收藏本站
《天津医科大学》 2013年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

MDSC在骨髓增生异常综合征中免疫抑制作用的研究

江汇涓  
【摘要】:目的 通过研究骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic Syndromes, MDS)患者外周血/骨髓的髓源性抑制细胞(Myeloid-derived suppressor cells, MDSC)数目、功能变化,以及对MDS患者CD8+T细胞的影响,证实MDSC在MDS患者中数量增高,功能增强,并与疾病恶性程度相关,在体外实验中显示对MDS患者CD8+T细胞具有抑制作用。提示MDSC对于MDS的细胞免疫具有负调控作用,可能在MDS疾病进展以及向急性髓系白血病转化的过程中起到重要作用。对于进一步阐明MDS发病机制、制定相关的生物学靶向性治疗均具有重要意义。 方法 研究对象为天津医科大学总医院自2011年3月至2012年12月初治MDS患者、治疗后不同转归的MDS患者及正常对照。第一部分研究MDS患者外周血MDSC数量变化。采用流式细胞术(FCM)检测35例MDS初治患者及20名健康正常人外周血MDSC(Lin-HLA-DR-CD33+)数量,同时将MDS患者按IPSS/WPSS评分进行分层分析,并动态观察治疗后14例患者外周血MDSC数量的变化。分析MDSC与MDS患者血象、体内瘤负荷等指标的相关性。第二部分研究MDS患者骨髓MDSC数量变化与主要功能酶的表达。流式细胞技术检测30例MDS患者骨髓MDSC数量,并与19名正常人对比。FCM分选其中14例患者与14名正常人骨髓MDSC,荧光定量RT-PCR技术检测MDSC的精氨酸酶1(ARG-1)与诱导型一氧化氮合成酶(iNOS) mRNA水平表达,Western Blot免疫印迹法检测其蛋白水平表达。第三部分分选14例MDS患者骨髓MDSC与CD8+T细胞(分别以FCM与免疫磁珠分选获得),将分选后MDSC与CD8+T细胞进行混合细胞培养24-48小时,检测培养后CD8+T细胞凋亡比例与其功能性细胞因子(IFN-γ、TNF-β)分泌水平,与未混合培养组CD8+T细胞对比。 结果 第一部分MDS患者外周血MDSC比例明显高于正常对照组(1.61%vs0.83%,P=0.033);而在MDS患者的分层分析中,IPSS评分的IPSS1组(中危2+高危)患者MDSC比例明显高于IPSS≤1组(低危+中危1)患者(4.45%vs0.63%,P=0.003);WPSS评分的高危组(高危+极高危)患者MDSC比例明显高于低危组(极低危+低危+中危)患者(4.39%vs0.47%, P=0.002); MDS患者MDSC比例与血红蛋白(Hb)水平呈负相关(r=-0.214,P=0.022),与骨髓CD34+细胞比例呈正相关(r=0.274,P=0.042),与血清乳酸脱氢酶(LDH)水平呈正相关(r=0.406, P=0.001); MDS患者治疗前后对比,病情改善者MDSC比例下降,病情进展者MDSC比例升高,病情稳定者无明显变化。 第二部分MDS患者IPSS1组(中危2+高危)的MDSC,其ARG-1与iNOS的nRNA表达均明显高于IPSS≤1组(低危+中危1)(ARG17.99±4.23vs1.02±0.88, P=0.004; iNOS2.28vs1.28, P=0.002);而在蛋白水平检测,ARG1蛋白表达增高,iNOS蛋白表达无明显增高。 第三部分患者MDSC与CD8+T细胞进行混合培养后,CD8+T细胞凋亡比例((64.17±4.86)%)明显高于未混合培养组CD8+T((54.58±9.95)%, P=0.01).混合培养后,CD8+T细胞分泌IFN-γ水平((551.94±47.39)pg/ml)较未混合培养组CD8+T细胞((586.04±46.65)pg/ml)下降(P=0.022);混合培养后CD8+T细胞TNF-β分泌水平((216.54±19.46)ng/L)较未混合培养组CD8+T细胞((225.61±26.68)ng/L)有下降趋势,但差异无统计意义(P=0.100)。 结论 (1)MDS患者外周血MDSC比例增高,并随着疾病危险程度增加而上升。在临床指标中,MDSC与患者Hb水平成负相关,同时,MDSC与反映MDS恶性克隆负荷的骨髓CD34+细胞比例、血清LDH水平成正相关,并随着疾病不同转归而呈现同步变化。提示MDSC在MDS患者中的生成与募集上调,并与疾病状态相关。 (2)MDS患者骨髓MDSC比例较正常人增高。MDSC的主要活化功能酶ARG-1的表达在mRNA水平、蛋白水平均上调,提示MDSC的功能增强,并与疾病危险程度具有相关性。 (3)患者MDSC与CD8+T细胞进行混合培养后,显示MDSC具有促进CD8+T细胞凋亡的效应,并抑制其细胞因子IFN-γ的分泌。提示MDS患者MDSC在体外对免疫效应细胞有负调控作用,可能参与MDS恶性克隆免疫逃逸的发病机制。
