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《北京中医药大学》 2007年
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缬草属常用药用植物形态特征、光谱鉴别及ITS序列研究

万新  
【摘要】: 为了确定我国缬草属(Valeriana L.)常用药用植物的主流品种并对其进行分类学研究及药材鉴别,本文从基于植物外在表型的形态特征、基于内部物质组分的光谱特征和基于物种遗传基因的DNA分子标记三个层面入手,通过品种考证、资源调查、形态指标聚类分析、显微观察、紫外、红外光谱分析、ITS序列分析等手段对我国常用的5种缬草属植物及欧缬草进行比较研究,得出如下结果: (1)品种考证结果认为缬草在我国历代本草中尚未发现记载,而蜘蛛香自明代始载。我国缬草属有文献记载药用情况的共9种植物,其中药用广泛、产量规模较大且研究报道较为集中的为缬草V. pseudofficinalis C. Y. Cheng et H. B. Chen、宽叶缬草V.officinalis L. var. latifolia Miq.、黑水缬草V. amurensis Smir. ex Komarov、蜘蛛香V. jatamansi Jones和长序缬草V. hardwickii Wall.5种,此外欧洲的缬草品种V. officinalis L.在我国尚有栽培。前三者及欧缬草均作药材缬草入药,后二者分别成为不同的药材品种。上述6种植物中,国产缬草、宽叶缬草与欧洲产缬草一直存在分类学争议。 (2)通过对北京松山、四川峨眉山、湖北恩施三个典型缬草属植物生境调查,记录了缬草、蜘蛛香、宽叶缬草、长序缬草的生长环境及习性。由于湖北恩施宽叶缬草资源非常丰富,又因当地土壤富硒而用原子荧光法测得其药材含硒量较高,达0.2 mg/kg以上,有望作为特色道地药材开发。同时调查了当地宽叶缬草栽培技术研究进展。 (3)通过核查大量标本,描述了上述6种缬草形态。并通过形态指标聚类分析,认为缬草与欧缬草为不同种,而宽叶缬草为缬草种下等级,由于存在大量过渡种,尚不能确定我国不出产欧缬草。上述种的主要分类区别为叶裂片数及裂片形态。通过对其果实显微观察,利用其大小、形状、被毛情况、基部是否偏斜或凹陷、表面色斑及斑点等特点可将6种区分;通过对其花粉粒电镜观察,利用其大小、形状、孔沟及刺状雕纹形态可将6种区分,且都表明宽叶缬草与缬草相似,二者与欧缬草不同。 (4)首次进行6种缬草20个样品的水、乙醇、氯仿、石油醚紫外谱线组研究,发现其高极性溶剂谱线形态能够体现种间差异和种内稳定性,可作为缬草属不同品种药材的鉴别依据;低极性溶剂谱线峰在一定程度上反映了其内在质量;通过峰位及峰值的聚类分析,可明显分为缬草类、长序缬草类、蜘蛛香类三类药材,与药用情况一致;而紫外谱线组的特征可作细致种间区分。首次对以上样品粉末直接压片进行傅立叶变换中红外光谱研究,其谱线特征种间稳定,可用于鉴别,同时某些精细结构可反映地域区别。 (5)首次优化了缬草属药材DNA提取方法和ITS序列PCR扩增条件,设计出特异引物。通过对上述6种缬草属植物ITS序列分析,发现全长为642-644bp,其中ITS1为233-234bp,5.8S为160bp,ITS2为249-250bp,而5.8S片段序列完全一致。其中缬草属内相似度在95.8-99.5%之间,相互差异最小的三个种是缬草、欧缬草和宽叶缬草,支持了缬草与欧缬草为不同种、宽叶缬草为缬草种下等级。由于ITS序列在缬草种内非常稳定,可作为处理缬草属过渡类型分类问题的有力工具。同时将缬草属药材分为三类:长序缬草类、蜘蛛香类及欧缬草、缬草、宽叶缬草和黑水缬草组成的缬草类,这与我国民间药用传统相吻合,证明其各有特色;其序列特征同时可作为药材鉴定依据。
【学位授予单位】:北京中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R282

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【引证文献】
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【同被引文献】
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