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《山西农业大学》 2014年
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绵羊Lpin1基因的克隆、遗传变异、表达及其与性状的关联研究

魏琳琳  
【摘要】:脂素助in1基因在机体的脂肪代谢中发挥着重要的作用,不仅可以作为磷脂酸磷酸酶(phosphatidate phosphatase, PAP)直接参与甘油脂类和磷脂的合成,而且可以作为转录辅活化因子,间接调节脂类代谢相关基因的表达。通过研究LpinI基因的结构、遗传变异、表达及其与相关性状的相关性,有利于深入的了解机体内脂肪代谢的机制。不同尾脂型绵羊机体脂肪代谢的途径可能不同。但是,目前关于绵羊Lpinl基因的核酸序列、分子结构、遗传变异和表达的研究未见报道。 本研究从DNA.mRNA和蛋白质3个水平对绵羊Lpinl基因的结构、多态性、mRNA及蛋白质的表达及其与性状的关联进行了研究。利用RT-PCR技术克隆绵羊Lpinl基因的编码区序列(coding sequence, CDS),并对CDS及编码的氨基酸序列进行生物信息学分析。以不同脂尾型绵羊(广灵大尾羊和小尾寒羊)共96个个体为研究对象,利用PCR-SSCP技术检测绵羊Lpinl基因的5'调控区序列的多态性,并将其基因型与两品种绵羊的尾型性状及屠宰性状进行关联研究。利用Real-time PCR技术和Western blotting技术分别检测两品种绵羊2、4、6、8、10、12月龄的7个不同部位(肠系膜、大网膜、小网膜、腹膜后、肾周、皮下、尾部)的脂肪组织中Lpinl基因mRNA和蛋白质的表达量,并分析mRNA表达与各性状的相关性。得到以下主要结果: (1).绵羊Lpinl基因CDS区序列长2688bp,编码895个氨基酸。该基因编码的蛋白Lipin1为一种不稳定的亲水性脂溶蛋白,无信号肽和跨膜域,含有5个O-糖基化位点和5个N-糖基化位点及88个磷酸化位点,Lipinl蛋白的氨基末端和羧基末端各含有一个高度保守的区域,分别为Lipin-N和LNS2。绵羊Lpinl基因CDS区核苷酸序列及对应氨基酸序列与大部分物种间的相似性均较高。 (2)在绵羊Lpinl基因5'调控区检测到9个SNPs位点,分别为:-2484GA,-2170CT,-1782AG,-1717AC,-1237CA,-1218CT,-534CT,-474CG,-227CT,其中有6个转换,3个颠换。基因型与性状关联分析表明,P1引物扩增的片段的不同基因型对绝对尾脂重和相对尾脂重具有显著影响(P0.05)。P4引物和P9引物扩增的片段的不同基因型分别对尾宽和尾长具有显著影响(P0.05)。说明Lpinl基因对绵羊尾型及尾部脂肪沉积具有一定的影响,为绵羊肉质性状的标记辅助选择提供了理论依据。 (3) Lpinl mRNA在所检测的绵羊脂肪组织中均有表达且存在极显著性差异(P0.001)。肾周脂肪中表达量最高,尾部脂肪次之,肠系膜中表达量最低,且显著低于其他组织;广灵大尾羊的表达量极显著(P0.001)高于小尾寒羊;月龄间差异极显著(P0.01)。10月龄表达量最高,8月龄最低,两者之间差异显著。品种与性别、组织间及月龄与品种、组织间的互作效应对Lpinl mRNA的表达具有显著影响。Lpinl mRNA表达与性状的关联分析表明,两品种不同组织Lpinl mRNA表达与各性状的关联各不相同。这些结果暗示Lpinl基因的遗传表达可能在不同脂尾型绵羊的脂肪代谢途径中发挥着不同的作用。 (4)品种、组织及月龄与性别、品种间的互作对绵羊Lipinl蛋白的表达具有显著影响。Lipinl蛋白的表达情况与mRNA的表达情况大体一致,但并非呈线性关系。 综上所述,通过对绵羊Lpinl基因的系统研究,为揭示该基因对不同脂尾型绵羊脂肪代谢途径的调节奠定了科学基础。
【学位授予单位】:山西农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:S826

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王建民,秦孜娟,曲绪仙,王中华,李福昌;山东小尾寒羊种质特性及利用途径的研究进展(上)[J];草食家畜;1997年03期
