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《天津农学院》 2014年
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苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮提取物降糖降脂功效及联合作用研究

靳晓明  
【摘要】:高脂血症和2型糖尿病已经成为当今世界严重威胁人类健康的两大公共卫生问题。苦瓜皂苷、南瓜多糖、苦荞黄酮这三种天然植物中提取的活性成分,均能不同程度的发挥降血脂降血糖功效,因其高效价廉,毒副作用小,常被用于这两大疾病的防治。本研究从两种不同途径入手来提高三种植物活性成分的利用率和降糖降脂功效,首先,采用锐孔凝固浴法,以苦瓜皂苷提取物为对象,海藻酸钠和壳聚糖为壁材,对其进行包埋,研究制备工艺,同时对微胶囊的缓释性能和酶抑制活性进行研究;其次,将苦瓜皂苷和南瓜多糖或苦荞黄酮联合使用,多层面、多靶点出发,从不同的信号通道,采用细胞试验和动物试验来探究三种天然活性物质是否具有协同增加降脂降糖功效的作用,为开发具有辅助降脂降糖功效的功能食品提供参考。主要研究结果如下:(1)采用AB-8大孔吸附树脂对苦瓜皂苷粗提物进行纯化,苦瓜皂苷含量可达到58.5%;采用水提醇沉的方法处理南瓜粗提物,南瓜多糖含量达到48.29%;紫外分光光度法测得苦荞黄酮提取物中黄酮的含量为72.3%。同时,采用薄层层析法初步推断,纯化后的苦瓜皂苷样品中含有人参皂苷Rgl以及一个和人参皂苷Rbl极性非常相近的组分,除此之外还有可能存在其它3种皂苷类物质;纯化后的南瓜多糖中可能含有鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和甘露糖;苦荞黄酮可以初步确定其主要成分为芦丁和槲皮素。(2)以壳聚糖和海藻酸钠为壁材,采用锐孔凝固浴法制备苦瓜皂苷提取物微胶囊,该制备方法简单,条件温和,成囊速度快,通过单因素和正交试验得出最佳的制备工艺条件为:海藻酸钠浓度5%、壳聚糖浓度0.5%、氯化钙浓度3.5%、海藻酸钠与苦瓜提取物比是0.6:1;此条件下制得的苦瓜提取物微胶囊,在模拟胃液中2h,苦瓜提取物皂苷累积释放率为52.14%,再在肠液中释放10h,累积释放率达81.2%,表明微胶囊缓释性能良好。而且微胶囊在胃肠中缓慢释放,均显示对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶有一定的抑制作用,抑制率随着释放量的增加有上升趋势,相比较未包埋的苦瓜提取物和拜糖平,微胶囊化起到了保护活性成分,延长作用时间,提高药物利用率,缓解副作用等效果。(3)试验建立胰岛素抵抗细胞(HepG2/IR)模型的最佳条件为:30μg/mL胰岛素诱导处理HepG2细胞36h;苦瓜皂苷、南瓜多糖、苦荞黄酮提取物单独及联合改善HepG2细胞胰岛素抵抗结果显示,在一定浓度范围内,400μg/mL的苦瓜皂苷,700μg/mL的南瓜多糖和400μg/mL的苦荞黄酮可以显著提高HepG2/IR细胞的活性,同时改善葡萄糖消耗量,起到较好的降糖效果,且苦瓜皂苷联合南瓜多糖或苦荞黄酮后,在缓解胰岛抵抗和改善细胞活性效果上要优于单一组分。(4)饲喂高脂饲料6周能够成功建立小鼠高脂模型,试验结果显示采用400mg/kg和800mg/kg苦瓜皂苷提取物灌胃能明显改善高脂小鼠的葡萄糖耐量,正常化脂质指标,加强机体抗氧化能力,200 mg/kg效果次之。(5)试验不仅验证了苦瓜皂苷、南瓜多糖、苦荞黄酮的降血脂功效,还证明了苦瓜皂苷联合南瓜多糖或苦荞黄酮后,具有更好的降脂减肥效果,疗效较三种提取物单一物质效果更好,能明显改善高脂大鼠的血清脂质指标,提高葡萄糖耐量和胰岛素敏感性,同时起到了保肝护肾和调节脂肪细胞因子(肿瘤坏死因子-α、脂联素、瘦素)的作用。(6)苦瓜皂苷、南瓜多糖、苦荞黄酮单独及联合使用可以有效的改善糖尿病大鼠“三多一少”的症状,能够降低高血糖大鼠的血糖,提高糖耐量和胰岛素敏感性,增强机体的脂代谢能力,同时,还起到了保肝护肾,调节脂肪细胞因子(TNF-α、脂联素)的作用。试验结果也证实了苦瓜皂苷和南瓜多糖或苦荞黄酮联合使用比其单独使用时的调脂降糖能力增强,对肝肾的保护作用也增强,效果更显著,由此推断三种提取物多靶点,多通路,互相促进,协同增效,共同发挥治疗糖尿病的作用。
【学位授予单位】:天津农学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R151

【参考文献】
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