【学位授予单位】:天津医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R551.3

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 王秀丽;邵宗鸿;姚程;何广胜;刘鸿;施均;白洁;曹燕然;涂梅峰;王化泉;邢莉民;孙娟;贾海蓉;杨崇礼;;骨髓增生异常综合征患者骨髓T辅助细胞亚群的研究[J];中华血液学杂志;2005年12期
2 王化泉;邵宗鸿;邢莉民;付蓉;涂梅峰;孙娟;贾海蓉;;骨髓增生异常综合征患者外周血树突细胞数量、亚群及其表面协同刺激分子表达的研究[J];中华血液学杂志;2007年07期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张晓英;温鸿雁;陈俊伟;李小峰;王黎醒;;未分化结缔组织病合并骨髓增生异常综合征1例[J];北京大学学报(医学版);2012年02期
2 李海文;徐向升;张政;林沪;曾珍;李元元;彭琼;李颖;王福生;戴夫;;自身免疫性肝炎患者外周血中髓系来源抑制性细胞频率变化[J];传染病信息;2011年01期
3 凌奕文;刘启发;刘灿;吴秀丽;陈银葵;范志平;宣丽;张钰;江千里;赵婕;孙竞;;粒细胞集落刺激因子对骨髓和外周血中骨髓来源的抑制细胞影响的初步研究[J];南方医科大学学报;2011年07期
4 Tamas A.Gonda;Shuiping Tu;Timothy C.Wang;丁燕;南娟;;慢性炎症、肿瘤微环境与癌变[J];中国肺癌杂志;2009年09期
5 丁燕;南娟;Binhua P.ZHOU;;炎症 加速癌症转移的驱动力[J];中国肺癌杂志;2009年11期
6 奉松青;刘春晓;郑少波;黄鹏;陈玢屾;郭凯;;肾癌患者外周血中CD33~+HLA-DR~-髓源抑制性细胞的表达及其临床意义[J];南方医科大学学报;2013年04期
7 张帆;郭亚军;;髓系来源的免疫抑制性细胞免疫调节作用的研究进展[J];安康学院学报;2013年03期
8 李晨;刘鸿凌;臧红;朱冰;陈婧;刘婉姝;游绍莉;辛绍杰;;外周血髓源性抑制细胞在HBV相关慢加急性肝衰竭患者中表达的研究[J];传染病信息;2013年06期
9 刘列;刘振芳;罗军;苏良焱;赖永榕;;荧光原位杂交技术对骨髓增生异常综合征7号染色体核型异常的诊断价值[J];广西医学;2013年10期
10 吴皓;李鸿;祁鑫;裴迎霞;;八宝丹对结肠癌荷瘤小鼠的血、脾和骨髓中的髓系抑制性细胞的影响[J];中华中医药杂志;2014年02期
中国重要会议论文全文数据库 前4条
1 Jun Zhang;Ji Cao;Rong Dong;Meidan Ying;Qinjie Weng;Jian Ma;Qiaojun He;Bo Yang;;Tumor hypoxia enhances Non-Small Cell Lung Cancer metastasis by selectively promoting macrophage M2 polarization through the activation of ERK signaling[A];抗肿瘤药物研究新进展与肿瘤个性化药物治疗论坛论文集[C];2013年
2 周振环;杨淑莲;郎立新;侯伟;王茂生;孙长勇;周玉才;;参芪清热颗粒联合地西他滨治疗中高危MDS疗效观察[A];中华中医药学会第二届岐黄论坛——血液病中医药防治分论坛论文集[C];2014年
3 何绿苑;蔡岗丽;臧敏;朱颖;;中医药治疗意义未明特发性血细胞减少症的临床体会[A];中华中医药学会第二届岐黄论坛——血液病中医药防治分论坛论文集[C];2014年
4 任军;;肿瘤微环境分子免疫调节与细胞毒药物疗效的基础与临床[A];中国肿瘤内科进展 中国肿瘤医师教育(2014)[C];2014年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郑敏;急性白血病儿童维生素D受体基因多态性和表达及维生素D对白血病细胞的影响[D];广西医科大学;2011年
