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《北京中医药大学》 2006年
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肛瘘膏治疗小儿肛瘘的临床与细胞生物学研究

贝绍生  
【摘要】: 1研究目的 小儿肛瘘是小儿科常见的肛肠疾病,其病因和治疗与成人肛瘘不尽相同。尽管某些小儿肛瘘有自愈倾向,但在临床治疗中,由于护理不当等原因,易使病情反复或加重。导师在临床中应用祛风除湿化瘀法治疗小儿肛瘘已经初步取得良好的疗效。本研究拟进一步系统观察肛瘘膏治疗小儿肛瘘的临床疗效,深入研究瘘管反复发作不能愈合及祛风除湿化瘀为治则的肛瘘膏治愈小儿肛瘘的细胞生物学作用机理,为临床治疗本病提供更确切的方法。 2研究方法和内容 2.1临床研究 采用随机、对照的方法选择38例小儿肛瘘患者分为治疗组与对照组各19例。治疗组选用肛瘘膏,对照组选用马应龙麝香痔疮膏,记录患者的发病病因、病程、疾病分型、体温、内口位置及数量、采用3级评分法评定患者临床症状、体征、指诊、舌苔、脉象或察指纹情况;治疗后症状、体征、指诊、肛管局部分泌物pH值的变化、不良反应及随访情况。 2.2实验研究 ⑴实验一:选择手术剔除的一完整小儿肛瘘瘘管组织,采用组织细胞体外培养技术原代培养成纤维细胞并进行纯化、传代。观察成纤维细胞一般生物学特性、绘制成纤维细胞生长曲线、成纤维细胞HE染色观察并采用免疫细胞化学进行细胞起源鉴定。对照组取直肠下段黏膜、黏膜下层组织标本进行体外成纤维细胞培养观察。 ⑵实验二:选用体外培养的肛瘘瘘管组织成纤维细胞,并与PPH术(痔上黏膜环形切除吻合术)中取下的直肠下段黏膜及黏膜下层组织进行体外细胞培养的对数生长期成纤维细胞做对照,分别加入用药物血清学方法制备的不同浓度全方药物血清、祛风除湿拆方及活血化瘀拆方药物血清。观察各组成纤维细胞生物学性状的改变。应用流式细胞仪检测用药前后细胞周期及细胞凋亡情况。 ⑶实验三:将原代培养的肛瘘瘘管组织细胞进行酶消化法纯化培养获得上皮细胞,采用免疫细胞化学进行细胞起源鉴定。取培养的上皮细胞分别加入不同浓度全方、祛风除湿拆方、活血化瘀拆方水溶液,药物干预后12h、24h,观察各组上皮细胞的一般生物学性状变化,应用间接免疫荧光细胞化学法联合LSCM观测瘘管上皮细胞角蛋白分布及含量变化。 ⑷实验四:向对数生长期瘘管成纤维细胞悬液内加入含不同浓度药物血清的DMEM
【学位授予单位】:北京中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R272

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【参考文献】
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