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《河北大学》 2006年
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中草药牛膝、茜草纤溶酶的筛选与分离纯化

何叶喧  
【摘要】:心脑血管疾病是危害人类健康的主要疾病之一。近三十年来,我国人群心血管病的发病率及危险因素水平呈不断上升趋势。因此研发高效、特异、安全、副作用小的溶血栓药物,一直是近年来医药界的热门课题。中医药已有悠久的历史,其中有多种药物用于治疗血栓性疾病,尤其是中药合剂。因此,活血化瘀这个专题的探讨在当代也就最为活跃。 本实验选用了45种临床常用的、具有活血化瘀作用的中草药,采用80%饱和度的硫酸铵沉淀提取它们的蛋白质,通过纤维蛋白平板法检测这些蛋白质的溶纤活性。由溶圈直径和蛋白浓度计算蛋白的溶纤比活力。结果有22种粗蛋白提取物具有体外溶纤活性,其中肉豆蔻,栝楼,蒲黄,桔梗效果明显,18小时后溶圈直径分别为12mm,16mm,11mm。总结蛋白浓度和比活力两方面因素,认为益母草、肉豆蔻、茜草、栝楼、竹节三七、牛膝、蒲黄、桔梗的蛋白提取物浓度和比活力都相对较高,比较适宜进行分离纯化等操作。 牛膝、茜草硫酸铵沉淀的粗蛋白通过阴离子交换进行分离和纯化。对得到的各组分进行活性测定,牛膝40%-1、40%-5、60%-1、60%-3和茜草40%-1、60%-1、60%-2、60%-3、60%-4、80%-2这几个分离得到的组分中含有较强的溶纤活性成分。其中分离到的牛膝40%-5蛋白组分,具有比较高的比活力(297.72 U/mg),且分子量较小(约24KD),又以单体形式发挥作用,PAGE和SDS-PAGE均为单一条带,具有进一步进行分子操作和药理实验的价值。电泳分析阴离子交换分离纯化后的茜草组分,没有得到确定活性的单一的蛋白条带。
【学位授予单位】:河北大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:S567.239

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【参考文献】
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