收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63 srpA基因的功能分析

吕向坤  
【摘要】:玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63是一株从马铃薯疮痂病自然衰退土壤中分离的生防菌,能够产生多种脂溶性抗生素,对多种植物病原真菌有抑制作用。 A-因子及其类似物作为一种微生物激素广泛存在于多种链霉菌中,其上均含有一个γ-丁酸酯环结构。A-因子及其类似物对链霉菌的代谢和菌体形态分化具有重大调控作用,可调控链霉菌的气生菌丝生长、孢子形成以及次级代谢产物的形成。研究发现afsA基因家族能够编码链霉菌A-因子及其类似物合成过程中的一种关键酶。本实验室前期工作中将玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63抗生素合成基因簇定位于其线性质粒pSR47上,生物信息学分析发现pSR47含有afsA家族基因srpA。 本研究通过基因敲除技术进行srpA基因的功能分析。主要研究结果如下: 1)构建srpA基因敲除载体pKC1139-srpAF-tsr-srpAR,应用接合转移技术将pKC1139-srpAF-tsr-srpAR转入玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63,初筛获得硫链丝菌素抗性突变株。 2)分别提取野生株和srpA突变株48h、60h、72h、84h菌丝体总RNA,进行逆转录PCR检测。发现不同时间段内野生株均有srpA的转录物存在,srpA缺失突变株则无srpA,这在转录水平上证明突变株srpA敲除成功。 3)生长曲线测定表明:与野生株相比,srpA缺失突变株在液体培养过程中生长率以及生物量均较低。 4)菌落形态表型观察表明:与野生株相比,srpA缺失突变株其基内菌丝、气生菌丝与孢子链的形成在时间上被推迟;野生株会产生大量的气生菌丝与浅粉色的孢子,而srpA缺失突变株只能产生少量的气生菌丝与少量无色的孢子;野生株的基内菌丝会产生柠檬黄色素,而srpA缺失突变株则没有柠檬黄色素产生。 5)抑菌实验结果显示野生型玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63对棉花黄萎病有拮抗作用,可以产生明显的抑菌圈,而srpA缺失突变株失去对棉花黄萎病的拮抗作用。


知网文化
【相似文献】
中国重要会议论文全文数据库 前5条
1 邸垫平;李亚宁;孟庆芳;张汀;刘大群;;玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63抗生素的提取和薄层分析[A];第四届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会暨第三届生物农药研讨会论文集[C];2006年
2 梁蕾;孟庆芳;杨文香;刘大群;;硫酸二乙酯对玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63的诱变效应[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年
3 郭艳平;赤国彤;孟庆芳;张汀;刘大群;;玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63固体培养基中活性成分的初步分离[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年
4 刘金艳;李亚宁;张汀;刘大群;;玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63原生质体制备条件的研究[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年
5 冀红柳;刘大群;孟庆芳;李亚宁;;玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63负调控基因nsdB的克隆及序列分析[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 邸垫平;玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63活性组分的制备及相关基因克隆研究[D];河北农业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吕向坤;玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63 srpA基因的功能分析[D];河北农业大学;2014年
2 闫震;玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63固态发酵培养基及其活菌制剂的研究[D];河北农业大学;2010年
3 刘金艳;玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63转化体系的建立[D];河北农业大学;2007年
4 张艳杰;玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63对蔬菜根结线虫的防治及其作用机理[D];河北农业大学;2013年
5 李爱霞;玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63及其突变菌株蛋白质表达差异分析[D];河北农业大学;2008年
6 郭艳平;玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63诱变菌株的筛选及其活性成分的研究[D];河北农业大学;2007年
7 沈凤英;玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63接合转移体系及nsdA基因的研究[D];河北农业大学;2009年
8 刘莲娜;玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63与变铅青链霉菌TK24的原生质体种间融合[D];河北农业大学;2011年
9 王璇;玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63与其抗生素生物合成阻断突变株间的DNA多态性分析[D];河北农业大学;2008年
10 梁蕾;玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63阻断突变体的筛选及分析[D];河北农业大学;2007年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978