收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

委陵菜黄酮衍生物抗糖尿病活性及其作用机制研究

周雯  
【摘要】:目的: 建立人HepG2肝细胞及由小鼠3T3-L1前脂肪细胞株诱导而成的成熟脂肪细胞的胰岛素抵抗模型,筛选委陵菜黄酮衍生物抗糖尿病活性,并对其作用机制进行进一步探讨。 方法: 1、胰岛素抵抗模型的建立: HepG2人肝细胞和3T3-L1脂肪细胞的胰岛素抵抗模型是研究胰岛素抵抗中最为常用的两类细胞模型,采用文献方法对胰岛素抵抗模型进行复制,以葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法(GOD-POD法)检测细胞中葡萄糖的消耗量确立两种细胞胰岛素抵抗模型的建立。 2、抗糖尿病活性筛选: 委陵菜黄酮为中药委陵菜抗糖尿病活性的主要成分,为进一步提高其生物活性,发现先导化合物,课题组前期设计合成了一系列委陵菜黄酮衍生物,本文分别以胰岛素抵抗的HepG2细胞和3T3-L1脂肪细胞为筛选模型,通过葡萄糖氧化酶法检测各衍生物对模型细胞葡萄糖消耗量的影响,评价各衍生物的抗糖尿病活性。 3、抗糖尿病作用机制研究: 以筛选出的抗糖尿病活性最强委陵菜黄酮衍生物5f分别与HepG2细胞和3T3-L1成熟脂肪细胞共孵育,Western blot方法检测Comp.5f对5’-AMP激活蛋白激酶(AMPK),乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase, ACC),以及蛋白激酶B (protein kinase B, Akt)磷酸化水平的影响。检测Comp.5f对HepG2细胞中葡萄糖转运子2(GLUT2)及3T3-L1成熟脂肪细胞中葡萄糖转运子4(GLUT4)的影响。 结果: 1、本实验采用高浓度胰岛素(5×10-7mol/l)诱导HepG2细胞产生胰岛素抵抗,以1μmol/l的地塞米松作用4天诱导3T3-L1成熟脂肪细胞产生胰岛素抵抗,应用葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法(GOD-POD法)检测各组细胞上清液中葡萄糖含量,与正常细胞相比,具有显著差异(p0.05),确定胰岛素抵抗细胞模型的成功建立。 2、抗糖尿病活性筛选结果显示除化合物7b外,各衍生物均具有提高胰岛素抵抗模型细胞葡萄糖消耗量的作用,化合物5b、5e、5g和10b的活性较强,与市售药物二甲双胍相当,化合物5f、7d、10C抗糖尿病活性最强,优于市售药物二甲双胍。 委陵菜黄酮衍生物5a、5g、5f、5e、7d作用于胰岛素抵抗的HepG2及3T3-L1成熟脂肪细胞模型,以委陵菜黄酮衍生物5f抗糖尿病活性最强,委陵菜黄酮衍生物5f可在一定程度上提高3T3-L1脂肪细胞的2-脱氧-[3H]-葡萄糖摄取量。 3、委陵菜黄酮衍生物5f可上调HepG2肝细胞及3T3-L1成熟脂肪细胞内AMPK, ACC的磷酸化水平(p0.05),而不影响Akt的磷酸化水平。以AMPK的特异性抑制剂Compound C与Comp.5f共同作用于HepG2细胞,结果显示Compound C能够显著降低5f刺激的AMPK、ACC磷酸化水平的上调,在3T3-L1脂肪细胞中,Compound C仅能部分抑制黄酮衍生物5f刺激的AMPK、ACC磷酸化水平的上调作用。Comp.5f对HepG2人肝细胞内的GLUT2水平有一定的下调作用。Comp.5f对3T3-L1脂肪细胞内的GLUT4蛋白表达量没有发生明显影响。 结论: 本文建立了HepG2人肝细胞及3T3-L1脂肪细胞的胰岛素抵抗模型,观察委陵菜黄酮衍生物对胰岛素抵抗的影响,结果表明黄酮类化合物均具有较强的抗糖尿病活性,活性最强的Comp.5f可显著上调HepG2细胞及3T3-L1成熟脂肪细胞内AMPK,ACC的磷酸化水平,以上结果表明,黄酮衍生物5f抗糖尿病作用的机制之一是激活AMPK信号传导通路,而不是作用于胰岛素通路。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 奇安·奥卢瓦奈;;红酒含大量抗糖尿病化合物[J];共产党人;2010年23期
