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《首都师范大学》 2000年
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营养相关基因(fdr3和TaNRT1)功能的进一步研究

白彦霞  
【摘要】: Ⅰ 玉米缺铁相关基因fdr3的western与Southern blotting fdr3是由缺铁诱导的玉米根cDNA文库经差示筛选得到的阳性克隆之一。用 IPTG诱导含有fdr3重组质粒的E.coli菌株,其表达产物经SDS-PAGE分离后 与铁相关抗血清进行western blotting,结果有一杂交区带。缺铁胁迫处理的玉米 根可溶性蛋白经与同一抗血清进行western blotting,在40kD左右出现一杂交区 带。对fdr3进行DNA序列分析,发现其中有一个1068bp的开放读框(ORF), 这可能与western blotting检验的40kD蛋白区带在分子量上具有相关性。在 GenBank中的同源性分析表明它是一未知基因。其编码氨基酸序列的疏水性分析 表明其中含有几个疏水结构域,表现出完整功能蛋白的结构特点。从fdr3的 1068bp的ORF中切下约800bp的片段,作为探针,分别与玉米、小麦、烟草和 衣藻的基因组DNA进行Southern blotting,结果在玉米、小麦和衣藻中都有明显 的杂交信号,而在烟草中未出现信号,推测此片段可能不是双子叶植物烟草基因 组DNA的成分。 Ⅱ 小麦NO_3~--transporter基因片段的克隆与pGEX-2T-TaNRT1融合蛋白基因的 构建 在前人实验的基础上,为了进一步研究小麦的高亲和力NO_3-transporter基因 TaNRT1(AF fragment),把从小麦根总RNA中,通过RT-PCR获得的高亲和力 NO_3-transporter基因片段与pBluescript-T质粒载体连接重组。经过克隆筛选、酶 切和测序分析,表明所构建筛选的重组体正确,其外源片段为657bp左右,并修 正了前期PCR产物的AF片段的多处N碱基。接着,又从T-vector上切下构建 到系列表达载体pGEX-1,2T,3X上,经酶切及测序分析(只有pGEX-2T-TaNRT1 测序了)表明构建的重组体结构正确。用IPTG对系列表达重组体(三个)进行 诱导表达,经电泳分析,其中pGEX2-2T-TaNRT1表达产物分子量偏小,未发现 预期的52kD左右的融合蛋白区带,现正进一步调整诱导条件,以期得到表达正 确的融合蛋白。
【学位授予单位】:首都师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2000
【分类号】:Q943.2

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【引证文献】
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1 张艳萍;FDR3和FDR4的细胞定位和功能鉴定[D];首都师范大学;2006年
【参考文献】
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1 印莉萍,祁晓廷,刘祥林,孙进,吴娟,邱泽生;缺铁玉米根cDNA文库的构建及蛋白和cDNA差异比较[J];首都师范大学学报(自然科学版);1999年04期
2 李玉京,刘建中,李滨,李继云,李振声;与高等植物吸收(NO_3)~-/(NH_4)~+、(PO_4)~(3-)和K~+有关的膜转运蛋白编码基因的分子生物学研究现状[J];生物工程进展;1999年02期
3 印莉萍,温波,刘祥林,高志环,邱泽生;小麦高亲和力NO_3~-转运体基因相关序列的克隆与表达分析[J];自然科学进展;2000年06期
4 何新华;植物中的铁素营养[J];植物学通报;1992年04期
5 张福锁;;根分泌物与禾本科植物对缺铁胁迫的适应机理[J];植物营养与肥料学报;1995年01期
6 吕殿青,同延安,孙本华,OveEmteryd;氮肥施用对环境污染影响的研究[J];植物营养与肥料学报;1998年01期
