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《天津医科大学》 2015年
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聚乙烯基萘纳米微球的制备与表征和新型微柱细胞膜色谱技术初探

程帅  
【摘要】:目的:采用乳液聚合法制备聚乙烯基萘(PVN)纳米微球及其羧基化PVN纳米微球(PVN-COOH),将其用作β2微球蛋白(β2-M)胶乳增强免疫比浊(LETIA)检测试剂的新型载体。制备多孔硅胶涂层毛细管柱,应用于微柱细胞膜色谱(mCMC)。方法:以乙烯基萘(VN)为聚合单体,十二烷基硫酸钠(SDS)为乳化剂,过硫酸钾(KPS)为引发剂,碳酸盐缓冲液(C-buffer)为分散相,采用乳液聚合法制备了PVN纳米微球。通过VN与丙烯酸钠共聚反应,制备了PVN-COOH纳米微球,考察SDS、VN、KPS、丙烯酸钠的加入量、分散相的pH值对两种纳米微球粒径及PVN-COOH微球羧基密度的影响。将所制备的微球分别利用扫描电子显微镜、红外光谱、粒径分析等仪器和方法进行结构及形貌的表征。以物理吸附方式将β2-M的抗体固定到PVN及自制聚苯乙烯(PS)微球表面;羧化的PVN、PS微球表面的羧基经N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠(Sulfo-NHS)与1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸(EDC)活化后,将β2-M抗体偶联到微球上,制备得到β2-M-LETIA检测试剂。自制试剂利用紫外-可见分光光度计、生化分析仪等仪器对试剂的性能进行评价,并与聚苯乙烯微球检测试剂比对,对所得结果进行数据统计学处理并分析计算结果。微柱细胞膜色谱(mCMC)柱制备主要包括以下三步,第一步,毛细管柱的预处理,第二步,制备多孔硅胶涂层毛细管柱:以聚乙二醇(PEG)、尿素为制孔剂,正硅酸甲酯(TMOS)为单体,冰醋酸为溶剂,毛细管柱为载体,通过水热反应、酸活化、干燥过程,制备出多孔硅胶涂层毛细管柱。最后一步为细胞膜的固定化(本论文中采用兔红细胞为模型)。将所制备的毛细管柱分别利用高效毛细管电泳仪、扫描电子显微镜、荧光倒置显微镜进行表征。并采用维拉帕米为阳性药物,通过前沿分析实验确定不同制备条件所制备微柱的动态吸附容量。统筹分析上述结果,最终确定mCMC的最优制备条件。结果:本实验使用乳液聚合法成功制备了不同粒径的纳米级PVN、PVN-COOH微球,通过优化制备条件,可实现对微球粒径的调控。采用扫描电子显微镜观测到,制备的微球具有良好的球形度且粒径分布均匀;红外光谱证明制备的羧基化微球上含有羧基基团。考查出β2-M抗体偶联到PVN、PVN-COOH微球上的最佳条件。在上述基础上研制了以PVN及其PVN-COOH微球为载体的β2-M-LETIA检测试剂。通过与PS微球为载体的试剂进行比较,证明本论文研制的载体微球在灵敏度、线性范围等方面具有显著优势。采用水热合成法,制备了多孔硅胶涂层毛细管柱,通过改变管柱制备配方,可实现涂层厚度、孔径、孔径分布的调控。通过对细胞膜的荧光标记,实现了mCMC固定相的可视化,通过荧光强度的分析有效的反应了不同制备条件获得的mCMC管柱中细胞膜的载量。维拉帕米的前沿分析结果表明,涂层后的管柱的动态吸附容量较未涂层的管柱显著提高,且不同配方制备的涂层管柱的动态吸附容量存在显著差异。综合对比荧光强度与维拉帕米的前沿分析数据,获得了最优的mCMC管柱制备条件。结论:利用本文采用的方法和条件可以成功制备粒径大小可控、单分散的PVN、PVN-COOH微球,开发了在纳米微球表面偶联抗体的方法,自制β2-M-LETIA检测试剂。对制备条件进行了考察和优化,得到最佳反应条件。PVN、PVN-COOH纳米微球作为LETIA检测试剂的载体具有很好应用前景。在mCMC方面,与无涂层的毛细管相比,多孔硅胶涂层的毛细管柱可显著提高细胞膜载量,提高阳性药物的动态吸附容量。故多孔硅胶涂层毛细管柱更适用于mCMC。
