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《天津中医学院》 2000年
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清脑益智方对神经细胞缺氧及谷氨酸损伤保护作用的实验研究

李苓  
【摘要】: 目的:探讨清脑益智方血清对脑缺血损伤后神经细胞的保护作 用。 方法:应用体外细胞培养技术,培养原代鼠胚脑神经细胞,根据 缺血时脑损伤机理制成缺氧及谷氨酸损伤模型。应用细胞凋亡原位 检测技术(即TUNEL法)观察中药清脑益智方血清在谷氨酸损伤 条件下对细胞凋亡的影响。应用逆转录-多聚合酶链式反应(RT- PCR)技术检测缺氧及谷氨酸损伤后脑神经细胞白介素-6(IL-6) 在中药血清作用下的基因表达的变化。并与已知具有神经保护作用 的牛磺酸进行比较研究。结果经计算机图像处理软件进行分析。通 过相差显微镜及扫描电镜对细胞超微结构进行观察。 结果:200μM谷氨酸与神经细胞共同培养10min可以代表谷氨 酸的神经兴奋毒性。此方法诱导的细胞凋亡以再培养3-6小时为最 显著。清脑益智方血清可显著降低由谷氨酸损伤所诱导的细胞凋亡 率。谷氨酸损伤组为47.28%,中药组为24.76%(p<0.05)。并能调 节损伤情况下IL-6基因的表达,使之恢复到正常免疫水平。预防 组效果优于治疗组。中药在这两方面作用皆优于牛磺酸。 结论:对谷氨酸损伤模型致细胞凋亡的动态观察,提示缺血性卒 中“治疗时间窗”即最佳时限应在6小时内。清脑益智方可通过对 IL-6基因表达水平的调节,从而在免疫应答中保护脑神经细胞免受 缺氧及谷氨酸损伤,抑制细胞凋亡,提高细胞存活率,起到保护脑 神经细胞的作用。证明了预防性神经保护对阻断缺血性级联反应的 摘翌 重要作用。本研究为防治中风病的神经细胞损伤和血管性痴呆的发 生、发展的机理研究提供了试验依据。
【学位授予单位】:天津中医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2000
【分类号】:R285.5

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