7 何绪生,李素霞,李旭辉,吕殿青;控效肥料的研究进展[J];植物营养与肥料学报;1998年02期
8 左元梅,李晓林,张福锁,曹一平,王运华;玉米花生混作对花生根系还原力和花生铁营养的影响[J];植物营养与肥料学报;1998年02期
9 李生秀;植物营养与肥料学科的现状与展望[J];植物营养与肥料学报;1999年03期
【共引文献】
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1 张智猛,万书波,戴良香,张成松;花生铁营养状况研究[J];花生学报;2003年S1期
2 张洪涛;单雷;全先庆;毕玉平;杨家森;王秀丽;;花生△12脂肪酸脱氢酶基因AhFAD2B在酿酒酵母中的表达及功能分析[J];花生学报;2006年01期
3 李杨;韩柱强;熊发前;王育荣;高国庆;;MFLP分子标记技术在花生上的应用初探[J];花生学报;2010年03期
4 冯蕾,古丽努尔,杨新平;含XJT-9503高温中性蛋白酶基因Gp1重组菌B-pGp1表达条件的研究[J];皮革科学与工程;2005年05期
5 王梅英;陈慧斌;陈绍军;;武夷冻茶霉菌菌相分析及优势菌ITSrDNA鉴定[J];莆田学院学报;2011年05期
6 常新忠,王占民,马道新,孙建芝,李志伟;联合应用双自杀基因对SW1990细胞的杀伤作用[J];中国现代普通外科进展;2004年04期
7 周志艳;罗锡文;臧英;;水稻-稻田环境系统重要信息快速获取技术研究进展[J];中国科学:信息科学;2010年S1期
8 王晓兵;张薇;田国祥;;外源性皮质酮对大鼠主动脉内皮细胞热休克蛋白90表达的影响[J];中国循证心血管医学杂志;2011年03期
9 王海亭,修朝阳,丁彩凤,王贵武,董宏伟;凝血酶的亲和层析纯化技术[J];青岛科技大学学报(自然科学版);2003年03期
10 陈晓,蒋捍东,路新枝,于文功;一种用磷酸钙法高效转染HEK293T细胞方法的建立[J];中国海洋大学学报(自然科学版);2005年05期
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1 徐义流;张绍铃;;梨活体花柱内花粉RNA的降解[A];食品安全的理论与实践——安徽食品安全博士科技论坛论文集[C];2005年
2 周毅;;种子氮磷钾贮量对玉米乳苗养分分配与利用的影响[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
3 朱新开;张旭东;郭文善;封超年;彭永欣;凌启鸿;;不同类型小麦优质高产群体氮效率差异分析[A];中国作物学会栽培专业委员会换届暨学术研讨会论文集[C];2007年
4 张华鹏;张剑峰;刘俊莹;王聪聪;;马铃薯病毒(PVY、PVS和PLRV)的三重RT-PCR检测[A];马铃薯产业与科技扶贫(2011)[C];2011年
5 陈秀蓉;杨成德;贾迎春;;西瓜细菌性果斑病菌的分离鉴定[A];节能环保 和谐发展——2007中国科协年会论文集(三)[C];2007年
6 杨程;徐程扬;;根系分泌物及根际效应研究综述[A];第十届中国科协年会论文集(二)[C];2008年
7 李含芬;马春晖;;梨砧木根系Fe(Ⅲ)还原酶活性定位[A];2008园艺学进展(第八辑)——中国园艺学会第八届青年学术讨论会暨现代园艺论坛论文集[C];2008年
8 李秀春;陈日远;刘厚诚;孙光闻;黄丹枫;;磷素营养对不同品种芥蓝生长和品质的影响[A];2008园艺学进展(第八辑)——中国园艺学会第八届青年学术讨论会暨现代园艺论坛论文集[C];2008年
9 李智媛;屈淑平;崔崇士;;美洲南瓜AFLP反应体系的优化与建立[A];中国园艺学会南瓜分会西南地区南瓜产业化发展研讨会暨第三届会员代表大会论文集[C];2009年
10 王德汉;彭俊杰;廖宗文;;造纸黑液木质素对尿素氮在土壤中转化与生物利用的影响[A];第二届全国绿色环保肥料新技术新产品交流会会议交流文集[C];2002年
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1 苏伟;油菜轻简化生产中几项养分管理关键技术的初步研究[D];华中农业大学;2010年
2 郑瑜;银杏核心种质构建初探[D];华中农业大学;2010年
