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《首都师范大学》 2007年
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TuMV及其与CMV的嵌合片段对菜心和甘蓝的遗传转化

罗静  
【摘要】: 十字花科包括白菜类、甘蓝类、芥菜类、萝卜类等重要的蔬菜作物。病毒病是危害十字花科蔬菜的主要病害之一。目前,人们主要通过常规育种,从优质的种质资源中导入抗性基因/簇,提高作物对病毒病的抗性。但传统育种由于育种周期长、抗性基因常与不良性状连锁、优良种质资源的匮乏,以及物种间生殖隔离等因素的限制,阻碍了育种进程的快速发展。因此,利用基因工程创造新的抗病毒种质资源为当今抗性育种的一条重要补充途径。 本研究主要利用RNA干涉的原理,试图通过基因工程的手段得到能抗芜菁花叶病毒(TuMV)的菜心资源,以及同时抗芜菁花叶病毒和黄瓜花叶病毒(CMV)的甘蓝种质资源。 利用芜菁花叶病毒CP基因构建成反向重复表达载体,再利用农杆菌介导法将其导入四九菜心,共获得13个PCR阳性转化株,遗传转化效率为2.2%。 为了得到对芜菁花叶病毒和黄瓜花叶病毒双抗的甘蓝资源,首先进行了甘蓝再生体系的优化。对甘蓝下胚轴外植体的高效再生体系的优化结果表明,当选取5d苗龄的下胚轴,将其置于MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L的芽分化培养基中,并于培养基中附加AgNO_3 5.0mg/L时,可达到最佳的再生率。将含有TuMV的CP基因和CMV的2b基因组成的嵌合基因反向重复表达载体,利用农杆菌介导法将其导入甘蓝,PCR检测共获得10个阳性转化株,遗传转化效率为10.4%。进一步的病毒抗性检测正在进行之中,有望能获得双抗的优良甘蓝自交系材料,从而加速甘蓝的抗病毒育种进程。
【学位授予单位】:首都师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S634.5;S635

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴姗,梁月荣,陆建良,黎昊雁;基因枪及其与农杆菌相结合的茶树外源基因转化条件优化[J];茶叶科学;2005年04期
2 官春云;油菜转基因育种研究进展[J];中国工程科学;2002年08期
3 秦新民,高成伟,李春瑶,邓智年;小白菜苏云金芽孢杆菌CryIB基因的遗传转化[J];广西师范大学学报(自然科学版);1999年03期
4 吕玲玲,雷建军,宋明,曹必好,陈国菊,曾国平;豇豆胰蛋白酶抑制剂基因转化花椰菜的研究[J];华南农业大学学报;2004年03期
5 熊兴华,官春云,李栒,江巨鳌,邬克彬,王学军,周小云;基因枪法向甘蓝型油菜转移反义FAD2基因的研究[J];湖南农业大学学报(自然科学版);2003年03期
6 毛慧珠,唐惕,曹湘玲,白永延,郭培福,符文俊;抗虫转基因甘蓝及其后代的研究[J];中国科学C辑:生命科学;1996年04期
7 陈军,王兰岚,刘澄清,方荣祥,宋桂英,徐正平,刘桂珍,张丽华,陈正华;用激光微束穿刺法转化甘蓝型油菜小孢子的研究[J];激光生物学报;1998年02期
8 周音,张智奇,王少鸥,钟维瑾;十字花科植物基因技术研究进展及存在问题[J];吉林农业大学学报;1996年01期
9 薛红卫,卫志明,许智宏;转化脂介导甘蓝转化获得转基因植株[J];科学通报;1996年04期
10 张七仙,敖光明;根癌农杆菌介导的甘蓝高效稳定的遗传转化系统的建立及对CpTI基因转化的研究[J];农业生物技术学报;2001年01期
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 朱俊华;马铃薯Y病毒衣壳蛋白基因片段长度和结构对RNA介导抗病性的影响[D];山东农业大学;2003年
