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蜈蚣抗肿瘤蛋白的分离纯化与药理机制初探

张丽  
【摘要】: 目的 蜈蚣具有确切的中医抗肿瘤临床基础。本课题旨在追踪蜈蚣主要抗肿瘤蛋白,并初步探讨蜈蚣蛋白的抗肿瘤药理机制。 方法 1.蜈蚣抗肿瘤蛋白的分离纯化研究采用(NH4)2SO4沉淀、Sephadex G-25凝胶过滤层析除盐并粗分、Q Sepharose fast flow离子交换层析、Sephadex G-200凝胶过滤层析对蜈蚣蛋白进行分离纯化,并采用MTT法进行体外抑瘤活性检测,以追踪蜈蚣主要抗肿瘤活性蛋白。 2.抗肿瘤蛋白组分CGⅠ1的药理机制研究 采用人宫颈癌Hela和胃腺癌BGC-823两种细胞株,从诱导肿瘤细胞凋亡与细胞毒性的角度探索蜈蚣蛋白组分CGⅠ的药理机制。 诱导肿瘤细胞凋亡方面,本论文选取了吉姆萨染色、吖啶橙/溴化乙锭荧光双染色、吖啶橙染色等形态学方法与DNA碎片的琼脂糖凝胶电泳分析等指标。细胞毒性方面,本论文选取MTT、乳酸脱氢酶漏出率检测和细胞蛋白质含量测定等指标。 结果 本实验研究首次对蜈蚣抗肿瘤蛋白进行了较深入的分离纯化。变性凝胶电泳显示,所得活性最强的蛋白组分含8条清晰条带。分离纯化后的蛋白组分体外抑瘤活性较蜈蚣总蛋白提高了近10倍。 MTT实验结果显示,蜈蚣蛋白组分CGⅠ有很强的体外抗宫颈癌Hela细胞和胃癌BGC-823作用,呈明显的量效关系和较明显的时效关系;且CGⅠ作用后,细胞LDH漏出率增高,细胞中蛋白质明显减少;通过三种染色观察,该蛋白组分能使细胞膜膨胀发泡,未出现典型凋亡小体;DNA琼脂糖凝胶电泳结果没有梯形条带。 结论 首次获得较纯的蜈蚣抗肿瘤蛋白。所得蜈蚣抗肿瘤蛋白组分值得进一步分离纯化研究。 蜈蚣蛋白组分CGⅠ有很强的体外抗宫颈癌Hela细胞和胃癌BGC-823作用,其抗肿瘤直接作用机制不是诱导细胞凋亡,而是通过破坏细胞膜从而杀死肿瘤细胞。


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1 任世峰;如何养蜈蚣[N];河南科技报;2001年
2 叶水泉;蜈蚣新用[N];中国中医药报;2010年
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