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《北京中医药大学》 2005年
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清营解表法对流感病毒感染小鼠免疫调节机制的实验研究

吕翠霞  
【摘要】:流感是由流感病毒引起的严重危害人类健康的一种急性病毒性呼吸道传染病。流感中医称时行感冒,总属温病、外感发热等范畴,是一种古老的疾病。中医治疗温病由来已久,中医药防治流感,特别是在控制症状、改善预后等方面疗效显著,充分显示出强大的生命力,成为目前防治流感的重要研究方向。但是随着人类体质和疾病谱的的改变,中医中药仍面临提高疗效的问题。 本文首先就外感表证的治法沿革与现状分析、温病伏气发病观的探讨、流感的免疫机制和中医药实验研究进展几方面作了文献回顾。 在理论探讨部分,从营卫学说论证外感表证不仅关乎卫,而且关乎营。从反复外感患者的体质特征 “内热体质”论发病之内因,以伏气发病观为说理工具,论伏邪之病位病性 “营分热”,结合流感的病因发病特点,阐述了导师姜建国教授对目前临床常见的一种营热外感证型的新认识,即素体内热患者(如平素手足心热、唇红、乳蛾红或肿、便秘史、舌红、无苔或苔黄),加之反复外感,使营分伏热,新感诱发的外感病发病初期不但具有风热外感的特点,又具有反复外感,不易治愈,每次病程较长,短时易复发的与一般外感不同的临床特点。治疗上提出表里同治,辛凉解表为主,兼清透营热。并研制了清营解表合剂,全方以双花、连翘辛凉解表祛邪为主,以少量白薇、生地、麦冬清营凉血调质为辅,荆芥、防风与双花、连翘寒温相合利于透邪外出,炒牛子利咽、甘草和药,经临床预试显示疗效肯定。 在实验研究部分,为探讨对清营解表合剂对流感病毒感染发挥作用的免疫学机制,采用A/PR/8/H1N1流感病毒复制小鼠流感模型,应用流式细胞术、酶联免疫等研究技术及方法,针对流感病毒所致的免疫病理状态,以“免疫调节”为切入点,观察清营解表治法对Th1/Th2漂移及相关的免疫效应细胞功能的影响,从整体、细胞和分子水平探讨清营解表法对流感模型的免疫网络平衡调节机制,为临床辨治营热外感,早期使用清营药提供科学依据。主要进行实验有: 1 清营解表合剂对流感病毒A/PR/8/H1N1感染小鼠的死亡保护作用 结果显示,感染模型组,感染24小时后,开始发病,呼吸日渐加快,短促,以腹式呼吸为主,行动较迟缓,蜷缩,毛发欠光泽,食欲减退,体重减轻,饮水量减低;病毒唑组、清营解表合剂组、银翘解毒颗粒各组症状均较模型组依次减轻。 正常空白组未见小鼠死亡,感染模型组死亡率达90%,病毒唑组死亡率为20%,与模型组比较P0.01;清营解表合剂组大剂量组死亡率为45%,中剂量组死亡率为55%,与模型组比较,分别P0.01、P0.05。银翘解毒颗粒组死亡率为75%,小剂量组为70%,与模型组比较均P0.05。说明清营解表合剂大、中剂量组可以降低流感病毒感染小鼠的死亡率。清营解表合剂大中剂量组死亡保护 中文摘要 III 率分别为45%、35%。 结果提示,清营解表合剂可以改善流感病毒感染小鼠的一般状况,对流感 病毒感染小鼠有保护作用,与银翘解毒颗粒组比较作用为优。 2 清营解表合剂对流感病毒A/PR/8/H1N1感染小鼠肺指数、肺组织中病毒 血凝滴度、肺组织病理影响的研究 结果显示,感染模型组与正常空白组相比,小鼠的肺指数增加,肺组织的 病毒血凝滴度增加,肺组织显示病毒性肺炎改变;清营解表合剂组的肺指数和 病毒血凝滴度均较模型组下降,肺组织病毒性肺炎改变较模型组明显减轻。 结果提示,清营解表合剂可抑制流感病毒在肺中的复制,可减轻肺组织的 炎症改变。 3 清营解表合剂对流感病毒A/PR/8/H1N1感染小鼠巨噬细胞吞噬功能影响 的研究 采用中性红法,对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能进行测定,观察清营解 表合剂对造模小鼠的非特异免疫功能的影响。 结果显示,感染模型组巨噬细胞吞噬功能较正常空白组降低,P0.05,清 营解表合剂组和银翘解毒颗粒的巨噬细胞吞噬功能较感染模型组有所升高,P 均0.01。 结果提示,清营解表合剂和银翘解毒颗粒均可以提高流感病毒感染小鼠巨 噬细胞的吞噬功能。 4 清营解表合剂对流感病毒A/PR/8/H1N1 感染小鼠淋巴细胞的增殖功能 影响的研究 通过 ConA 或 LPS 分别对小鼠脾脏的 T 淋巴细胞和 B 淋巴细胞的增殖进 行诱导,观察清营解表合剂对造模小鼠的细胞和体液特异性免疫功能的影 响。 结果显示,感染模型组 T、B 淋巴细胞的增殖功能较正常空白组下降, P0.01;清营解表合剂组、银翘解毒颗粒组 T、B 淋巴细胞的增殖均较模型组 升高,P0.01,差异显著。 结果提示,清营解表合剂、银翘解毒颗粒均可以提高流感病毒感染小鼠的 细胞免疫和体液免疫功能,对抑制病毒有利。 5 清营解表合剂对流感病毒感染小鼠Th1/Th2影响的研究 采用FCM法,观察流感病毒感染小鼠后第1、3、7、12天脾中细胞因子Th1/Th2 的表达,研究清营解表合剂对造模小鼠后不同时相Th1/Th2平衡调节的影响, 从分子水平探讨清营解表合剂的作用机制。 各组间比较结果显示: 感染后第3天,实验各组Th1/Th2都有升高,但无显著性差异。 感 染 后 第 7天 , 感 染 模 型 组 Th1/Th2值 升 高 , 清 营 解 表 合 剂 中 剂 量 组 的 Th1/Th2值也继续升高、银翘解毒颗粒组次之,与空白对照组有显著性差异。 感染后第12天,感染模型组与空白组比较显著升高P0.01,银翘解毒颗粒 清营解表法对流感病毒感染小鼠免疫调节机制的
【学位授予单位】:北京中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R285

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