【学位授予单位】:天津医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R943

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 廖正福;王维思;何维霖;易俊伯;许东颖;;反相悬浮聚合法制备水溶性固体聚丙烯酸[J];弹性体;2014年05期
2 李强;林燕玉;齐鹏;沈佳祚;李林;练克俭;;强的松龙纳米微球缓释膜制备及缓释特性[J];中国组织工程研究;2014年39期
3 王保全;平娟;李峰;张永州;刘翠;庞晓斌;;用壳聚糖纳米磁性微球纯化血红细胞超氧化物歧化酶[J];生物工程学报;2014年06期
4 侯晓芳;王嗣岑;张涛;贺浪冲;;细胞膜色谱法应用于中药质量控制的思考[J];世界科学技术-中医药现代化;2014年03期
5 李新星;杨泽松;罗效梅;;血清及尿液β2微球蛋白检测在糖尿病肾病分期中的诊断价值[J];国际检验医学杂志;2013年24期
6 林天浩;莫恒勤;;免疫比浊法检测糖化血红蛋白的性能评价[J];现代医院;2013年11期
7 陈建文;张凡;刘玉侠;程佩萍;李兴武;高洁;;乳胶增强免疫比浊法测定血清肌钙蛋白I的实验探讨[J];中华全科医学;2013年11期
8 池继敏;张峰;张静;;不同类型关节炎患者血液及关节液中尿酸、抗链球菌溶血素O和类风湿因子含量比较[J];中华临床医师杂志(电子版);2013年21期
9 邱志琦;温少磊;谭智毅;;胃蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ及其比值在胃癌筛查中的应用[J];检验医学与临床;2013年14期
10 杨晓霞;栾玉霞;蔡晓青;庞建梅;姜悦;;多孔微球在医药领域的应用[J];药物生物技术;2011年05期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 盛秀红;;血清胃蛋白酶原在慢性萎缩性胃炎和早期胃癌中的临床价值[J];医学检验与临床;2016年03期
2 白旭纯;林绿红;;新型溶血素在临床检验中的应用价值研究[J];中外医疗;2015年34期
3 张德忠;江伟春;刘泽洪;叶永玲;;肿瘤坏死因子α-308基因多态性与胃癌患者血清胃蛋白酶原的关系[J];中华临床实验室管理电子杂志;2015年04期
4 杜娟;杨磊;席妍;齐娜;;血清胃蛋白酶原及肿瘤标志物联合检测在老年胃癌诊断中的意义[J];中国医药导报;2015年32期
5 刘宝全;张停停;鲍丽;吕晓菊;王佳宁;张艳梅;王剑锋;范圣第;;铁镍磁性微球直接纯化组氨酸标签蛋白[J];化学研究与应用;2015年10期
6 黄思逐;柯建华;郭森仁;;PGⅠ、PGⅡ与PGR测定在中医治疗慢性胃炎中的应用(附80例病例报告)[J];临床医药文献电子杂志;2015年29期
7 武良;张德忠;江伟春;刘泽洪;叶永玲;;血清胃蛋白酶原、甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定在胃癌中的临床意义探讨[J];检验医学;2015年09期
8 徐明明;陈维;刘琳;王芳;凌云;黄镇河;;良性阵发性位置性眩晕和血清尿酸相关性研究[J];湘南学院学报(医学版);2015年03期
9 王绍亮;程江;;流式荧光法检测血清胃蛋白酶原Ⅰ/Ⅱ的应用评价[J];国际检验医学杂志;2015年13期
10 杜娟;席妍;郑珂;任既晨;王立波;;多种血清标志物联合检测在诊断老年胃癌患者中的意义[J];中国医药导报;2015年20期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 季广厚;;糖化血红蛋白检测的临床价值[J];中国医药科学;2013年15期
