复芪功血方的质量标准及止血药理研究

【摘要】：复芪功血方是季绍良教授的临床经验方，由黄芪、三七、断血流三味中药组成，对治疗脾不统血证功能失调性子宫出血有很好的疗效。本文完成了该方的部分药化及药理研究，得出了以下结论： 1．通过设计三条提取工艺路线，以君药黄芪甲苷为指标性成分，对提取物中黄芪甲苷含量、出膏率及转移率的研究表明：水提黄芪甲苷的含量在0.11％左右，出膏率20％左右，转移率50％左右，而乙醇提取黄芪甲苷含量为14％左右，出膏率24％左右，转移率80％左右，从而确定了复芪功血方的提取工艺为全方混合乙醇提取。 2．优化全方混合乙醇提取工艺，对比50％乙醇提取和70％乙醇提取黄芪甲苷含量，出膏率及转移率，结果表明：两种浓度乙醇提取物中黄芪甲苷含量、出膏率及转移率无差别，从经济角度考虑，选择50％乙醇提取。 3．采用4因素3水平正交试验法，研究提取时间、提取次数、溶剂倍数在提取工艺中对指标性成分黄芪甲苷含量的影响，结果表明：以黄芪甲苷提取量为指标进行方差分析，提取次数及提取次数各水平间均有显著性差异。复芪功血方最佳提取工艺为：50％乙醇提取C_3次，溶剂用量B_1倍量，每次提取A_1小时。并进行了工艺验证实验。 4．建立了复芪功血方中三味药材的薄层定性检识方法，以氯仿—甲醇—水(65：35：10)为展开系统，10％乙醇硫酸显色。结果显示在供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在阴性色谱中，与对照品及对照药材色谱相应的位置上不显斑点。 5．建立了复芪功血方中指标性成分黄芪甲苷的含量测定方法，采用ELSD-HPLC对黄芪甲苷进行定量分析，并对其进行方法学考察，黄芪甲苷的回归方程为y=1.6855x+0.9073，R=0.9994，表明黄芪甲苷在2.5μg～10μg范围内与色谱峰峰面积呈良好得线性关系，加样回收率95.5％，RSD=0.57％。原药材中黄芪甲苷的含量为0.078％。 6．第7天大黄泻下致脾虚模型组小鼠体重与生理盐水组小鼠体重相比，体重明显降低，体重差异统计学有极显著的意义(P＜0.01)；大剂量、中剂量、小剂量及拆方组与生理盐水组相比，体重差异统计学有极显著性意义(P＜0.01)；行为学体征及体重数据说明造模成功，小鼠成病理态。 正常组小鼠灌胃，体重按正常增加，小鼠体征及行为无异常。 7．小鼠断尾止血试验结果表明：大、中、小剂量组及拆方组出血时间均比生理盐水组出血时间短，出血时间差异统计学有较显著意义(P＜0.05)，全方各剂量组及拆方组都能明显缩短正常雌性小鼠的出血时间。出血时间与全方剂量大小成反比关系。 8．对脾气虚模型小鼠出血时间影响结果表明：各组小鼠出血时间均比模型组小鼠的出血时间短，出血时间差异统计学有极显著意义(P＜0.01)；小剂量组出血时间比大剂量组及中剂量组出血时间短，出血时间差异统计学有较显著意义(P＜0.05)；拆方组出血时间比全方大剂量组、中剂量组出血时间长，出血时间差异统计学有较显著意义(P＜0.05)，