瓜蒌甘草颗粒进 行治疗,设置利巴韦林治疗对照组,观察其对流感病毒FM1感染小鼠的死亡保护作用、体 重、肺指数及病毒血凝滴度的影响。 肺脏病理学研究:按照上法复制小鼠病毒性肺炎模型,用瓜蒌甘草颗粒进行治疗,观 察其对流感病毒FM1感染小鼠病理改变的影响,设置利巴韦林治疗对照组。用肉眼、光镜 和透射电镜对各组肺脏标本进行病理形态学观察,同时采用半定量分析方法比较各组病理 形态学差异。 肺脏氧自由基损伤研究:小鼠病毒性肺炎模型复制方法同前,分别于第 1、3、5、7 WP=6 -4- 瓜蒌甘草颗粒对流感病毒 FM1所致肺炎的免疫炎症机制研究 天动态观察瓜蒌甘草颗粒对流感病毒肺炎小鼠肺组织超氧化物歧化酶(SOD)及脂质过氧 化产物丙二醛(MDA)含量的影响,设置利巴韦林治疗对照组。 淋巴细胞增殖及 NK 细胞活性研究:用 MTT 比色法,观察瓜蒌甘草颗粒对感染小鼠 淋巴细胞增殖及NK细胞活性的影响,设置利巴韦林治疗对照组;小鼠病毒性肺炎模型复 制方法同前。 免疫炎症相关因子研究:用ELISA 法,于第1、3、5、7 天动态观察瓜蒌甘草颗粒对 感染小鼠肺脏和外周血清中TNF-α、IL-6、MCP-1、IFN-γ和IL-10的影响。小鼠病毒性肺 炎模型复制方法同前。 2.3 结果 药效学研究结果显示,以清热化痰、解毒扶正为法的瓜蒌甘草颗粒能促进小鼠气道酚 红的排泄;瓜蒌甘草颗粒治疗组较模型组死亡率明显降低,平均生存天数明显延长,体重 下降得到明显改善,肺指数和血凝滴度都明显降低。 肺脏病理学研究结果显示,模型组肺脏大体病变呈实变,出血;光镜下观察病理组织 学改变,呈重度间质性肺炎病变,可见支气管上皮脱落,肺泡间隔增厚,肺泡壁和细支气 管壁大量单个核细胞浸润,形成实变区,肺泡腔内浆液性惨出,并形成代偿性肺水肿;电 镜下观察各组肺脏超微结构,肺脏间质细胞增加,间质水肿,肺泡腔中可见大量坏死脱落 细胞和少量红细胞,可见凋亡小体;肺泡壁有较多的间质细胞;血管壁基底膜增厚水肿, 血管内充满红细胞(肺血管淤血),血管腔内可见单个核细胞嵌顿。瓜蒌甘草颗粒治疗组 与模型组相比,无论是肺脏大体病变、病理组织学改变以及超微结构均有明显改善。 肺脏氧自由基损伤研究结果显示,模型组各时相肺组织中脂质过氧化产物 MDA 的含 量均较假手术组显著升高,而抗氧自由基损伤的 SOD 含量较假手术组则均显著下降;瓜 蒌甘草颗粒治疗组与模型组相比,MDA含量降低,其中第5、7天有显著差异;瓜蒌甘草 颗粒治疗组与模型组相比,SOD含量则明显恢复,其中第5、7天有显著差异。 淋巴细胞增殖和NK活性研究结果显示:模型组小鼠脾T、B淋巴细胞增殖能力和NK 细胞活性较假手术组均明显降低;瓜蒌甘草颗粒治疗组脾 T、B 淋巴细胞增殖能力和 NK 细胞活性较模型组有明显恢复。 免疫炎症相关因子研究结果如下: 模型组肺组织匀浆液中TNF-α含量较假手术组升高,其中第1、3、5天增高有显著差 异;GLGC治疗组肺组织匀浆液中TNF-α含量较模型组降低,其中第3天有显著差异。外 周血清中模型组TNF-α含量较假手术组亦有升高,其中第3天有显著差异;GLGC治疗组 血清TNF-α含量较模型组无明显改变。 肺组织匀浆液中模型组IL-6含量较假手术组升高,其中第3天有显著差异;GLGC治 疗组肺组织匀浆液IL-6含量较模型组降低,其中第3天有显著差异。外周血清中模型组IL-6 含量较假手术组亦有升高,其中第3天有显著差异;GLGC治疗组血清IL-6含量较模型组 无明显改变。 WP=7 中文摘要 -5- 肺组织匀浆液中模型组各时相 MCP-1 含量较假手术组均显著升高,GLGC 治疗组肺 组织匀浆液MCP-1含量较模型
【学位授予单位】:北京中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R259.6

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【引证文献】
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6 袁旭鑫;不同时相力竭运动对大鼠心肌EGR-1、CYR61及CTGF的影响[D];上海体育学院;2010年
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