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姜黄中姜黄素类组效关系研究

靳晓丽  
【摘要】:姜黄是姜科植物姜黄Curcuma longa L.的干燥根茎,被广泛用于食品调料、着色剂以及中药,药理研究表明具有抗肿瘤、消炎、抗氧化、抗艾滋病、抗老年痴呆、降血脂等作用。主要药效成分为姜黄素类化合物,本文以姜黄中姜黄素类化合物为研究对象,建立定性定量分析姜黄中姜黄素类提取物的HPLC-ESI-MS/MS方法;MTT法检测姜黄素类提取物的抗肿瘤活性;正交偏最小二乘法(OPLS)和典型相关性分析(CCA)辨识分析具有显著抗肿瘤活性的成分;建立多个组效关系数学模型并进行模型评价,筛选出最佳组效关系模型。主要研究工作如下: 1.为了更加全面的研究姜黄中姜黄素类化合物,利用高效液相色谱-电喷雾多级串联质谱(HPLC-ESI-MSn)技术,以Venusil XBP C18(2.1×150mm,5um,Agela Technologies)作为分离色谱柱,乙腈和水为流动相,电喷雾离子源(ESI),正负离子同时扫描。根据谱峰的保留时间和质谱一、二级离子碎片信息,结合对照品及参考文献信息,同时检测出姜黄中28种姜黄素类化合物,其中有8种尚未见相关文献报道,并解析了这8种化合物的二级质谱断裂规律。 2.运用内标法,对31批次姜黄中姜黄素类提取物进行了定量研究,每批次均标记了26个符合定量标准的色谱峰,结果显示不同批次同等生药量的组成成分差异很大;MTT法评价31批次姜黄素类提取物的抗肿瘤活性,结果显示不同批次同等生药量的提取物对宫颈癌HeLa细胞的抑制作用差异很大,最高抑制率可达85.5%,最低的只有6.7%。 3.应用OPLS方法辨识具有显著抗肿瘤活性的姜黄素类化合物,从已定量的26种化合物中筛选了13种,与CCA辨识分析的结果完全一致,结果显示具有多个双键结构及多个羟基的姜黄素类化合物具有较强的抗肿瘤活性;同时,分别应用两种支持向量机函数(ε-SVR,ν-SVR)、3种核函数(径向基核函数(rbf),线性函数(linear function),多项式核函数(polynomial function))、3种优化方法粒子群算法(pso),遗传算法(ga),网格算法(grid search)),建立了18种姜黄素类化合物的组效关系模型,根据有关参数筛选出最优模型为ε-SVR-rbf-pso,并对其做了相关评价。


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