2 庄木;我国几种蔬菜部分CMV分离物2b基因的分离及其功能分析[D];中国农业科学院;2003年
3 刘乐承;白菜花粉发育相关基因BcMF3和BcMF4的转基因功能验证[D];浙江大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 杜春芳;花粉介导法在油菜转基因育种中的应用研究[D];山西农业大学;2004年
【共引文献】
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1 柳建军,于洪欣;结球甘蓝的离体再生及基因转化研究初报[J];山东农业科学;2002年01期
2 刘栓桃,赵智中,何启伟;大白菜转基因育种及分子标记研究进展[J];山东农业科学;2004年03期
3 夏广清,何启伟;大白菜雄性不育及其机理的研究进展[J];山东农业科学;2004年06期
4 侯丽霞;何启伟;卜丽霞;王崇启;董玉梅;焦自高;;花粉管通道法转化甜瓜自交系的技术研究初报[J];山东农业科学;2007年03期
5 张晓东;李利斌;宋宜现;李化银;刘立峰;高玲;高建伟;;大白菜高效稳定遗传转化体系的建立[J];山东农业科学;2010年02期
6 董飞;陈运起;刘世琦;高莉敏;;蔬菜游离小孢子培养的研究进展[J];山东农业科学;2011年03期
7 许会会;赵美爱;钤泰琳;刘维信;;农杆菌介导的薹菜遗传转化体系研究[J];山东农业科学;2011年05期
8 苏学军;徐茂俊;金刚;赵传双;张涛;孔德禄;张吉祥;;大白菜质核互作型雄性不育的转育与应用[J];山东农业科学;2011年06期
9 李光远;王宜娜;王凤华;;不同激素对结球甘蓝下胚轴离体培养的影响[J];安徽农学通报;2007年15期
10 何开平,吴楚;园艺植物衰老及保鲜的研究进展[J];安徽农业科学;2002年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 白云凤;冯瑞云;张维锋;;RNA干扰在植物抗病毒转基因研究中的应用[A];2010植物免疫机制研究及其调控研讨会论文集[C];2010年
2 李兰玉;陈苇;杨清辉;罗延青;董云松;李根泽;王敬乔;;甘蓝型油菜Fad 2基因RNAi载体无选择标记转化研究[A];中国作物学会2007年学术年会论文集[C];2007年
3 胡开林;;十字花科蔬菜花药、花粉培养的研究进展[A];中国科学技术协会第二届青年学术年会园艺学论文集[C];1995年
4 杨广东;李艳娥;上官晓霞;;大白菜遗传转化系统优化的研究[A];中国园艺学会第四届青年学术讨论会论文集[C];2000年
5 高国训;顾自豪;靳力争;陆子梅;;蔬菜抗虫种质资源的收集与鉴定[A];全国蔬菜遗传育种学术讨论会论文集[C];2002年
6 蒋武生;原玉香;张晓伟;耿建峰;韩永平;高睦枪;栗根义;;提高大白菜游离小孢子胚诱导率的研究[A];全国蔬菜遗传育种学术讨论会论文集[C];2002年
7 雷建军;;抗虫基因工程及其在蔬菜育种上的应用[A];全国蔬菜遗传育种学术讨论会论文集[C];2002年
8 雷建军;陈国菊;曹必好;曾国平;;蔬菜基因工程研究进展[A];蔬菜分子育种研讨会论文集[C];2004年
9 张凤兰;;白菜根癌农杆菌介导法基因转化体系的建立[A];蔬菜分子育种研讨会论文集[C];2004年
10 陈利萍;徐春霞;李春顺;;通过不同再生方法建立榨菜再生体系及RAPD分析[A];蔬菜分子育种研讨会论文集[C];2004年
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1 徐丽;马铃薯Y病毒复制酶基因介导的病毒抗性研究[D];山东农业大学;2010年