2 怡悦;中国五层龙的抗糖尿病及抗炎作用[J];国外医学.中医中药分册;2002年06期
3 巢濛磊;王卫庆;;新型抗糖尿病药物研究进展[J];上海交通大学学报(医学版);2009年02期
4 李维清;;口服抗糖尿病制剂——D860治疗12例糖尿病的临床观察[J];人民军医;1958年01期
5 王毅群;姚明辉;;三价铬治疗糖尿病的作用及其机制[J];中国临床药学杂志;2007年02期
6 衡先培;陈可冀;;糖尿病强化治疗与血管病变(二)[J];中国中西医结合杂志;2008年07期
7 Mary Milewski;杨琦;;被天使触动[J];糖尿病新世界;2010年07期
8 李可基;;把吃上去的血糖走下来[J];健康管理;2011年02期
9 曹莹;Palauan草药Ongael的抗糖尿病作用[J];国外医学.中医中药分册;2005年06期
10 易罗英;;一生的守护[J];糖尿病新世界;2011年08期
11 李孟全,李瑞秋,周金霞;抗糖尿病药物研究进展[J];牡丹江医学院学报;1997年01期
12 怡悦;甘薯抗糖尿病成分的精制[J];国外医学.中医中药分册;1998年05期
13 刘学铭;;青葙种子乙醇提取物的抗糖尿病活性[J];国外医药.植物药分册;2003年03期
14 M.Litynski ,邵丙揚;口服抗糖尿病新药(BZ55)对糖尿病合併肺结核患者的影響[J];华中科技大学学报(医学版);1958年03期
15 孙奋治;;抗糖尿病口服剂的作用机制[J];药学进展;1960年03期
16 蒋滢,孔庆胜,黄美英,杜仲,杨梦云;花粉抗糖尿病的动物实验研究[J];食品工业科技;1996年06期
17 林书坡;林杰;史今;;替米沙坦对胰岛素抵抗大鼠肾脏脂联素表达的影响[J];中国医科大学学报;2009年10期
18 孙长颢;周晓蓉;赵丹;;共轭亚油酸对胰岛素抵抗大鼠ap2基因表达的影响[J];卫生研究;2006年03期
19 周晓蓉;孙长颢;王海英;姜丽英;刘荣;;共轭亚油酸对肥胖大鼠脂肪酸连续蛋白基因表达的影响[J];营养健康新观察;2005年01期
20 余立华;刘康;刘保林;;染料木素的药理作用[J];药学与临床研究;2010年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王治国;胡志前;;mTOR/PI3K通路介导的术前口服PreOp改善术后胰岛素抵抗的机制研究[A];第七届全国中西医结合围手术期医学专题研讨会全国中西医结合围手术期快速康复新进展培训班广东省中医药学会外科学会会议论文集[C];2012年
2 刘倩;叶菲;陶荣亚;贺伊博;刘峻瑒;田金英;;大黄酸改善小鼠胰岛素抵抗的实验研究[A];中国中西医结合学会微循环2009学术大会会议指南及论文摘要[C];2009年
3 戴小良;左艳;史锋;王行宽;范金茹;李水晴;;滋生青阳片改善胰岛素抵抗及逆转高血压左室肥厚的临床研究[A];中医理论临床应用学术研讨会论文集[C];2007年
4 李伟珍;李伟;吴金雨;刘立宾;王林;赵惠玲;吕建新;;高脂诱导胰岛抵抗大鼠模型肝脏microRNA表达谱分析[A];遗传学与社会可持续发展——2010中国青年遗传学家论坛论文摘要汇编[C];2010年
5 刘倩琦;申飞飞;谢雯;石星;倪世宁;顾威;朱子阳;;IGF-1干预对宫内发育迟缓后胰岛素抵抗的保护作用[A];中华医学会第十五次全国儿科学术大会论文汇编(上册)[C];2010年
6 张传科;;中医药对老年糖尿病胰岛素抵抗的认识[A];中国重汽科协获奖学术论文选编(2002-2003)[C];2004年
7 韩玉麒;王吉影;袁学宇;程晓芸;盛春君;吴超群;;伴胰岛素抵抗的肥胖者脂肪组织的蛋白质组学研究[A];中国蛋白质组学第三届学术大会论文摘要[C];2005年
8 吕圭源;刘赛月;;中药抗胰岛素抵抗研究进展[A];浙江省2005年中药学术年会论文集[C];2005年
9 朱大龙;胡云;沈山梅;徐小华;童国玉;;急性时相血清淀粉样蛋白A与2型糖尿病患者胰岛素抵抗的关系[A];2006年中华医学会糖尿病分会第十次全国糖尿病学术会议论文集[C];2006年
