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《河北师范大学》 2003年
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昆虫病原线虫对两种硬蜱的致病力与侵染机理

高志华  
【摘要】: 蜱类是重要的媒介动物,传播多种人、畜疾病,造成极大危害。化学杀虫剂一直是防治蜱类的主要方法,虽然在一定程度上控制了蜱类种群数量,但长期使用,不仅使蜱产生抗性,而且对人、畜造成危害和环境污染。因此,人们一直在寻求一种既安全又有效的生物防治方法。昆虫病原线虫是很具潜力的生物防治因子,它有寄主范围广、易繁殖、对环境安全等优点,已广泛应用于有害昆虫生物防治中。 本文以我国重要的媒介蜱种——森林革蜱Dermacentor silvarum Olenev和长角血蜱Haemaphysalis longicornis Neumann为研究对象,利用昆虫病原线虫对其进行侵染实验研究,筛选对两种蜱致死率高的线虫品系,所需的最适线虫浓度,蜱对线虫的敏感期;测定线虫侵染对雌蜱产卵量的影响;线虫侵入的位点。此外,利用Bradford法、PAGE和酶活力测定等技术,对昆虫病原线虫及其共生菌所引起的蜱血淋巴总蛋白含量、酯酶活性以及酯酶条带的变化进行测定,从而为利用昆虫病原线虫对蜱进行生物防治提供依据,主要研究结果如下: 1.实验所用昆虫病原线虫含2个科、2个属的5个种类:Steinernema carpocapsae BJ(Sc BJ),S.glaseri NC32(Sg NC32),Heterorhabditis bacteriophora E-6-7(Hb E-6-7),S.feltiae Otio(Sf Otio)和S.ceratophorum D43(Sc D43)。用5个种类的线虫侵染森林革蜱和长角血蜱各发育期成虫。结果表明,两种硬蜱的饱血雌蜱较易被线虫侵染,但不同线虫种类导致不同的死亡率。斯氏线虫Sc BJ对森林革蜱饱血雌蜱的致死率较高,14天后蜱的累积死亡率为90.0%;异小杆线虫Hb E-6-7对长角血蜱饱血雌蜱的致死率较高,14天后蜱的死亡率为93.3%。 2.线虫对蜱的致死效应因浓度不同而存在差异。不同浓度的斯氏线虫Sc BJ对森林革蜱饱血雌蜱的致死率分别为30.0%(1000 IJs/dish),85.0%(3000IJs/dish),90.0%(5000 IJs/dish)和95.0%(7000-10000 IJs/dish)。异小杆线虫 胡究论文一,!,文摘要 Hb E-6一7在不同浓度下,对长角血卿饱血雌蚌的致死率分别为75.0%(1000 IJ澎dish),90.0%(3000 IJs/dish),95,0%(5000一1 0000 IJs/dish)。 3.通过测定雌蟀的产卵量来评价线虫对蜂产卵力的影响。结果显示,线虫 侵染均可使森林革卿和长角血卿饱血雌蚂!的产卵力显著下降。Sc BJ各线虫浓 度均能使森林革蚌雌卿的产卵量显著少于对照组,但对产卵前期没有显著影 响。1000一10000 IJs/dish浓度的异小杆线虫HbE一6一7,均能使长ff]血蚂琶饱血雌 蚂琶的产卵最显著下降,且10000 IJS/d ish浓度能使长角血蟀饱血雌妙的产卵前 期显著延迟,I可其它线虫浓度对产卵IiiJ’期无显著形响。 4.异小杆线虫HbE一6一7浸染使长角血卿血淋巴中的总蛋白含最发生变 化。在线虫感染第12小时后,被感染蚂!血淋巴中的蛋白含录显著增加,达最 大位(92.21 09/pl)。第24小{l寸,蛋自含量又显著下降(49.06 09/仁1), 第48小时又下降到最低位(34.25“以“l)。而在空白对照组和注射一亚蒸水 X寸照组中,蜂的血淋巴蛋白含缺在0一48小l付内无显著变化。 5.长角血蜂血淋巴中的酝酶活性受线虫及其共生菌的影响。在线虫感染 后的0一12小时,线虫及其共生菌对血淋巴中的酷酶活性没有显著影响。在24 小时后,受感染蟀的醋酶活性迅速增加(ODZ;=0.1 840,OD36=0。1 940, OD4s二0.2 x65),显著高于空白对照组(OD24=0.0940,OD36=0.1095, OD4:二0.1 305)和注射重蒸水对级(组(0D24二0.1098,OD36二0.1185, OD;s二0一360)。空白对水龙组不‘]玄i:射垂蒸水对照组I‘,IJ无显著差异(P0,05),交i二 射垂蒸水对蚂(血淋巴中的酷酶活性没有显著彩响。队GE研究表明,线虫及其 共生菌引起卿血淋巴中酷酶同_L酶(EST)电泳图谱变化,表现为位于图潜两 端的两个条带的消失或增加。 6.异小杆线虫HbE一6一7可经假头和后板之I’llJ、附肢与躯体交接处的体壁 浸入森林革蚌体内。此种线虫可经假头丛部佼入长角血蟀体内。
【学位授予单位】:河北师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S476

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【引证文献】
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【参考文献】
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7 包喜军;戴宗浩;刘占斌;王立强;;硬蜱致犬神经麻痹的诊断与综合防治措施[A];第十三次全国养犬学术研讨会论文集[C];2009年
8 杨高鹏;薛国红;斯琴;段立清;;荧光增白剂、寄主植物、LdNPV地理品系对舞毒蛾幼虫中肠酯酶的影响[A];中国风景园林学会2013年会论文集(下册)[C];2013年
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9 杨振德;柳蓝叶甲和分月扇舟蛾的生物学特性及其对苦豆草生物碱的行为反应[D];南京林业大学;2004年
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10 代陈胜;Pristionchus属昆虫病原线虫新种09FLY1的分离鉴定与致病性研究[D];南京农业大学;2010年
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1 韩冰;从斌;刘亚臣;付海滨;;不同品系昆虫病原线虫对大蜡螟羧酸酯酶活性的影响[J];安徽农业科学;2006年07期
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10 杭树群;杨怀文;张善稿;简恒;;应用昆虫病原线虫防治食用菌眼蕈蚊研究[A];全国生物防治学术讨论会论文摘要集[C];1995年
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6 刘峥;嗜线虫致病杆菌CB6菌株杀虫活性相关分子机制[D];中国农业科学院;2003年
7 王立霞;Xenorhabdus bovienii A54菌株杀虫物质的研究[D];中国农业科学院;2000年
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4 房云;昆虫病原线虫共生菌菌株09FLYB1的分离鉴定及其杀虫毒素蛋白的分离纯化与活性研究[D];南京农业大学;2010年
5 代陈胜;Pristionchus属昆虫病原线虫新种09FLY1的分离鉴定与致病性研究[D];南京农业大学;2010年
6 高秋峰;三种昆虫病原线虫Enolase基因的克隆、原核表达及功能研究[D];福建农林大学;2010年
7 王欢;昆虫病原线虫共生菌杀虫活性的研究[D];河北农业大学;2002年
8 张奎花;昆虫病原线虫共生菌杀虫活性及异小杆线虫培养条件优化[D];甘肃农业大学;2013年
9 夏颖伟;昆虫病原线虫发育相关基因的鉴定以及spi-583基因的克隆与表达[D];河北农业大学;2006年
10 丁晓帆;几种昆虫病原线虫行为学及其侵染大蜡螟幼虫血淋巴病理学研究[D];南京农业大学;2005年
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