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《首都师范大学》 2006年
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欧李(Prunus humilis Bunge)自交不亲和性及S基因的克隆

张利民  
【摘要】:自交不亲和性是被子植物预防近亲繁殖和保持遗传变异的一种重要机制,这一机制在植物界中普遍存在。许多果树如苹果、梨、杏、樱桃等都存在自交不亲和现象。由于自交不亲和是植物生殖过程中的一个重要现象,因此它已成为果树及其它植物研究的热点。欧李属蔷薇科樱桃属,为我国所特有植物,有巨大的应用价值。目前,欧李的研究主要集中在栽培、选种、果实营养特性分析等方面,而有关其育性问题的研究鲜有报道。本论文以50株野生欧李为试材,先对其育性问题进行了研究,确定其为自交不亲和;证明了欧李自交不亲和性是受S基因控制的;同时克隆鉴定出了与其相关的自交不亲和基因;发现并鉴定了欧李的四种S基因型。具体结果如下: 1.以坐果率作为自交亲和与否的指标,用传统田间自交授粉的方法对50株野生欧李试材进行自交授粉实验。调查结果显示,所研究的50株野生欧李的自交座果率(3.72%)远远低于欧李杂交座果率(30%以上),由此确定欧李为自交不亲和。 2.以坐果率作为杂交亲和与否的指标,用传统田间杂交授粉的方法确定了欧李自交不亲和是受S基因控制的。 3.根据核果类S-RNase的结构特点在C1区上游和C2区设计通用引物,以50株野生欧李的亲本,即12株野生欧李为试材,对其基因组DNA进行PCR扩增,首次得到了欧李的7条S基因的部分序列(包括C1、C2保守区),将其分别命名为S1、S2、S3、S4、S5、S6和S7。为了得S基因全序列,我们根据这6条S基因的核苷酸序列(S5除外)分别设计一条正向特异引物,与在C5保守区设计的一条反向通用引物(BFP74)构成一对特异扩增引物,进行PCR扩增,经克隆测序最终得到了3条S基因(S1、S2和S3)的全序列(除3’-和5’-端)。其余4条S基因(S4、S5、S6和S7)的克隆没能成功,这可能是由于序列较长或其二级结构较复杂造成的。 4.根据已获得的欧李S基因,对12株野生欧李中的S基因型进行了鉴定,得到了欧李的四种S基因型分为四类:S1S2、S6S7、S4S5和S3S7。
【学位授予单位】:首都师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:S662.5

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【引证文献】
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1 张红;张艳敏;陈晓流;陈学森;;欧李自交不亲和S基因的克隆及序列分析[J];西北植物学报;2008年05期
2 刘明;穆晓鹏;薛晓芳;吕淑琴;;欧李生物技术研究进展及其应用展望[J];落叶果树;2010年05期
【参考文献】
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【同被引文献】
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【二级引证文献】
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7 唐洪梅;温度处理对欧李一年生休眠枝中淀粉酶及相关产物的影响[D];河南科技大学;2012年
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