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《华北理工大学》 2019年
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TLR4/NF-κB信号通路在抑郁模型大鼠高脂血症产生中的作用研究

王宁  
【摘要】:目的探究抑郁模型大鼠高脂血症的发生情况,并探究TLR4/NF-κB信号通路在其中所起作用。方法前期采用糖水偏好试验、血脂检测试剂盒、实时荧光定量PCR(RTQPCR)、免疫蛋白印迹(Western blot)技术对大鼠行为学表现、血脂水平、海马组织TLR4蛋白表达水平进行检测,以了解大鼠基础血脂水平及TLR4蛋白本底表达情况。筛选出糖水偏好分数、血脂水平相近的40只成年雄性SD(SpragueDawley)大鼠,随机分为四组(n=10):空白对照组、抑郁模型组、TLR4干扰组、TLR4对照组。TLR4干扰组自尾静脉注射AAV-CMV-U6-sh RNA(TLR4)病毒用于干扰大鼠体内TLR4表达,TLR4对照组自尾静脉注射等量AAV-CMV-U6空白病毒,空白对照组和抑郁模型组尾静脉注射等量生理盐水。一周后使用RTQPCR技术检测大鼠海马组织TLR4蛋白表达干扰情况。随后进行抑郁模型构建:空白对照组正常饲养,不予处理,其余三组均采用慢性不可预知性温和应激法(CUMS法)构建抑郁模型,连续应激8周。每周称量各组大鼠体重水平,并于建模8周后,采用强迫游泳试验、旷场试验、糖水偏好试验检测大鼠行为学表现,采用血脂试剂盒检测大鼠各项血脂水平,采用Western blot技术检测大鼠海马组织、主动脉TLR4/NF-κB信号通路相关因子的表达情况,并对各项结果进行分析讨论。结果1抑郁建模前,大鼠各项血脂水平位于参考范围,无明显差异。海马组织TLR4 m RNA与蛋白表达水平均显著高于内参照β-actin表达,差异具有显著性。2AAV-CMV-U6-sh RNA(TLR4)病毒注射后,TLR4干扰组TLR4 m RNA与蛋白表达水平均显著低于其他各组(P0.05)。3抑郁建模过程中,大鼠体重变化分析:随着刺激时间增加,与空白对照组相比,抑郁模型组与TLR4对照组大鼠的体重增长明显减缓(P0.05);TLR4干扰组大鼠体重增长稍缓慢,但差异无显著性(P0.05)。4抑郁建模过程中,血脂水平分析:随着刺激时间增加,与对照组相比,抑郁模型组与TLR4对照组大鼠HDL-C明显降低,LDL-C、TG、T-CHO明显升高,差异具有显著性(P0.01);TLR4干扰组大鼠LDL-C升高,差异具有显著性(P0.01),HDL-C、TG、T-CHO差异无显著性(P0.05)。与TLR4对照组相比,TLR4干扰组HDL-C、LDL-C、TG、T-CHO均有显著性差异(P0.01)。5抑郁建模结束后,大鼠行为学分析:与空白对照组相比,抑郁模型组与TLR4对照组大鼠的旷场试验水平得分、垂直得分、总得分均显著减小(P0.01),强迫游泳试验中不动时间显著延长(P0.01),糖水偏好分数显著降低(P0.01);TLR4干扰组大鼠旷场试验水平得分、总得分与对照组无显著差异(P0.05),垂直得分有显著差异(P0.01);强迫游泳试验中不动时间无显著差异(P0.05);糖水偏好分数无显著差异(P0.05)。6抑郁建模结束后,海马组织中TLR4/NF-κB信号通路相关因子表达分析:与空白对照组相比,抑郁模型组与抑郁TLR4对照组TLR4、NF-κB、IL-1β及TNF-α蛋白表达量明显升高,差异具有显著性(P0.05);TLR4干扰组蛋白表达量较对照组升高,但差异无显著性(P0.05)。7抑郁建模结束后,主动脉组织中TLR4/NF-κB信号通路相关因子表达分析:与对照组相比,抑郁模型组与TLR4对照组TLR4、NF-κB、IL-1β及TNF-α蛋白表达量明显升高,差异具有显著性(P0.05);TLR4干扰组蛋白表达量较对照组升高,但差异无显著性(P0.05)。结论1抑郁可以诱导大鼠血脂水平改变,导致高脂血症。2抑郁诱导大鼠高脂血症发生的分子机制可能与激活TLR4/NF-κB信号通路,促进炎症因子释放有关。图11幅;表13个;参91篇。
【学位授予单位】:华北理工大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R749.4;R-332

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