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《河北大学》 2000年
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小球藻病毒的分离提纯及其几丁质酶基因的克隆

韩继刚  
【摘要】: 以小球藻NC64A株系为寄主,从14个省市采集的数百个水样中普遍得到了 病毒分离物,初步表明小球藻病毒在我国的分布是十分广泛的。其中富营养化 的水体中小球藻病毒滴度普遍较高,而在山泉等含有机质较少的水体中病毒滴 度较低。病毒在水体中的含量随季节的变化而变化,夏季较高,冬季较低。研 究还表明小球藻病毒对宿主有很强的专一性。对病毒分离物中的11株病毒进行 了较为详细的研究,发现这些病毒具有许多相同的性质,如均为球形多角体, 基因组为300kbp左右的dsDNA。由于小球藻病毒与害主的关系具有严格的专一 性,所以这11个病毒分离物均属于NC64A小球藻病毒。但对病毒生物学性质的 研究表明,这些病毒间存在着差异:如11个病毒分离物的大小不同;基因组DNA 限制性酶切图谱(除BJ-1B和BJ-2C相同外)不同等。所以,它们应属于同一类 病毒的不同的病毒株系。 用3%~10%的PEG8000加3%~7%的NaCl沉淀小球藻病毒FJ-1。其中以7%的 PEG和4%的NaCl沉淀效果最好,而且不影响FJ-1侵染活力及其形态特征。但 PEG的沉淀效率要低于超速离心的效率,前者病毒的收率为21%,后者病毒的收 率为36%。 本文还根据文献报道设计特异性的寡核苷酸引物,以PBCV-1基因组DNA为 模板,PCR扩增小球藻病毒几丁质酶基因A181并将A181 DNA克隆到pUC19的 EcoRI、SalI位点中,得到克隆载体pUC181,通过其四个亚克隆的构建完成了该 基因的全序列测定。
【学位授予单位】:河北大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2000
【分类号】:S946.3;Q785

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 张远征,王苏燕,盛刚,叶寅,田波;小球藻病毒的分离[J];微生物学报;1996年01期
【共引文献】
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1 付薇;陈磊;熊毅;潘琼;王常伟;陈进喜;胡晓静;刘棋;;O型口蹄疫病毒结构蛋白基因VP1的克隆与原核表达[J];安徽农业科学;2008年35期
2 周华伟;林炜铁;陈涛;;小球藻的异养培养及应用前景[J];氨基酸和生物资源;2005年04期
3 李黎;徐宪忠;;海洋病毒生态学动态参数和研究技术的进展[J];安徽农业大学学报;2011年01期
4 凌应侠,徐恒士;皖北地区三个特定献血人群的丙型肝炎调查[J];蚌埠医学院学报;1996年04期
5 任书荣;高美华;王秋波;王静;;重组人突变CD59真核表达质粒的构建和转染[J];青岛大学医学院学报;2006年02期
6 吴淑华;病毒基因组的转录调节[J];病毒学报;1991年01期
7 高峰,郭可謇,阮力,伊瑶,刘崇柏,朱既明;甲型肝炎重组痘苗病毒(VMS11HAV25)的构建及其某些生物学性质[J];病毒学报;1992年02期
8 曾庆,金冬雁,金奇,胡钢,周圆,李玉英,王珣章,侯云德;人α2b型干扰素基因的修饰合成及其在大肠杆菌中的表达[J];病毒学报;1992年03期
9 万晓余,吴淑华,黄利文,张求旺,张丽兰,侯云德;应用痘苗病毒载体在动物细胞中高效表达人α-瘤坏死因子cDNA及其特性的研究[J];病毒学报;1993年01期
10 周圆,金冬雁,张智清,王伟,黎志良,迟捷,李玉英,侯云德;一种重组人α1型干扰素突变体IFN-α1/86D的纯化与鉴定[J];病毒学报;1993年01期
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2 赵三军;肖天;海东;李红波;;海洋病毒在海洋生态学与生物地球化学中的作用[A];山东省科协重点学术研讨活动成果——山东生态省建设与发展论文汇编[C];2004年
3 赵三军;肖天;岳海东;李红波;;海洋病毒在海洋生态学与生物地球化学中的作用[A];山东微生物学会第六次会员代表大会暨2004年学术年会论文集(上)[C];2004年
4 潘铁骊;张守峰;扈荣良;;几种理化因子对狂犬病病毒BD06分离株感染力的影响[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会论文集[C];2008年
5 潘铁骊;张守峰;扈荣良;;几种理化因子对狂犬病病毒分离株感染力影响的再检测[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会论文集[C];2008年
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