低温敏感型面包酵母的选育及其应用的研究

【摘要】： 本文对低温敏感型面包酵母的选育、应用及遗传学分析进行 了研究。 以酿酒酵母单倍体A13-18为出发菌株，通过紫外线诱变， 选育出了低温敏感型突变株Css-14。确定了酿酒酵母（S.cerevisiae） 低温敏感型菌株（Cold-sensitive strain）的初筛方法。实验证明， 以YPG培养基为下层、以染料软琼脂培养基为上层的双层平板， 是有效的低温敏感型菌株的初筛平板；将酿酒酵母在含抗霉素A 的YPD培养基中10℃培养36h后，用制霉菌素处理菌体，能够 达到杀死亲株、浓缩突变株的目的。 以发酵性能优良的商业面包酵母Y-3和低温敏感型酿酒酵母 单倍体Css-14为亲株，采用电诱导原生质体融合技术，选育出了 C型（cold-sensitive）融合子F6—2。该融合子在30℃发酵性能优 于亲株面包酵母Y-3，在4℃贮藏6d不发酵，经连续传代15代 后，遗传性状稳定。 通过耐酒精实验，选育出了F型（frozen-tolerant）面包酵母 X-003，并对其耐冷冻性能进行了研究。结果表明，X-003经3w冷 冻保藏后，存活率仍保持在80％以上。 应用实验表明，采用冷冻面团工艺制作面包，低温敏感型面 包酵母F6-2和X-003质量优于五种普通商业面包酵母。 将低温敏感型酿酒酵母单倍体Css-14（a接合型）与普通酿酒酵 母单倍体YNN-27（α接合型）进行群体杂交，对杂交子代进行 遗传学分析。结果表明杂交子代基因重组率为50％，低温敏感型 与接合型基因不连锁。