2 刘世荣;何维;;SUMO化修饰:一种多功能的蛋白质翻译后修饰方式[J];医学分子生物学杂志;2006年03期
3 储明星,马月辉,王端云,张英杰,刘月琴;山东小尾寒羊研究概况[J];国外畜牧科技;1999年04期
4 顾真庆;冯志新;王占伟;刘茂军;王海燕;白昀;邵国青;;PCR-SSCP技术在微生物检测中的应用[J];生物技术通报;2011年02期
5 郭会灿;;蛋白质翻译后修饰研究进展[J];生物技术通报;2011年07期
6 高重天;孙群;;如何正确估计蛋白质SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的样品加样量[J];生物学通报;2009年03期
7 姜彬;;蛋白质免疫印记分析法实验条件的研究[J];实验技术与管理;2008年05期
8 汤贤春;路健;李学英;;PCR-SSCP技术在基因多态分析中的应用[J];中国西部科技;2010年06期
9 卫利选;常振华;何诚;郭本玲;蓝贤勇;陈宏;雷初朝;;Lpin1基因多态性与黄牛经济性状的关联研究[J];西北农业学报;2012年01期
10 马艳琴;孙子龙;王彬;郭超;陈鹏晓;;Western blot检测家兔动脉组织蛋白质表达条件的优化[J];农学学报;2011年06期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李波;谢丽波;于婷;张桂英;杨雪玲;方芳;刘娅;徐学纯;;吉林省西部草原小尾寒羊的营养成分及重金属含量的调查分析[J];吉林大学学报(医学版);2009年01期
2 曾勇庆,王慧;小尾寒羊肉品氨基酸和矿物质营养特性研究[J];草食家畜;2000年02期
3 张春珍,李聚才;良种肉用绵羊与小尾寒羊杂一代屠宰试验研究[J];中国草食动物;2005年04期
4 王桂芝,王建民;山东地方绵羊品种遗传距离的研究[J];山东畜牧兽医;2000年02期
5 张玉斌;吴建平;雷赵民;王强;;德国美利奴羊与小尾寒羊杂交一代生长及产肉性能研究[J];甘肃农业大学学报;2008年04期
6 储明星,马月辉,王端云,张英杰,刘月琴;山东小尾寒羊研究概况[J];国外畜牧科技;1999年04期
7 徐永杰;吴海港;姚瑾;刘英;梁小娟;马云;;信阳水牛GHRH基因第二外显子的SNPs检测[J];中国牛业科学;2012年04期
8 穆欢喜;李盛华;周明旺;郭铁峰;;甾醇调节因子结合蛋白基因多态性与股骨头缺血性坏死相关性研究进展[J];甘肃中医学院学报;2013年06期
9 王峰;李岩;;雄激素受体在男性精子异常的研究进展[J];才智;2013年06期
10 何鑫淼;刘娣;;民猪与皮特兰猪杂交猪肉质研究[J];安徽农业科学;2013年23期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 彭津津;赵克强;张英杰;刘月琴;;不同饲喂水平对无角陶赛特羊和小尾寒羊杂交二代公羔体质量、屠宰性能和组织器官生长发育的影响[A];中国畜牧兽医学会养羊学分会2012年全国养羊生产与学术研讨会议论文集[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 黎满香;感染猪的粪肠球菌的分离鉴定及部分特性和诊断方法研究[D];湖南农业大学;2010年
2 王伟伟;热休克蛋白47在大鼠结膜滤过泡瘢痕化过程中的作用及其作用机制的研究[D];北京协和医学院;2011年
3 曹荣峰;小尾寒羊子宫复旧的研究[D];东北农业大学;2002年
4 朱文涛;15~150日龄羔羊日粮消化率和瘤胃消化功能变化的研究[D];新疆农业大学;2005年
5 孙伟;中亚以东南不同生态型绵羊品种群体遗传学的研究[D];扬州大学;2006年
6 罗玉柱;中国高原型细毛羊种质特性研究[D];甘肃农业大学;2005年
7 徐珺劼;类泛素修饰蛋白Saccharomyces cerevisae Urm1的溶液结构测定、进化意义分析及功能研究[D];中国科学技术大学;2007年
8 冯秀萍;重组人胸腺素β16的表达、纯化和胸腺素β16的应用研究[D];吉林大学;2009年
9 肖朝庭;影响绵羊高繁殖力和非季节性发情基因的研究[D];浙江大学;2007年
