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《山西农业大学》 2005年
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野牛草种质资源遗传多样性的RAPD分析

张晓波  
【摘要】:随着我国城市草坪绿化事业的发展,对水资源的需求逐年加大,但我国的人均水资源占有量处于世界平均水平以下,所以开发节水耐旱型草坪对我国草坪发展非常必要。野牛草[Buchloe dactyloides(Nutt.)Engelm.]是以耐旱而著称的草坪草种,正逐渐成为一种极具潜力的暖季型草坪草。本文利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对所收集的10个野牛草材料进行分析,旨在应用RAPD技术构建DNA指纹图谱;在此基础上通过数据分析探讨不同材料的亲缘关系,通过对材料的特异片段的筛选鉴定,获得材料的特异标记,为今后的选育工作奠定基础。 本试验对260条引物进行了筛选,最后确定了14条多态性和重复性好的引物,在反复优化影响试验结果的各因子基础上,确定了最优组合的RAPD反应体系,对10个材料进行了扩增,共扩增出129条谱带,其中72条具多态性;利用高效引物OPE21及OPN10构建DNA指纹图谱,根据DNA谱带计算出10个材料相似系数范围为0.832~0.958;用非加权组平均法(un-weighted pair-group method with arithmetic means,简称UPGMA)构建系统发生树,探讨了各材料之间的遗传关系。聚类分析的结果表明,10个参试野牛草材料明显区分为两大类群,三号、四号、五号雌性植株聚合在一起,其它的植株聚合在一起。说明这两个分支的野牛草材料分别是具有较近的亲缘关系的类群,它们之间具有相似的遗传背景;通过分析DNA图谱,得到三个重复性好且条带信号强的特异标记片断,OPE21-697、OPN10-1543以及OPN10-1000分别可作为二号雄性植株(8号)、四号雌性植株(4号)、雌雄同株(7号)的特异性标记。
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