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《天津医科大学》 2012年
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miRNA-132在移植排斥过程中作用的体外研究

朱凤池  
【摘要】:目的:体外研究移植排斥过程中rniRNA-132表达的变化,以及相应基因VEGF-A的表达,从而为有效调控移植排斥反应提供参考。 方法:①培养小鼠血管瘤内皮细胞系(EOMA),加入异系Balb/c小鼠脾分离的T淋巴细胞,构建移植排斥反应体外模拟实验。实验分组包括EOMA组、EOMA+IL-2组、EOMA+IL-2+T淋巴细胞组。②分别在0、6、12、24小时收获EOMA细胞,采用TaqMan miRNA Assays技术对各组1niRNA-132的表达变化进行相对定量研究。③并进一步通过实时荧光定量PCR技术检测VEGF-A mRNA的表达变化,通过免疫细胞化学法检测VEGF-A蛋白的表达及MTT比色法检测EOMA细胞的增殖。 结果:①EOMA+IL-2+T淋巴细胞组miRNA-132表达水平在12小时和24小时较EOMA组、EOMA+IL-2组有显著性差异(P0.05),组间两两比较EOMA+IL-2+T淋巴细胞组明显高于EOMA组、EOMA+IL-2组,差异有统计学意义(P0.05),而在0小时和6小时三组间miRNA-132表达水平无统计学差异(P0.05)。②EOMA+IL-2+T淋巴细胞组VEGF-A mRNA表达水平在12小时和24小时较EOMA组、EOMA+IL-2组有显著性差异(P0.05),组间两两比较EOMA+IL-2+T淋巴细胞组明显高于EOMA组、EOMA+IL-2组,差异有统计学意义(P0.05),而在0小时和6小时三组间VEGF-A mRNA表达水平无统计学差异(P0.05)。③EOMA+IL-2+T淋巴细胞组VEGF-A蛋白表达在12小时和24小时较EOMA组、EOMA+IL-2组明显升高,差异有统计学意义(P0.05),而在0小时和6小时三组间VEGF-AmRNA表达无统计学差异(P0.05)。④EOMA+IL-2+T淋巴细胞组EOMA细胞增长速度在12、24小时较其他两组明显加快,差异有统计学意义(P0.05),在0、6小时增长速度与EOMA组、EOMA+IL-2相近无统计学差异(P0.05)。 结论:移植排斥反应的早期miRNA-132表达上调,引起VEGF-A表达增高,诱导EOMA细胞增殖,有助于损伤血管内皮细胞的修复。高水平的miRNA-132可能更多的参与了血管内皮细胞的修复过程,从而在控制移植排斥反应的过程中发挥重要作用。
【学位授予单位】:天津医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R617

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【参考文献】
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