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复芪功血方的质量标准及止血药理研究

李爱君  
【摘要】:复芪功血方是季绍良教授的临床经验方,由黄芪、三七、断血流三味中药组成,对治疗脾不统血证功能失调性子宫出血有很好的疗效。本文完成了该方的部分药化及药理研究,得出了以下结论: 1.通过设计三条提取工艺路线,以君药黄芪甲苷为指标性成分,对提取物中黄芪甲苷含量、出膏率及转移率的研究表明:水提黄芪甲苷的含量在0.11%左右,出膏率20%左右,转移率50%左右,而乙醇提取黄芪甲苷含量为14%左右,出膏率24%左右,转移率80%左右,从而确定了复芪功血方的提取工艺为全方混合乙醇提取。 2.优化全方混合乙醇提取工艺,对比50%乙醇提取和70%乙醇提取黄芪甲苷含量,出膏率及转移率,结果表明:两种浓度乙醇提取物中黄芪甲苷含量、出膏率及转移率无差别,从经济角度考虑,选择50%乙醇提取。 3.采用4因素3水平正交试验法,研究提取时间、提取次数、溶剂倍数在提取工艺中对指标性成分黄芪甲苷含量的影响,结果表明:以黄芪甲苷提取量为指标进行方差分析,提取次数及提取次数各水平间均有显著性差异。复芪功血方最佳提取工艺为:50%乙醇提取C_3次,溶剂用量B_1倍量,每次提取A_1小时。并进行了工艺验证实验。 4.建立了复芪功血方中三味药材的薄层定性检识方法,以氯仿—甲醇—水(65:35:10)为展开系统,10%乙醇硫酸显色。结果显示在供试品色谱中,在与对照品及对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;在阴性色谱中,与对照品及对照药材色谱相应的位置上不显斑点。 5.建立了复芪功血方中指标性成分黄芪甲苷的含量测定方法,采用ELSD-HPLC对黄芪甲苷进行定量分析,并对其进行方法学考察,黄芪甲苷的回归方程为y=1.6855x+0.9073,R=0.9994,表明黄芪甲苷在2.5μg~10μg范围内与色谱峰峰面积呈良好得线性关系,加样回收率95.5%,RSD=0.57%。原药材中黄芪甲苷的含量为0.078%。 6.第7天大黄泻下致脾虚模型组小鼠体重与生理盐水组小鼠体重相比,体重明显降低,体重差异统计学有极显著的意义(P<0.01);大剂量、中剂量、小剂量及拆方组与生理盐水组相比,体重差异统计学有极显著性意义(P<0.01);行为学体征及体重数据说明造模成功,小鼠成病理态。 正常组小鼠灌胃,体重按正常增加,小鼠体征及行为无异常。 7.小鼠断尾止血试验结果表明:大、中、小剂量组及拆方组出血时间均比生理盐水组出血时间短,出血时间差异统计学有较显著意义(P<0.05),全方各剂量组及拆方组都能明显缩短正常雌性小鼠的出血时间。出血时间与全方剂量大小成反比关系。 8.对脾气虚模型小鼠出血时间影响结果表明:各组小鼠出血时间均比模型组小鼠的出血时间短,出血时间差异统计学有极显著意义(P<0.01);小剂量组出血时间比大剂量组及中剂量组出血时间短,出血时间差异统计学有较显著意义(P<0.05);拆方组出血时间比全方大剂量组、中剂量组出血时间长,出血时间差异统计学有较显著意义(P<0.05),


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