2 何祖玲;;糖化血红蛋白测定在糖尿病诊断中的临床价值[J];检验医学与临床;2013年09期
3 吕志贵;高绪锋;;糖化血红蛋白及其测定方法的研究进展[J];检验医学与临床;2013年07期
4 陈玉梅;;对糖化血红蛋白测定方法比较的分析[J];中国医药指南;2013年06期
5 梁达权;;糖化血红蛋白测定对糖尿病诊断和治疗的临床应用价值[J];中外医学研究;2013年03期
6 杨蔚芳;;糖化血红蛋白检测结果的临床意义分析[J];大家健康(学术版);2013年01期
7 贾茗茗;;免疫比浊法检测GHbA1c在糖尿病诊治中的临床应用研究[J];齐齐哈尔医学院学报;2012年21期
8 王青梅;郭宏;王秋萍;李悦;李为民;田野;;cTnI增高而CKMB正常冠心病患者冠状动脉病变的观察[J];医学研究杂志;2012年11期
9 赵静华;张丽坤;桂晓巍;陈冬梅;;电泳法与高压液相亲和层析法测定HbA1c的方法学比较[J];中国现代医生;2012年31期
10 张红;赵花;白晓;张树苗;;cTnI CRP和MPV在急性心肌梗死患者早期诊断中的临床意义[J];检验医学与临床;2012年16期
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1 张幼维;赵炯心;;自组装法制备载有阿奇霉素的聚己内酯纳米微球的研究[J];合成技术及应用;2014年04期
2 李筱荣;刘新玲;常津;刘小燕;;靶向5-氟尿嘧啶纳米微球对体外培养的人晶状体上皮细胞作用的研究[J];中华眼科杂志;2006年06期
3 付英松,许鑫华,韩波,许晶;微型传感器:荧光纳米微球的制备及表征[J];广州化学;2002年04期
4 陆敏;王利强;;茶多酚/壳聚糖/海藻酸钠纳米微球的制备[J];包装工程;2017年19期
5 刘洁;裴菲;何玉凤;徐知丽;李涛;王荣民;;玉米醇溶蛋白/壳聚糖复合纳米微球的制备及性能研究[J];化学研究与应用;2015年02期
6 林新兴;刘凯;陈礼辉;黄六莲;曹石林;;壳聚糖—盐酸胍纳米微球的制备及其在抗菌纸中的应用[J];福建农林大学学报(自然科学版);2014年02期
7 陈苗;王如意;成功;张高文;;二氧化硅纳米微球的制备及其表面改性[J];材料导报;2014年22期
8 王安训;李苏;丁学强;潘仕荣;;羟基喜树碱纳米微球的制备及体内外释药特性[J];中国肿瘤临床;2006年01期
9 林英;丁寅;蒋锡群;;高分子-无机复合纳米微球的制备和诊疗应用[J];化学进展;2014年Z1期
10 邹波;卢子兴;;中空纳米微球填充复合材料的有效力学性能[J];力学学报;2009年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 汪山献松;张幼维;吴承训;;明胶纳米微球的丝肽负载和释放研究[A];2007年全国高分子学术论文报告会论文摘要集(下册)[C];2007年
2 张幼维;张武警;赵炯心;;聚丙烯腈基碳纳米微球的制备[A];2015年全国高分子学术论文报告会论文摘要集——主题J 高性能高分子[C];2015年
3 邬娟;张洪斌;张琦;;可德胶多糖及其衍生物纳米微球的制备及表征[A];2009年全国高分子学术论文报告会论文摘要集(下册)[C];2009年
4 郭睿;张乐洋;蒋锡群;;通过“绿色”方法制备高分子-金复合纳米微球[A];2007年全国高分子学术论文报告会论文摘要集(下册)[C];2007年
5 赵宗山;刘景富;江桂斌;;超顺磁聚合物纳米微球去除水中痕量有机氯污染物[A];中国化学会第26届学术年会环境化学分会场论文集[C];2008年
