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《天津大学》 2005年
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树枝状聚赖氨酸及其衍生物载体合成及性能研究

郝挥红  
【摘要】:质粒DNA能够安全、有效的将基因运送至目标细胞核中,而这个基因转移至人体的过程需要载体。基于这种需求,人们开发研究了多种不同类型的载体。阳离子聚合物既能缩合DNA又能中和DNA表面的负电荷,越来越成为人们关注的重点。本研究展开了以下研究工作: 首先,本文研究了双芴甲氧羰基赖氨酸(Di-Fmoc-Lysine)的制备方法,考察了温度,pH值和提取方式等因素对收率以及纯度的影响,并通过HPLC以及ESI-MS对其进行结构分析。研究结果表明,赖氨酸的两个氨基在不同的pH值下,可以先后与Fmoc-Osu反应,生成双Fmoc基团保护的赖氨酸。 以Di-Fmoc-Lysine和Fmoc-Gly-Wang树脂为底物,应用DIC/HOBt固相多肽合成法合成了树枝状聚赖氨酸,并用芴甲氧羰基苯丙氨酸(Fmoc-Phe)和乙酸(HAc)对合成的多聚物进行了表面功能化修饰。通过核磁共振、质谱对产品进行了结构的表征。研究结果表明,运用该法获得了分子量单一的目标产物,是一种潜在的理想的非病毒载体。 为了满足合成聚合物对质粒的大规模需求,对pGL3质粒的酶切分析、转化、鉴定、提取产物和电泳分析进行了一系列相关研究,为质粒的大规模扩增打下基础。 最后,利用琼脂糖凝胶电泳、荧光分光光度计以及多角度激光散射手段,对合成的多聚物与质粒DNA的缩合作用进行了检测研究。结果显示,在N/P比值为2:1条件下,Phe-PLD-G3能与质粒DNA形成较小的粒径。 本文对聚赖氨酸/DNA复合物载体仅进行了初步研究,希望有助于此领域的深入发展。
【学位授予单位】:天津大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:Q782;Q51

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