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《河北北方学院》 2016年
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地衣芽胞杆菌对实验性结肠炎相关肝脏病变的疗效及机制影响

郑楠  
【摘要】:炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)一词专指病因及发病机制未明的炎症性肠道疾病(idiopathic inflammatory bowel disease),它主要包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn’s disease,CD)。目前认为其发病可能是遗传、免疫、肠黏膜屏障功能失调、饮食、精神等多因素综合作用所致。IBD的主要病变虽然位于肠道,但与之相关的各种肠外表现也并非少见,肝胆疾病被认为是最常见的肠外表现之一。近年来研究发现IBD时,肠道菌群失调导致黏膜通透性增高,肠道屏障受损,细菌易位且内毒素产生增多,通过门脉系统转运至肝。内毒素为主要致病物质,它可触发炎性细胞因子(如TNF、IL-1、IL-6等)和辅助刺激分子大量释放,对肝细胞产生直接损害,最终导致肝胆疾病的发生。地衣芽孢杆菌活菌胶囊属需氧益生菌制剂,进入肠道后通过消耗氧气制造厌氧环境,促进正常厌氧菌如双歧杆菌、乳酸杆菌等繁殖,同时抑制腐败菌的生长繁殖,减少细菌内毒素的产生;且可降低肠道p H,酸性环境促进氨及内毒素排泄,利于肝功能好转。因此,本实验对地衣芽孢杆菌治疗实验性结肠炎相关肝脏病变的机制及疗效情况进行了初步研究。将45只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、DSS组、DSS+地衣芽胞杆菌组,每组15只。以无菌蒸馏水配置3%DSS溶液为唯一饮用水供DSS组及DSS+地衣芽胞杆菌组小鼠自由饮用10d,正常对照组饮用蒸馏水。地衣芽孢杆菌108CFU/ml于造模第1天起进行灌胃给药,其余两组予生理盐水灌胃以作对照(0.2ml/10g,1次/日)。在造模及给药10天后,麻醉小鼠去眼球取血,收集结肠及肝脏组织。实验过程中对各组小鼠进行疾病活动指数评分(Disease activity index,DAI),并进行结肠长度测量、结肠大体形态观察及病理组织学评估(histological index,HI)。运用苏木素-伊红染色(hematoxylin and eosin stain,HE stain)进行结肠及肝脏组织病理检测,全自动生化仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST),酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)、内毒素(endotoxin)、肝组织匀浆中TNF-α、IL-6含量水平。实验结果显示通过应用地衣芽孢杆菌对实验性结肠炎小鼠进行治疗,DSS组、DSS+地衣芽胞杆菌组DAI评分、HI评分,血清ALT、AST、D-乳酸、DAO、内毒素均较正常对照组明显升高(P0.05),并且肝组织匀浆中TNF-α、IL-6含量显著升高(P0.05)。而DSS+地衣芽胞杆菌组与DSS+地衣芽胞杆菌组相比较DAI评分,血清ALT、AST、D-乳酸、DAO、内毒素均降低(P0.05);肝组织匀浆中TNF-α、IL-6含量显著降低(P0.05)。本项研究证实地衣芽孢杆菌对实验性结肠炎及相关肝胆病变具有治疗作用,提示其可能是通过调节肠道菌群,促进肠黏膜屏障功能恢复,减少细菌移位、内毒素的生成和入血以及炎性因子的产生,从而减轻内毒素和炎性因子对肝脏的损伤作用。地衣芽胞杆菌有利于促进肠黏膜屏障功能的恢复,使其在抗结肠炎作用的同时改善了肝功能,下调了炎症因子的表达,促进免疫功能恢复,更有利于UC的综合治疗,为识别UC的肠外表现,进行早期、有效的治疗,进一步控制UC的疾病进展及改善预后提供新的思路.
【学位授予单位】:河北北方学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R574.62

【参考文献】
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