森林革蜱种群生态及希伯来花蜱卵蜡层抑菌分子研究

【摘要】：本研究利用野外可控及模拟实验调查了河北省自然条件下森林革蜱Dermacentor silvarum生活史各发育阶段的生物学特性。在蜱类分布的自然生境中建立可控样方,自然光照和气候条件下,森林革蜱D. silvarum幼蜱、若蜱和成蜱在兔体吸血,非寄生阶段在可控样方内自由生活,记录其各发育阶段生活史参数并观察找寻宿主行为及季节发生情况。结果表明雌蜱具有行为滞育,且其产卵时间及卵的孵化都具有一致性,从而使自然条件森林革蜱D. silvarum主要活跃在2月下旬至9月上旬。森林革蜱D. silvarum雌蜱可在3月、4月和5月饱血,不同月份饱血的雌蜱其产卵前期和卵的孵化期差异极大,进而使其生活史周期也存在较大差异。自然条件下幼蜱(18天)和若蜱(29天)的发育历期与实验室条件下无明显差异。雌蜱饱血体重与产卵量相关(r = 0.76, p 0.001),其在3月、4月和5月的生殖效率指数分别为5.7、7.1和6.2。自然条件下,森林革蜱D. silvarum雌蜱产卵方式与实验室条件下有很大不同。 在此基础上,进一步调查了自然条件下寄生期及非寄生期森林革蜱D. silvarum的季节发生数量及动态。结果表明,森林革蜱D. silvarum主要在灌丛滋生,一年仅能完成一个世代,其生活史各阶段季节发生具有连续性,仅幼蜱和若蜱的活动存在部分交叉。成蜱主要活跃在2月下旬到5月下旬,高峰出现在4月中旬;幼蜱在6月上旬至9月上旬活动,高峰出现在7月中旬;若蜱主要分布在6月下旬至9月下旬,高峰在8月中旬。森林革蜱D. silvarum成蜱和若蜱主要侵袭羊体耳部,幼蜱不能在羊体寄生。10月后,在羊体发现部分越冬雄蜱寄生,但拖旗法未能捕获自由生活成蜱。 测定了希伯来花蜱Amblyomma hebraeum卵及卵蜡层提取物的抑菌活性及抑菌谱,结果表明,希伯来花蜱A. hebraeum卵能够抑制革兰氏阴性菌生长,卵蜡层有机相和水相提取物抑制革兰氏阳性菌的生长。有机相提取物中主要为胆固醇酯以及碳链长度为13到26的脂肪酸。脂类分馏和气相色谱/质谱结果进一步表明,有机相提取物中,不饱和脂肪酸C16:1和C18:2存在抑菌活性。水相提取物与有机相提取物的组成存在差别,且水相提取物具有极强的热稳定性、pH稳定性及蛋白酶稳定性。核磁共振分析测定了36种代谢物,结果表明,其均不具有抑菌活性,因此,水相提取物中发挥抑菌活性的物质还需进一步分离纯化。