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昆虫病原线虫对两种硬蜱的致病力与侵染机理

高志华  
【摘要】: 蜱类是重要的媒介动物,传播多种人、畜疾病,造成极大危害。化学杀虫剂一直是防治蜱类的主要方法,虽然在一定程度上控制了蜱类种群数量,但长期使用,不仅使蜱产生抗性,而且对人、畜造成危害和环境污染。因此,人们一直在寻求一种既安全又有效的生物防治方法。昆虫病原线虫是很具潜力的生物防治因子,它有寄主范围广、易繁殖、对环境安全等优点,已广泛应用于有害昆虫生物防治中。 本文以我国重要的媒介蜱种——森林革蜱Dermacentor silvarum Olenev和长角血蜱Haemaphysalis longicornis Neumann为研究对象,利用昆虫病原线虫对其进行侵染实验研究,筛选对两种蜱致死率高的线虫品系,所需的最适线虫浓度,蜱对线虫的敏感期;测定线虫侵染对雌蜱产卵量的影响;线虫侵入的位点。此外,利用Bradford法、PAGE和酶活力测定等技术,对昆虫病原线虫及其共生菌所引起的蜱血淋巴总蛋白含量、酯酶活性以及酯酶条带的变化进行测定,从而为利用昆虫病原线虫对蜱进行生物防治提供依据,主要研究结果如下: 1.实验所用昆虫病原线虫含2个科、2个属的5个种类:Steinernema carpocapsae BJ(Sc BJ),S.glaseri NC32(Sg NC32),Heterorhabditis bacteriophora E-6-7(Hb E-6-7),S.feltiae Otio(Sf Otio)和S.ceratophorum D43(Sc D43)。用5个种类的线虫侵染森林革蜱和长角血蜱各发育期成虫。结果表明,两种硬蜱的饱血雌蜱较易被线虫侵染,但不同线虫种类导致不同的死亡率。斯氏线虫Sc BJ对森林革蜱饱血雌蜱的致死率较高,14天后蜱的累积死亡率为90.0%;异小杆线虫Hb E-6-7对长角血蜱饱血雌蜱的致死率较高,14天后蜱的死亡率为93.3%。 2.线虫对蜱的致死效应因浓度不同而存在差异。不同浓度的斯氏线虫Sc BJ对森林革蜱饱血雌蜱的致死率分别为30.0%(1000 IJs/dish),85.0%(3000IJs/dish),90.0%(5000 IJs/dish)和95.0%(7000-10000 IJs/dish)。异小杆线虫 胡究论文一,!,文摘要 Hb E-6一7在不同浓度下,对长角血卿饱血雌蚌的致死率分别为75.0%(1000 IJ澎dish),90.0%(3000 IJs/dish),95,0%(5000一1 0000 IJs/dish)。 3.通过测定雌蟀的产卵量来评价线虫对蜂产卵力的影响。结果显示,线虫 侵染均可使森林革卿和长角血卿饱血雌蚂!的产卵力显著下降。Sc BJ各线虫浓 度均能使森林革蚌雌卿的产卵量显著少于对照组,但对产卵前期没有显著影 响。1000一10000 IJs/dish浓度的异小杆线虫HbE一6一7,均能使长ff]血蚂琶饱血雌 蚂琶的产卵最显著下降,且10000 IJS/d ish浓度能使长角血蟀饱血雌妙的产卵前 期显著延迟,I可其它线虫浓度对产卵IiiJ’期无显著形响。 4.异小杆线虫HbE一6一7浸染使长角血卿血淋巴中的总蛋白含最发生变 化。在线虫感染第12小时后,被感染蚂!血淋巴中的蛋白含录显著增加,达最 大位(92.21 09/pl)。第24小{l寸,蛋自含量又显著下降(49.06 09/仁1), 第48小时又下降到最低位(34.25“以“l)。而在空白对照组和注射一亚蒸水 X寸照组中,蜂的血淋巴蛋白含缺在0一48小l付内无显著变化。 5.长角血蜂血淋巴中的酝酶活性受线虫及其共生菌的影响。在线虫感染 后的0一12小时,线虫及其共生菌对血淋巴中的酷酶活性没有显著影响。在24 小时后,受感染蟀的醋酶活性迅速增加(ODZ;=0.1 840,OD36=0。1 940, OD4s二0.2 x65),显著高于空白对照组(OD24=0.0940,OD36=0.1095, OD4:二0.1 305)和注射重蒸水对级(组(0D24二0.1098,OD36二0.1185, OD;s二0一360)。空白对水龙组不‘]玄i:射垂蒸水对照组I‘,IJ无显著差异(P0,05),交i二 射垂蒸水对蚂(血淋巴中的酷酶活性没有显著彩响。队GE研究表明,线虫及其 共生菌引起卿血淋巴中酷酶同_L酶(EST)电泳图谱变化,表现为位于图潜两 端的两个条带的消失或增加。 6.异小杆线虫HbE一6一7可经假头和后板之I’llJ、附肢与躯体交接处的体壁 浸入森林革蚌体内。此种线虫可经假头丛部佼入长角血蟀体内。


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