2 韩莹琰;白菜花粉发育相关的C2H2型锌指蛋白新基因BcMF20的克隆与功能验证[D];浙江大学;2011年
3 刘宏波;甘蓝型油菜抗病虫基因遗传转化及转基因植株抗性鉴定的研究[D];浙江大学;2010年
4 王丽丽;大白菜核基因雄性不育系定向转育及分子标记辅助育种研究[D];沈阳农业大学;2010年
5 马进;水稻条纹病毒(RSV)RNA3、RNA4的克隆与抗RSV转基因水稻的培育[D];山东农业大学;2011年
6 姜芳;马铃薯Y病毒CP基因不同区段对发夹RNA和人工的miRNA介导的病毒抗性的影响[D];山东农业大学;2011年
7 郝金凤;无载体无选择标记转基因耐贮藏甜瓜的培育[D];内蒙古大学;2010年
8 石凤敏;蒙古冰草MwLEA3基因功能研究及MwRRT基因的克隆[D];内蒙古农业大学;2011年
9 张玉;农杆菌介导菊苣遗传转化体系的建立及富硫氨基酸基因的导入和表达定位[D];四川农业大学;2010年
10 付绍红;RNA干扰技术提高甘蓝型油菜含油率研究[D];四川农业大学;2010年
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1 刘冉冉;枫香遗传转化体系的优化及转化PaFT基因的研究[D];华中农业大学;2010年
2 付雪林;转Bt基因甘蓝的抗虫性研究[D];华中农业大学;2010年
3 田芳;甘蓝型油菜A8连锁群含油量QTLs及其遗传累赘分析[D];华中农业大学;2009年
4 卢小三;两个杨树无性系再生体系的建立及抗虫基因Cry1C+9C转化的初步研究[D];华中农业大学;2010年
5 雷樊登;茶树离体增殖与再生体系的建立[D];安徽农业大学;2010年
6 徐娟;农杆菌介导的Ac/Ds转座系统转化甘蓝型油菜的研究[D];郑州大学;2010年
7 介智靖;甘蓝型油菜小孢子培养及倍性鉴定[D];郑州大学;2010年
8 刘无双;拟南芥种子特异表达基因启动子分析[D];山东农业大学;2010年
9 徐谦;拟南芥原生质体诱导愈伤组织的研究[D];山东农业大学;2010年
10 张景涛;小麦TaPHR1基因表达载体的构建及遗传转化研究[D];山东农业大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈京,胡伟贞,于嘉林,韩成贵;应用反转录聚合酶链式反应快速检测蕃茄环斑病毒[J];病毒学报;1996年02期
2 鲁瑞芳,吕鹏飞,彭学贤;马铃薯Y病毒NIb复制酶基因在转录水平介导的相对广谱抗病性[J];病毒学报;2000年02期
3 郭兴启,温孚江,宋云枝,孟祥兵,吕士恩,郑成超,朱常香;翻译和非翻译马铃薯Y病毒外壳蛋白基因介导的抗病性比较[J];病毒学报;2001年04期
4 项瑜,杨兰英,周雪荣,崔晓江,彭学贤;表达马铃薯Y病毒外壳蛋白的转基因烟草的抗病性研究[J];病毒学报;1995年02期
5 张鹤龄,李天然,哈斯阿古拉,额尔敦,张彤,孙燕,庞瑞杰;抗卷叶病毒(PLRV)转基因马铃薯栽培种及其抗病性研究[J];病毒学报;1995年04期
6 吴姗,梁月荣,陆建良,金惠淑,吴颖;茶树农杆菌转化系统和基因枪转化系统的优化[J];茶叶科学;2003年01期
7 李树贤,陈远英;结球甘兰下胚轴组织培养形态发生的组织学研究[J];西北植物学报;1993年04期
8 高书颖,郭蔼光,金伟波,范三红;利用转基因植物生产药用蛋白研究进展[J];西北植物学报;2003年06期
9 李树贤,陈远英;结球甘蓝离体下胚轴愈伤组织的维管组织及管状分子[J];西北植物学报;1994年01期
10 巩振辉,何玉科;拟南芥基因转移新方法一真空渗入法的研究[J];西北植物学报;1996年03期
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1 赵东;茶树多酚氧化酶基因的克隆和转化系统研究[D];浙江大学;2001年