3 张丽军;不同氮水平下水稻组织铵态氮、磷、钾的积累特征及QTL定位分析[D];华中农业大学;2010年
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6 罗素娟;家蚕细胞周期依赖性蛋白激酶家族(CDK)的研究[D];浙江理工大学;2010年
7 陈晓平;家蚕30kD载脂蛋白19G1的表达和功能的初步研究[D];浙江理工大学;2010年
8 刘静;家蚕BmycaCR基因的原核表达和亚细胞定位研究[D];浙江理工大学;2010年
9 葛红秀;家蚕钙磷蛋白(BmCAPS)的原核表达及定位分析[D];浙江理工大学;2010年
10 梁莉惠;家蚕BmCH基因的原核表达和亚细胞定位研究[D];浙江理工大学;2010年
【同被引文献】
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1 张浩,周建光,黄翠芬;蛋白质分子细胞定位的应用[J];生命的化学;2003年06期
2 李新锋,赵淑清;转基因植物中报道基因GUS的活性检测及其应用[J];生命的化学;2004年01期
3 谭琛,董利,李江,曹利,彭聪,李小玲,李桂源;鼻咽癌相关基因NAG7编码产物的表达和定位分析[J];生命科学研究;2002年01期
4 汪恒英,周守标,常志州,马艳,秦卫华;绿色荧光蛋白(GFP)研究进展[J];生物技术;2004年03期
5 王效义;沙门氏菌毒力岛及其Ⅲ型分泌系统[J];生物技术通讯;2004年02期
6 朱佳鸣,郭勇,唐权,祖云霞;国内外生物信息学WWW服务器及数据库[J];微生物学通报;2002年01期
7 陈丹,赵洁;适合于植物花器官的冰冻切片技术[J];武汉植物学研究;2005年03期
8 尹明安,崔鸿文,樊代明,郭立;植物afp表达载体的构建及其对农杆菌的直接转化[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2001年02期
9 姜鑫;生物信息学数据库及其利用方法[J];现代情报;2005年06期
10 商英璠,肖晓旦,刘雁书;生物信息数据库与查询检索的简介[J];医学信息;2005年04期
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1 宋秀芳;玉米根中缺铁相关基因FDR3的功能鉴定[D];首都师范大学;2000年
2 王少华;玉米缺铁根PDB~(Leu)载体cDNA文库的构建及相关基因的筛选与鉴定[D];首都师范大学;2001年
3 关丽英;缺铁相关3.3kb cDNA片段的结构分析和功能研究[D];首都师范大学;2002年
4 尹文兵;水稻缺铁高表达细胞周期相关基因cullin的克隆及功能初步研究[D];首都师范大学;2005年
【二级引证文献】
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1 车金鑫;复合铁制剂在果树上的应用效果研究[D];西北农林科技大学;2011年
【二级参考文献】
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1 邱泽生,张力;玉米根细胞正面向外和内翻外质膜囊泡的分离[J];北京师范学院学报(自然科学版);1991年03期
2 李玉京,刘建中,李滨,李继云,李振声;与高等植物吸收(NO_3)~-/(NH_4)~+、(PO_4)~(3-)和K~+有关的膜转运蛋白编码基因的分子生物学研究现状[J];生物工程进展;1999年02期
3 张道勇;氮肥的利用率及其损失问题[J];土壤通报;1981年03期
4 周鸣铮;中国的测土施肥[J];土壤通报;1987年01期
5 巫东堂,王久志;土壤结构改良剂及其应用[J];土壤通报;1990年03期
6 毛达如,张承东;推荐施肥技术中施肥模型与试验设计的研究[J];土壤通报;1991年05期
7 鲁如坤,时正元,熊礼明;我国磷矿磷肥中镉的含量及其对生态环境影响的评价[J];土壤学报;1992年02期
8 曾宪坤;中国化肥工业的现状和展望[J];土壤学报;1995年02期
9 方开泰;均匀设计——数论方法在试验设计的应用[J];应用数学学报;1980年04期
10 赵翔,宁军龙,刘春新;甜菜应用高效涂层尿素和尿素增效剂试验初报[J];中国糖料;1996年02期
