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《河北大学》 2009年
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壳聚糖固定化β-半乳糖苷酶的研究

张燕  
【摘要】:以三氯均三嗪为交联剂,实现了β-半乳糖苷酶在壳聚糖载体上的固定化过程,并与传统交联剂戊二醛进行了比较。在最优化制备条件下,测定了固定化酶的活性回收率为47%。另外,以三氯均三嗪作为交联剂制备固定化β-半乳糖苷酶,反应条件较戊二醛法温和,操作简单,耗时短。 比较了不同粘均分子量壳聚糖(50×104,100×104,200×104)的成球情况及壳聚糖分子量对固定化酶活力、酶活性回收率的影响,确定了50×104的壳聚糖为最适固定化β-半乳糖苷酶载体。自设计方法制备了毫米级壳聚糖小球,方法较传统方法更加简单、快速。湿润壳聚糖小球直接干燥和采用体积分数为30%的甘油处理后干燥对比实验表明,后者能够保持小球湿态时的结构,既保证了酶的固定化效果,又有利于载体的工业储存。 以硅胶为致孔剂制备了多孔壳聚糖载体,扫描电子显微镜显示,添加致孔剂的载体表面(载体Ⅰ)比未加致孔剂的载体表面(载体Ⅱ)具有更多的孔结构。上述两种载体分别固定米曲霉β-半乳糖苷酶,固定化结果表明:载体Ⅰ制备的固定化酶具有更好的酶活性和酶活性回收率。最后我们对固定化酶的性质:最适pH,pH稳定性,最适温度,热稳定性,操作稳定性以及动力学参数等进行了测定,结果表明:以硅胶为致孔剂制备的固定化酶各项数据良好,具有更广的应用前景。
【学位授予单位】:河北大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:TQ464.3

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