10 匡云波;香蕉叶片糖代谢若干关键酶基因的克隆及其在低温胁迫下的表达研究[D];福建农林大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李成云;硫酸镍对大鼠睾丸细胞能量代谢的影响[D];兰州大学;2011年
2 梁莹;醉马草内生真菌共生体对小尾寒羊的影响[D];兰州大学;2011年
3 段魏魏;新疆沙尘暴源区塔克拉玛干沙漠空气微生物多样性研究[D];新疆大学;2011年
4 程若倩;肥胖儿童青少年代谢异常及其与TCF7L2、LPIN2基因多态性的研究[D];复旦大学;2010年
5 穆晓琨;乐至黑山羊GH、IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ基因的多态性与cDNA克隆及组织表达的研究[D];西南民族大学;2011年
6 卫利选;黄牛LPIN1基因的单核苷酸多态性及其与经济性状的关联研究[D];西北农林科技大学;2011年
7 张彩霞;鸡Lpin2基因的时空表达特性及其遗传变异与性状的关联分析[D];河南农业大学;2011年
8 李素雅;鸡Lpin1基因的可变剪接体表达特性及基因侧翼区变异的效应研究[D];河南农业大学;2011年
9 赵永聚;甘肃省金昌市世纪之交的养羊业及其发展对策的研究[D];甘肃农业大学;2000年
10 邓峥;促黄体素β亚基基因多态性及其与小尾寒羊高繁殖力关系的研究[D];浙江大学;2002年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王建民,秦孜娟,曲绪仙,王中华,李福昌;山东小尾寒羊种质特性及利用途径的研究进展(上)[J];草食家畜;1997年03期
2 毛允飞,张文;仔猪断乳后腹泻的综合防治[J];当代畜禽养殖业;1998年04期
3 张莉萍,蒋纪恺,Joe Tam;Western blot检测蛋白表达的方法改进及初步应用[J];第三军医大学学报;2001年10期
4 孔令泉;蒲莹晖;马仕坤;涂刚;任国胜;;快慢转法及不同滤膜和显色检测法在Western blotting中的应用分析[J];南方医科大学学报;2008年01期
5 高国福,姚树祥,孙秀娣,常润生,姜勇,罗学昌,晋萍,乔友林;云南锡矿工肺癌的队列研究[J];中国肺癌杂志;2002年02期
6 刘世荣;何维;;SUMO化修饰:一种多功能的蛋白质翻译后修饰方式[J];医学分子生物学杂志;2006年03期
7 余梅;毛华明;黄必志;;牛肉品质的评定指标及影响牛肉品质的因素[J];中国畜牧兽医;2007年02期
8 王少华;王飞;杭孝;刘强;熊惠军;;兽用B超在肉牛活体检测中的应用[J];中国畜牧兽医;2010年02期
9 覃志坚,卢冬,常正义,何印蕾;PCR-SSCP法快速检测鉴定临床病原菌的探讨[J];广西医科大学学报;2003年03期
10 姜鹏;毛福荣;崔晶;李峰;张玺;王莉;王中全;;不同地理株旋毛虫细胞色素氧化酶Ⅰ基因多态性的PCR-单链构象多态性分析[J];郑州大学学报(医学版);2009年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 卫利选;常振华;何诚;郭本玲;蓝贤勇;陈宏;雷初朝;;Lpin1基因多态性与黄牛经济性状的关联研究[J];西北农业学报;2012年01期
2 魏琳琳;高晋生;王景霖;程俐芬;乔利英;贾夏丽;张静;杨凯捷;刘建华;梁琛;刘文忠;;绵羊LPIN1基因的克隆和mRNA表达研究[J];畜牧兽医学报;2013年09期
3 ;[J];;年期
4 ;[J];;年期
5 ;[J];;年期
6 ;[J];;年期
7 ;[J];;年期
8 ;[J];;年期
9 ;[J];;年期
10 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 王润之;黄艳群;陈文;康相涛;韩瑞丽;孙桂荣;田亚东;;Lpin1基因启动子区域变异对鸡脂肪相关性状的影响[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 卫利选;黄牛LPIN1基因的单核苷酸多态性及其与经济性状的关联研究[D];西北农林科技大学;2011年
2 魏琳琳;绵羊Lpin1基因的克隆、遗传变异、表达及其与性状的关联研究[D];山西农业大学;2014年
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