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《山西农业大学》 2018年
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萱草属植物花蕾中秋水仙碱和酚类物质的检测与分析

张宁  
【摘要】:萱草属(Hemerocallis spp.)隶属百合科(Liliaceae,为多年生宿根草本,在我国有几千年的栽培历史,是一种兼具经济价值、药用价值和观赏价值的多功能植物。萱草属植物花蕾含有秋水仙碱、类黄酮和多酚类物质,具有抗氧化,降脂,抗肿瘤,抗抑郁等作用。目前,关于萱草属植物花蕾的研究多集中在成分分析,对于不同萱草属植物花蕾中各物质成分的差异变化报道较少。本文从山西农业大学萱草种质资源圃选取具有代表性的种质材料,利用高效液相色谱法和紫外分光光度计对萱草属植物花蕾中秋水仙碱、总黄酮和9种多酚类物质建立检测体系,为萱草属植物的开发和利用提供一定的理论依据。具体试验结果如下:1.通过分析不同色谱条件对秋水仙碱含量测定的影响,优化了秋水仙碱的检测体系,并比较了29份不同萱草属植物花蕾中的秋水仙碱含量。萱草属植物花蕾中秋水仙碱含量测定的HPLC条件为:Thermo-Syncronis C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相比例甲醇:水=50:50,流速0.8ml/min,柱温25℃,检测波长243nm,进样量10μL。29份萱草属植物材料中秋水仙碱平均含量为0.125μg/g,其中含量较高的是'北黄花'和'大同金针',为0.301μg/g和0.291μg/g;含量较低的是'宿迁2号'和'淮安2号',含量分别为0.017μg/g和0.016μg/g;平均加标回收率在89.1%~98.8%之间。进一步对花蕾中的秋水仙碱含量与花色进行了相关性分析,结果表明相关系数高达-0.765。2.通过SPSS软件设计正交试验,对萱草属植物花蕾中的总黄酮提取工艺进行研究,优选出较为简便的总黄酮提取工艺,并对29种萱草属植物花蕾中总黄酮含量进行测定和分析。其中最佳提取工艺为:乙醇浓度70%,超声时间20min,超声频率80kHz,料液比1:10;影响总黄酮提取率的因素依次为料液比超声时间乙醇浓度超声频率。29份材料中,总黄酮含量最高的是'淮安2号',为4.84%;含量最低的是'大同金针',为0.80%。其平均含量为3.12%。加标回收率92.25%~96.51之间。3.建立了 HP L C法同时测定萱草花蕾中9种多酚类化合物的方法,为萱草属植物花蕾中酚类物质的提取与应用提供技术支撑。优选出的色谱条件为:采用Thermo-Syncronis C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流速:0.8ml/min,温度:30℃,进样量 10μL,流动相:0.2%乙酸水溶液(A)和甲醇(B),采用梯度洗脱,洗脱程序为:0~5min,10%(B);5~1Omin,10-20%(B);10~20min,20-35%(B);20~25min,35~45%(B);25~30min,45%(B);30~35min,45~60%(B);35~45min,60~45%(B);45~50min,45~10%(B)。在190~600nm范围内,对标准品进行3D扫描,9个标准品的最大吸收波长范围为255~370nm,为了实现9种物质的同时检测,最终确定波长为280nm。在建立的检测体系下,9种酚类物质得到较好的分离,分离度均大于1.5,线性相关系数均大于0.99,线性范围为1~50μg/mL,最低检出限为0.005~0.06μg/mL,9种多酚类物质精密度RSD在0.27%~1.05%之间,重复性RSD值在2.54%以下,稳定性试验中保留时间和峰面积的RSD值均小于2.64%和3.24%,此方法可作为该9种酚类物质同时检测的方法。4.利用建立的体系检测分析了萱草种质资源圃46种材料中芦丁、绿原酸等9种酚类物质的含量差异。结果显示:没食子酸、芦丁和槲皮素在萱草属植物花蕾中均可检测到。其中,没食子酸在'红色海盗'中含量最高,为43.60μg/g;芦丁在'走好运'中含量最高,为23.40μg/g;槲皮素在'小红74'中含量高达221.58μg/g。香豆酸、绿原酸、儿茶素、香草酸、丁香酸、阿魏酸在46种萱草属植物花蕾中的平均含量分别为8.49μg/g、9.11μg/g、4.56μg/g、1.97μg/g、3.87μg/g、1.31μg/g。
【学位授予单位】:山西农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:S682.19

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【参考文献】
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