2 孙凌聪;肿瘤微环境中巨噬细胞、肥大细胞活化机制的研究[D];华中科技大学;2011年
3 施桂兰;1、半相合肿瘤特异性淋巴细胞过继免疫治疗肿瘤的小鼠模型研究 2、新型溶瘤病毒oHSV2~(hGM-CSF)的构建及其抗肿瘤作用[D];北京协和医学院;2011年
4 钟永;人肾癌细胞系干细胞分离及其免疫逃逸机制初步探讨[D];北京协和医学院;2011年
5 姜久昆;生理盐水、高渗氯化钠和羟乙基淀粉复苏失血性休克大鼠对Treg、Th1/Th2及Tc1/Tc2早期影响的实验研究[D];浙江大学;2011年
6 刘杨;microRNA-494对肿瘤诱导的髓系抑制性细胞功能调控的机制研究[D];浙江大学;2011年
7 蒋静;结核病患者结核抗原特异性T细胞免疫应答反应的研究[D];第三军医大学;2011年
8 王化泉;骨髓增生异常综合征患者细胞免疫调节及异常克隆负荷的研究[D];中国协和医科大学;2006年
9 孙世利;EGCG与锌、镉离子相互作用及其在前列腺癌细胞PC-3中的生物学行为[D];浙江大学;2008年
10 胡晓静;T细胞电压门控钾通道Kv1.3在再生障碍性贫血中的作用研究[D];山东大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 亢崇照;氨磷汀对宫颈癌Hela细胞放射增殖动力学影响的实验研究[D];郑州大学;2010年
2 贾靖;灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对淋巴细胞免疫功能的抑制作用的研究[D];承德医学院;2010年
3 王成;爆发性肝炎小鼠中髓系衍生抑制性细胞对NK细胞活性影响的研究[D];浙江大学;2011年
4 郭庆明;T细胞分泌的γ干扰素促进了环磷酰胺(CTX)化疗引起的髓系抑制性细胞(MDSCs)比例升高[D];浙江大学;2011年
5 张玉人;扶正解郁方对抑郁障碍型乳腺癌所诱导的髓系抑制细胞的干预作用研究[D];北京中医药大学;2011年
6 李海文;自身免疫性肝炎患者体内髓系来源的抑制性细胞的频率和功能研究[D];安徽医科大学;2011年
7 谢伟;人卵巢癌细胞系A2780的肿瘤干细胞的分离培养和鉴定[D];第三军医大学;2011年
8 王晓梅;Gr-1~+CD11b~+髓样前体细胞在小鼠哮喘相关炎症中作用的初步研究[D];华中科技大学;2009年
9 赵贤贤;小鼠重组sTNF-α的构建、表达及其蛋白纯化[D];华中科技大学;2009年
10 李晓燕;阻断TNF-α受体信号能减少MDSC向肿瘤组织募集与迁移[D];华中科技大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 胡喜梅,樊志荣;骨髓增生异常综合征骨髓细胞淋巴系免疫标志及其增殖特性临床意义探讨[J];白血病.淋巴瘤;2002年02期
2 苏雁华,刘芳,孟德润;MDS-RA患者外周血活化T细胞水平检测[J];中华血液学杂志;2001年02期
3 和虹,邵宗鸿,何广胜,刘鸿,施均,付蓉,赵明峰,白洁,贾海蓉,孙娟,崔振珠,储榆林,杨天楹,杨崇礼;Th1细胞在再生障碍性贫血发病机制中的作用[J];中华血液学杂志;2002年11期
4 王化泉,邵宗鸿;免疫“妥协”和骨髓增生异常综合征细胞克隆[J];中华血液学杂志;2005年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 陆文彬;沈成兴;;MDSC对免疫系统的抑制机制[J];中国免疫学杂志;2011年02期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 李利琼;孟凡明;陈海清;常芳;;利用MDSC测定材料的热导率[A];中国化学会第十三届全国化学热力学和热分析学术会议论文摘要集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 江汇涓;MDSC在骨髓增生异常综合征中免疫抑制作用的研究[D];天津医科大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 吴端;体内外研究18β-甘草次酸对MDSC免疫抑制功能的影响[D];厦门大学;2014年
2 徐晓东;胰腺癌外周血MDSC的临床分析及其形成机制的初步研究[D];华中科技大学;2013年
3 申晋;胃癌CD40~+MDSC亚群的鉴定及生物学功能初步分析[D];苏州大学;2014年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026