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小麦染色体骨架的原位诱导与观察

王建跃  
【摘要】:本文应用细胞化学方法对小麦根尖分生组织细胞的染色体进行原位处理,对染色体骨架存在的真实性和化学本质进行了探讨;通过光镜和电镜对骨架的形态特征和精细结构进行了观察分析;并采用胶体金免疫电镜技术探讨了肌动蛋白在染色体(骨架)中的存在状况。结果如下: 1、对小麦根尖分生细胞进行常规染色体制片、DNA酶处理、RNA酶处理、NaCl处理、硝酸银染色,在光镜、电镜下对染色体骨架的形态结构特点等进行了观察和分析,结果表明:在小麦染色体中存在真实的骨架结构;染色体骨架的化学本质是非组蛋白蛋白质:骨架显示染色体的整个形状,是一种网络状的结构:骨架在细胞周期中也是一种动态结构;着丝粒是染色体骨架的一部分。 2、对小麦根尖分生细胞进行整体银染、超薄切片不经铀、铅染色而直接在电镜下观察,结果显示中期染色体上分布着很多大小和形态很不一致的银染颗粒:小麦根尖先经低浓度的NaOH处理再整体银染后,在电镜下看到染色体被漂白,看不到银染颗粒。由此我们认为染色体中的银粒即代表构成染色体骨架的非组蛋白。 3、用抗肌动蛋白(actin)的单克隆抗体(初级抗体,Santa Cruz)为一抗,用偶联有胶体金颗粒的抗鼠IgG抗体(次级抗体,Sigma)为二抗,对小麦根尖分生细胞进行了胶体金免疫电镜实验。结果显示,在透射电镜下观察到中期细胞中,染色体横切面和残存的细胞质上都可见分布较多的胶体金颗粒。证明肌动蛋白是小麦染色体骨架蛋白的组成成分。 4、最后对染色体骨架存在普遍性、染色体骨架的精细结构和化学本质、染色体的骨架和螺旋的关系、肌动蛋白是染色体骨架的成分等进行了讨论。


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