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《河北大学》 2003年
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棉花黄萎病拮抗细菌的筛选与抗菌蛋白的分离纯化

杜红方  
【摘要】: 本文在对棉花生态系统中的细菌进行了全面的分离的基础上,通过体外拮抗试验筛选出一株对棉花黄萎病具有拮抗作用的芽孢杆菌LC105菌株,对其进行了菌种的初步鉴定和产抗菌蛋白发酵条件研究,并从其发酵液中分离纯化出单一组分的抗棉花黄萎病菌的蛋白质。 从棉花各部位共分离出芽孢菌148株,其中有38株表现出对棉花黄萎病大丽轮枝菌的拮抗活性,其中有一株编号为LC105从棉花叶部分离出的芽孢杆菌表现出很强的拮抗活性。 对编号为LC105的菌株进行了形态观察和生理生化的实验研究初步认定该芽孢菌属类芽孢杆菌属。对其发酵液进行硫酸铵盐析,发现沉淀物的溶液对棉花黄萎病具有拮抗作用;对其进行加热处理和有机溶剂(氯仿)处理,发现其抗菌活性消失,初步认定其拮抗物质为蛋白质。 采用不同的培养温度、不同的培养时间、不同的摇床转速、不同的培养基和不同的pH值对拮抗菌LC105进行培养,对其发酵液的抗菌活性进行检测,得到了抗菌蛋白产生的最佳条件为:在pH值为7的LBG培养基中30℃、转速180r/min摇床振荡培养48小时,以50~70%饱和度的硫酸铵对其进行分级盐析,可得最大量的抗菌蛋白。 通过硫酸铵的分级沉淀、DEAE-Sephadex A-50离子交换层析和Sepharyl S-100分子筛凝胶层析的方法,从LC105菌株的发酵液中得到了一种对棉花黄萎病菌具有拮抗作用的抗菌蛋白。
【学位授予单位】:河北大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S435.62

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【引证文献】
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【参考文献】
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【同被引文献】
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1 记者张卫 通讯员王宝霞;精河县建立万亩棉花黄萎病防治示范区[N];博尔塔拉报;2010年
2 记者 赵红梅 通讯员 郭金霞 阎立波;棉花黄萎病防治技术取得重要进展[N];河北日报;2010年
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4 本期嘉宾 顾本康 主持人 罗兵前;棉花黄萎病为何流行[N];江苏农业科技报;2003年
5 水清;棉花黄萎病发生重,是杂交抗虫棉惹的祸?[N];江苏农业科技报;2009年
6 王棉;棉花黄萎病的传播和消长规律[N];中华合作时报;2004年
7 本报记者 镡立勇 通讯员 信国安;萎菌净:投入6元钱 亩产增一成[N];河北经济日报;2011年
8 朱彤 王梅 舒平;生物技术攻克棉花“癌症”[N];中国商报;2000年
9 本报记者 阎芝莉;治棉花“癌症”要从“根”抓起[N];河北科技报;2002年
10 王锡明;保护好我们的免疫系统[N];大众科技报;2002年
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