2 王永勤;白菜核不育两用系育性基因表达特征分析及其小孢子发育相关基因的分离[D];浙江大学;2003年
3 朱俊华;马铃薯Y病毒衣壳蛋白基因片段长度和结构对RNA介导抗病性的影响[D];山东农业大学;2003年
4 张弢;十字花科植物BcMF2和BcMF4同源基因的克隆、表达及其进化关系研究[D];浙江大学;2005年
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1 王拱辰;;浙江油菜花叶病毒类型研究[J];微生物学报;1978年04期
2 藤沢一郎;张特全;;蚜虫传播芜菁花叶病毒和黄瓜花叶病毒 2.以病毒混合物传播[J];植物医生;1986年04期
3 施曼玲;浙江榨菜病毒病病原鉴定[J];微生物学通报;2003年06期
4 蔡岳松,童南奎,曲竹蓉 ,陈世儒 ,李成琼 ,宋明;甘蓝品种(系)对芜菁花叶病毒和甘蓝黑腐病的抗性鉴定[J];西南农业大学学报;1990年01期
5 罗静;陈伟;庄木;李艳红;王晓武;刘玉梅;杨丽梅;张扬勇;方智远;;芜菁花叶病毒CP基因反向重复植物表达载体的构建及遗传转化[J];中国蔬菜;2007年02期
6 黄丽华;湖南省油菜病毒病毒源类型初步鉴定[J];湖南农业大学学报(自然科学版);1984年04期
7 戴忠良;侯喜林;潘跃平;;结球甘蓝杂交新组合强力65的杂种优势分析[J];江苏农业学报;2007年01期
8 李经略,李惠兰,干正荣,张恩慧,鲁玉妙;甘蓝对TuMV和黑腐病苗期兼抗性平行鉴定研究[J];陕西农业科学;1994年01期
9 张七仙,敖光明;根癌农杆菌介导的甘蓝高效稳定的遗传转化系统的建立及对CpTI基因转化的研究[J];农业生物技术学报;2001年01期
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1 钱雪艳;郭东全;杨向东;赵桂兰;;大豆体细胞胚性愈伤悬浮培养体系的建立及超声介导遗传转化的研究[A];全国植物分子育种研讨会摘要集[C];2009年
2 黄大昉;张杰;张中鸽;;棉花枯萎病菌的原生质体制备与遗传转化(英文)[A];“植物病虫害生物学研究进展”——植物病虫害生物学国家重点实验室研究论文选[C];1995年
3 关宁;李聪;;γ-zein基因改良紫花苜蓿品质的研究初报[A];中国草学会牧草育种专业委员会2007年学术研讨会论文集[C];2007年
4 赵寿经;杨振堂;李昌禹;藏埔;赵家平;;发根农杆菌介导的人参遗传转化及人参皂甙工厂化生产[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
5 闫硕;宋玉;王广东;;农杆菌介导的观赏向日葵高效遗传转化体系的建立[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年
6 姚元红;韦建福;郝小丽;;根癌农杆菌介导的丝状真菌遗传转化[A];中国植病、菌物学会杭州联合年会论文集[C];2008年
7 姚姿婷;周燕;蓝秀万;李敏慧;姜子德;陈保善;;农杆菌介导的板栗疫病菌诱变研究[A];中国植物病理学会2007年学术年会论文集[C];2007年
8 伍旭东;邢虎成;揭雨成;徐庆国;佘玮;钟英丽;廖玮玮;;苎麻高效再生体系的建立及抗虫Bt基因的遗传转化[A];2009年中国作物学会学术年会论文摘要集[C];2009年
9 尹淑萍;金万梅;袁维风;崔铁军;;草莓品种“丰香”和“哈尼”高频再生体系的建立及遗传转化的研究[A];中国园艺学会第六届青年学术讨论会论文集[C];2004年
10 王昌涛;赵琦;杨爱国;赵玉锦;张世煌;;农杆菌介导玉米萌动胚遗传转化新体系的建立[A];2004全国玉米种质扩增、改良、创新与分子育种学术会议论文集[C];2004年