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7 ;疫苗[J];生物技术通报;1993年09期
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6 龚朝辉;金勇丰;张耀洲;;CTB和胰岛素融合蛋白在家蚕中表达的研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2003年学术交流会论文摘要集[C];2003年
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8 杨燕凌;;酶(蛋白)融合技术研究[A];华东地区农学会学术年会暨福建省科协第七届学术年会农业分会场论文集[C];2007年
9 邓加省;;生物生育进程由一条主导链控制[A];中国遗传学会植物遗传和基因组学专业委员会2009年学术研讨会论文摘要汇编[C];2009年
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1 本报记者 石小宏;你还有隐私吗?[N];四川日报;2000年
2 本报记者 董毅然;基因一变能成记忆超人?[N];北京科技报;2004年
3 王宪忠;性格与基因[N];中国知识产权报;2001年
4 蔡恩泽;呼之欲出的基因经济[N];山西经济日报;2000年
5 郝渊侃;达安基因管理层辩解关联交易[N];第一财经日报;2005年
6 ;认识我们的基因[N];科技日报;2003年
7 东方希望集团董事长 刘永行;改写“保守的基因”[N];中华工商时报;2008年
8 本报记者 邵斌;饮水健康与基因重整[N];大众科技报;2001年
9 鲁岩 车爱琳 中央电视台《走进科学》供稿;基因能否决定我们的命运[N];科技日报;2003年
10 佚名;基因决定你与谁一见钟情[N];北京科技报;2004年
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1 柏亚铎;犬瘟热病毒、犬冠状病毒入侵宿主细胞机制研究[D];中国农业大学;2005年
2 张怀;人Hepcidin融合表达载体的构建、在大肠杆菌中的表达及制备研究[D];北京化工大学;2005年
3 王玉梅;嵌合降钙素基因的构建及表达[D];中国海洋大学;2005年
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5 石炳兴;靶向溶栓抗凝双功能融合蛋白的构建表达及在血栓疾病治疗中的应用研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
6 蒋骅;GST-EGFR融合蛋白冲击树突状细胞治疗头颈部鳞状细胞癌体内外实验观察[D];浙江大学;2008年
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1 白彦霞;营养相关基因(fdr3和TaNRT1)功能的进一步研究[D];首都师范大学;2000年
2 陈勇;猪β_2肾上腺素能受体基因的扩增、克隆与表达[D];南京农业大学;2000年
3 张勇;人ALEX2基因的克隆、表达与纯化及生物信息学分析[D];第四军医大学;2005年
4 刘茜;乙烯不敏感显性突变基因ers2-1基因作用机理的研究[D];上海师范大学;2004年
5 张二芹;禽脑脊髓炎病毒Van Roekel株Vp0、Vp1、Vp3蛋白基因的克隆、表达与活性检测[D];内蒙古农业大学;2003年
6 黄成林;白细胞介素-1αC-889T基因多态性与冠心病关系的初步研究[D];浙江大学;2005年
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8 张宝林;一个常染色体显性遗传非综合征型耳聋家系临床分析[D];吉林大学;2005年
9 王智勇;P73在乳腺癌中的表达及其与ER、PR的关系[D];吉林大学;2005年
10 王栋;抑郁症相关基因和蛋白质数据库的构建[D];第四军医大学;2005年
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