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间充质干细胞对小鼠早期矽肺纤维化的抑制作用

潘雍  
【摘要】:目的:本研究以小鼠矽肺动物模型为研究对象,通过测定相关生物活性因子初步探讨BMSCs对Si02粉尘致小鼠肺纤维化的防治作用。 方法:根据随机化原则将小鼠分为3个组,即对照组、模型组、移植组,每组30只。对照组小鼠气管内注入生理盐水,模型组小鼠气管内注入Si02混悬液20ul(5mg/20ul),移植组小鼠气管内注入矽尘混悬液Si02混悬液20ul(5mg/20ul)后于6小时尾静脉移植BMSCs,细胞数量为1×10+个。气管暴露法建立小鼠矽肺模型,模型建立后,于第2、7和14天(造模当天为第0天)3个时间点分别取10只小鼠将其处死,取材。HE染色观察小鼠肺组织形态学的变化;碱裂解法检测小鼠肺组织羟脯氨酸含量;RT-PCR法检测对照组、模型组和移植组各时间点肺组织中TGF-β1、IL-1β、MMP-2、TNF-α4种生物活性因子mRNA基因表达水平;免疫组织化学方法检测小鼠肺组织中TGF-β1、IFN-y蛋白表达水平。 结果:1、HE染色法证实气管注入Si02粉尘悬液成功建立矽肺模型。2、与对照组比较,模型组小鼠各时间点肺脏器系数高于对照组(P0.05);与模型组比较,移植组小鼠各时间点肺脏器系数低于模型组,第7、14天差异具有显著性(P0.05),但高于对照组,第二天时差异有显著性(P0.05)。随时间推移各组小鼠肺脏器系数呈下降趋势。3、与对照组比较,模型组小鼠各时间点肺组织羟脯氨酸含量高于对照组,但仅在第14天(P0.05)时差异具有统计学意义;与模型组比较,移植组小鼠肺脏器系数低于模型组,第14天差异具有显著性(P0.05)。4、与对照组比较,模型组在第2、7、14天时肺组织TGF-β1mRNA表达高于对照组差异具有显著性(P0.05);与模型组比较,移植组各时间点肺组织中TGF-β1mRNA表达低于模型组,在各时间点差异有显著性(P0.05),稍高于对照组,没有统计学意义。5、与对照组比较,模型组在第2、7、14天时肺组织IL-1βmRNA表达高于对照组,有统计学意义(P0.05);与模型组比较,移植组各时间点肺组织中IL-1β mRNA表达低于模型组,在第2、14天差异有显著性(P0.05),但高于对照组,第14天差异有统计学意义。6、与对照组比较,模型组小鼠各时间点肺组织MMP-2mRNA表达均高于对照组,但仅在第14天时差异具有统计学意义(P0.01);与模型组比较,移植组小鼠肺组织MMP-2mRNA表达低于模型组,第14天差异具有显著性(P0.05),移植组高于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。7、与对照组比较,模型组小鼠各时间点肺组织TNF-α mRNA表达均高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);与模型组比较,移植组小鼠肺组织TNF-α mRNA表达低于模型组,第14天差异具有显著性(P0.05)。8、与对照组比较,模型组在第2、7、14天时肺组织TGF-β1蛋白表达高于对照组差异具有显著性(P0.01);与模型组比较,移植组各时间点肺组织中TGF-β1mRNA表达低于模型组,差异有显著性(P0.01),高于对照组,有统计学意义(P0.01)。9、与对照组比较,模型组在第2、7、14天时肺组织IFN-γ蛋白表达高于对照组,差异具有显著性(P0.01);与模型组比较,移植组各时间点肺组织中IFN-γ蛋白表达低于模型组,在各时间点差异有显著性(P0.01),高于对照组,有统计学意义(P0.01)。 结论:1、小鼠支气管内注入二氧化硅颗粒可引起小鼠肺组织炎性和纤维化性病理变化,并有矽性纤维结节形成。2、尾静脉移植BMSCs可以缓解矽尘诱导的小鼠肺脏器系数的增加。3、尾静脉移植BMSCs可以降低小鼠肺组织羟脯氨酸含量。4、尾静脉移植BMSCs能够抑制’TGF-β1、IL-1β、MMP-2、TNF-α mRNA表达和TGF-β1、IFN-γ蛋白表达水平。


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