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1 定州市农牧局 王虎;甘蓝价格大起大落的启示[N];河北科技报;2010年
2 本报记者 王娜 邢银田;甘蓝丰收了 农民的笑容在哪里?[N];中国特产报;2006年
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4 高碑店市农林局 黄自鹏;甘蓝为何选期抽薹[N];河北科技报;2003年
5 邢银田;甘蓝滞销 告诉了我们什么?[N];河北日报;2006年
6 李开兰;冬春一号甘蓝露地咋栽培[N];河南科技报;2008年
7 启东市作栽站 项觉生;桑园冬季间作甘蓝[N];江苏农业科技报;2007年
8 定州市农业信息中心 王虎;明年种甘蓝 也许能赚钱[N];河北科技报;2010年
9 永年县农业局植保站 杜自海 焦军 朱建鹏;甘蓝病害重 注意早防控[N];河北科技报;2010年
10 周翠英;耐热甘蓝全年高产技术[N];农民日报;2002年
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1 张明洲;农杆菌介导高梁转化体系的建立与Bt(Bacillus thuringiensis)抗虫基因的导入[D];浙江大学;2002年
2 王萍;大豆组织培养体系优化与双价抗虫基因遗传转化的研究[D];东北农业大学;2002年
3 李杰;渗透胁迫信号传导关键基因的克隆及DREB1A基因对水稻的遗传转化[D];东北农业大学;2003年
4 武丽敏;小麦遗传转化参数优化及其应用研究[D];四川农业大学;2005年
5 Abdul Razzaq;[D];河北农业大学;2005年
6 杨怀义;草莓果实膜联蛋白基因的cDNA克隆及其遗传转化的研究[D];沈阳农业大学;1999年
7 梁机;转rolB基因改良毛白杨生根能力的研究[D];北京林业大学;2004年
8 温瑞;植物抗病毒基因工程研究 Ⅰ黄瓜花叶病毒复制酶基因表达载体构建和遗传转化 Ⅱ导入病毒基因的转基因植物释放的风险评估[D];浙江大学;2001年
9 张成玲;烟草脉带花叶病毒、芜菁花叶病毒和马铃薯Y病毒的遗传结构分析[D];山东农业大学;2010年
10 孟岩;抗真菌病基因对葡萄植物遗传转化的研究[D];东北农业大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 罗静;TuMV及其与CMV的嵌合片段对菜心和甘蓝的遗传转化[D];首都师范大学;2007年
2 周利飞;不同寄主对烟蚜种群的影响及TuMV、TMV和CMV CP基因克隆及序列分析[D];西南大学;2007年
3 包爱科;AVP1基因转化紫花苜蓿的初步研究[D];兰州大学;2006年
4 蒿燕;利用人工microRNA技术构建CHSJ基因沉默载体及适于矮牵牛转化株系的筛选[D];西南大学;2010年
5 王海朋;桑树转景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶基因(MSBPase)的研究[D];山东农业大学;2011年
6 王海波;草莓离体再生及抗病基因遗传转化的研究[D];山东农业大学;2002年
7 贾海燕;农杆菌介导小麦遗传转化体系的建立及转基因研究[D];山东农业大学;2003年
8 陈丽梅;黄瓜的高效再生和根癌农杆菌介导的遗传转化[D];西北师范大学;2004年
9 苏俊峰;Bt抗虫基因导入马铃薯的遗传转化研究[D];东北农业大学;2004年
10 苑志辉;兔防御素基因NP-1在亚麻抗枯萎病方面的研究[D];中国农业大学;2005年
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