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《北京中医药大学》 2005年
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柴胡ITS序列研究、药源调查及商品鉴定

武莹  
【摘要】:柴胡是一种常用中药,也是一种多来源药材,在中国应用已有 2000 多年的历史。《中华人民共和国药典》(2000 版)记载柴胡的来源为伞形科植物柴胡 Bupleurum chinense DC.、狭叶柴胡 B.scorzonerifolium Willd.的干燥根。但在实际应用中,柴胡的商品来源非常复杂。柴胡属植物的绝大部分种类在产地均作柴胡药用。由于柴胡使用品种混乱,造成柴胡及其制品质量不稳定。所以,柴胡的品种整理和研究亟需进行。 作者首先对我国北方的几个大型药材市场、GAP 药材种植基地及柴胡药材产区进行了市场调查。发现现今柴胡应用以北柴胡、南柴胡为主,但还是有混杂现象。在药材市场中柴胡饮片还有销售,并且加工质量较为粗糙,掺伪现象时有发生。柴胡的种植品种不清,致使柴胡的药材质量不能得到很好的保证。作者建议药监部门应加大监管力度;利用野生资源的同时,逐步过渡到以栽培为主,并且确定品种,从而做到品种单一、质量提高。 此外,作者收购了全国 16 个省市 41 份商品柴胡进行性状及显微鉴别研究。利用传统的鉴别方法,作者鉴别出北柴胡 16 份,南柴胡 3 份,锥叶柴胡4 份,银州柴胡、小叶黑柴胡、大叶柴胡、三岛柴胡各 2 份,秦岭柴胡、线叶柴胡、阿尔泰柴胡各 1 份。另外还有 7 份因各种原因不能确定品种。由此可见,柴胡的使用品种非常混乱,这也是造成柴胡质量不稳定的主要原因。同时作者也发现传统的鉴别方法虽然简便易行,但对于柴胡属植物而言,仅仅利用传统鉴别方法,很难准确地将它们区分开。 由于柴胡属植物多数形态、组织较为接近,且受产地、生态环境、采收时间、加工方法等因素的影响,同一种柴胡在各方面的生药鉴别特征也会有所变化,这就更增加了柴胡药材鉴别的难度。所以,有必要采用一种新的方法来有效地鉴别柴胡属植物。作者尝试采用从 DNA 分子水平进行柴胡种间鉴别的方法。作者收集了常用柴胡植物及腊叶标本 11 份,提取总 DNA 后,通过PCR 扩增技术,选取 rDNA 中进化速率最快的 ITS 区(核 rRNA 基因的内转录间隔区,internal transcribed spacer)进行测序,与 Genbank 中三岛柴胡Bupleurum falcatum L.序列进行对比,分析柴胡属 12 种植物种间差异和遗传距离。通过比较柴胡属植物的 ITS 序列,作者发现柴胡属植物的 ITS 序列差异明显,为鉴别柴胡属植物提供了一种新的方法。同时作者还利用柴胡属植物之间的亲缘关系及遗传距离,探讨了柴胡属内植物的分类问题。并为国产柴胡属植物及三岛柴胡的药用提供了一些建议。 通过各部分研究结果及本草文献分析,作者对柴胡的品种鉴别提出了初步意见: 1.柴胡商品药材应用较为混乱,市场上以北柴胡、南柴胡等正品柴胡为 中文摘要 Ⅲ 主,掺杂有锥叶柴胡、银州柴胡、小叶黑柴胡等混杂品。也有的柴胡药材及 饮片中掺假。应尽快建立柴胡的 DNA 分子水平鉴别方法,以便对现今市场混 乱的柴胡品种进行准确鉴别。 2.柴胡属植物属内分类系统是一项比较复杂的工程,应该应用多种方法 进行全面分析。作者不支持将大叶柴胡单独列为一个亚属的说法。 3.建议将小叶黑柴胡 B.smithii Wolff var.parvifolium Shan et Y.Li 单独列为一种,而不是作为黑柴胡 B.smithii Wolff 的变种。 4.三岛柴胡 Bupleurum falcatum L.与我国的柴胡 Bupleurum chinense DC. 不同,不应将他们混为一谈。 关键词:柴胡 品种整理 生药鉴定 PCR 扩增 ITS 序列
【学位授予单位】:北京中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S567.79

【引证文献】
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【参考文献】
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【共引文献】
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【二级参考文献】
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