6 王绪美;徐抒平;徐蔚青;;PMMA荧光纳米微球在细胞标记中的应用[A];第十六届全国分子光谱学学术会议论文集[C];2010年
7 王子妤;林梅;王琼;张东生;;三硫化二砷纳米微球的扫描电镜观察和图像分析[A];2006年全国电子显微学会议论文集[C];2006年
8 肖乃玉;梁辉;卢江;;新型含醛基又含葡萄糖基单体的活性可控聚合及蛋白质纳米微球的制备[A];2007年全国高分子学术论文报告会论文摘要集(上册)[C];2007年
9 孙雪飞;朱蔚璞;沈之荃;;醛基化纳米微球的高效制备及其酶固定化应用研究[A];中国化学会2017全国高分子学术论文报告会摘要集——主题A:高分子化学(2)[C];2017年
10 郝丽娟;张兵波;成靖;刘庆凯;常津;;功能化磁性荧光纳米微球的制备和表征[A];天津市生物医学工程学会2008年年会暨首届生物医学工程与临床论坛论文集[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前4条
1 本报记者 宗文雯实习生 凌昕瑶;纳米微球“小身材”蕴藏“大智慧”[N];苏州日报;2008年
2 廖勇斌;苏州纳米微球演绎“科技神奇”[N];江苏经济报;2010年
3 单小辉;神奇微球催生产业集聚[N];苏州日报;2011年
4 省委常委、苏州市委书记 王荣;苏州30年前行“精神宝典”[N];苏州日报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 丁清清;去氢骆驼蓬碱载药纳米微球的制备及其促胃癌细胞凋亡的研究[D];南京医科大学;2015年
2 杜春保;人体免疫多肽表面分子印迹纳米微球的制备与识别性能研究[D];西北工业大学;2017年
3 张皓;熊果酸载药纳米微球的制备及其体内外抗肿瘤的效果评价[D];南京医科大学;2015年
4 孟庆男;聚合物辅助合成具有壳层结构的纳米微球及其性能研究[D];吉林大学;2013年
5 陈瑞;高分子多功能纳米微球的构建与抗肿瘤研究[D];南京大学;2013年
6 林英;高分子纳米复合造影材料研究[D];南京大学;2011年
7 刘杰;生物降解聚酯作为抗癌药物和基因载体的研究[D];华中科技大学;2010年
8 丁丹;负载抗肿瘤药物的高分子纳米材料体内外抗肿瘤效果的研究[D];南京大学;2011年
9 刘宝仓;分级纳米结构的可控合成、结构调控及药物缓释和催化性能研究[D];内蒙古大学;2014年
10 王燕萍;TiO_2及其复合微球的制备与性能研究[D];吉林大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 程帅;聚乙烯基萘纳米微球的制备与表征和新型微柱细胞膜色谱技术初探[D];天津医科大学;2015年
2 滕飞;空心有机纳米微球负载Rovis carbene催化剂的制备及其在不对称串联反应中的应用[D];西南大学;2018年
3 陈娜;改性魔芋葡甘聚糖纳米微球/微胶囊的制备及用于药物载体的研究[D];华中农业大学;2018年
4 王玉娟;C-PC/CMC-CD59sp纳米微球对宫颈癌的靶向抑瘤作用研究[D];青岛大学;2018年
5 刘宝琦;以CdS为基础单元构筑三维结构及其应用研究[D];大连理工大学;2018年
6 胡梦烨;水溶性壳聚糖胰岛素纳米微球给药系统研究[D];江苏大学;2018年
7 徐敏;水分散聚己内酯载药纳米微球的制备及涂层的缓释[D];东华大学;2013年
8 曹伟成;介孔碳负载中空纳米铁微球:合成、表征及吸附研究[D];湖南大学;2017年
9 辛志浩;纳米微球对IBRV灭活疫苗的免疫效果评价[D];黑龙江八一农垦大学;2018年
10 陈慧新;含苝聚己内酯荧光微球的制备及其用于细胞荧光成像的研究[D];天津理工大学;2018年
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