10 张璐;黎明;陶梅梅;李太生;;HAART治疗的HIV/AIDS患者脂肪营养不良、脂肪因子变化与糖脂代谢异常及胰岛素抵抗的相关研究[A];2008内分泌代谢性疾病系列研讨会暨中青年英文论坛论文汇编[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 周雯;委陵菜黄酮衍生物抗糖尿病活性及其作用机制研究[D];天津医科大学;2013年
2 刘易慧;湖北麦冬多糖对细胞和KKAy小鼠模型的抗糖尿病作用及机理研究[D];华中科技大学;2013年
3 李宏亮;代谢综合征内皮细胞胰岛素抵抗分子机理研究[D];四川大学;2005年
4 李全民;1.胰岛素抵抗大鼠G-6-Pase、GK、UCPs基因表达和干预研究 2.PPARα基因变异与2型糖尿病家系血脂的关系[D];重庆医科大学;2003年
5 朱伟;摄食抑制因子NUCB2/Nesfatin-1对机体胰岛素敏感性的影响[D];重庆医科大学;2011年
6 伍游雅;益气养阴,活血通腑法对代谢综合征患者外周胰岛素抵抗的影响[D];广州中医药大学;2005年
7 付雪艳;西洋参治疗大鼠胰岛素抵抗活性部位筛选及作用机理研究[D];黑龙江中医药大学;2006年
8 王雪云;Beganatide对实验性糖尿病的治疗作用及机制研究[D];吉林大学;2010年
9 付方明;新诊断标准下糖尿病前期人群代谢状况及胰岛素抵抗与胰岛功能研究[D];山东大学;2010年
10 于敏;苦酸通调法防治自发性2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的机制研究[D];长春中医药大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 纪志尚;肥胖患者血清肿瘤坏死因子(INF-α)、游离脂肪酸(FFA)水平变化及其与胰岛素抵抗(IR)相关性研究[D];青岛大学;2002年
2 冉晓丹;疏肝解郁法对2型糖尿病伴抑郁者胰岛素抵抗的研究[D];湖北中医药大学;2010年
3 赵增宇;红活麻总黄酮的制备及防治T2DM-IR作用研究[D];华中科技大学;2009年
4 王蕊;复方丹参饮对胰岛素抵抗型大鼠血管内皮细胞NO、ET-1的影响[D];黑龙江中医药大学;2010年
5 李梅;针刺调节胰岛素抵抗模型大鼠IRS-1、IRS-2和GLUT4的实验研究[D];广州中医药大学;2011年
6 胡淑鸾;不同浓度葡萄糖、胰岛素对兔视网膜Müller细胞糖原合成代谢的影响[D];福建医科大学;2011年
7 陈真;老年冠心病胰岛素抵抗和血小板P-selectin相关性研究[D];中国医科大学;2003年
8 董福明;冠心病患者胰岛素抵抗与心理因素关系的研究[D];中国医科大学;2002年
9 黄晋喜;大鼠饮食所致高同型半胱氨酸血症与胰岛素抵抗和糖尿病慢性并发症的相关研究[D];山西医科大学;2003年
10 武力勇;心室重塑患者瘦素抵抗与胰岛素抵抗的相关性研究[D];昆明医学院;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 衣晓峰;2型糖尿病动物模型成模率逾85%[N];健康报;2005年
2 张家庆 (教授);适度锻炼身体改善胰岛素抵抗[N];上海中医药报;2003年
3 成枫;“青钱柳”可改善胰岛素抵抗[N];中国中医药报;2006年
4 赵振爱;中药可改善糖尿病胰岛素抵抗[N];中国中医药报;2007年
5 傅敏端;你知道胰岛素抵抗吗[N];家庭医生报;2008年
6 第一军医大学珠江医院内分泌科 刘宏;糖尿病和胰岛素抵抗[N];中国老年报;2003年
7 第一军医大学珠江医院内分泌科 刘宏;糖尿病和胰岛素抵抗[N];科技日报;2003年
8 副主任医师 韩咏霞;为何妊娠期妇女易发胰岛素抵抗[N];保健时报;2006年
9 刘士敬刘红虹;肝源性糖尿病患者宜早用胰岛素[N];家庭医生报;2007年
10 湘雅二医院 陈化;胰岛素抵抗:糖尿病、心血管疾病的重要危险因素[N];大众卫生报;2002年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978