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《山西农业大学》 2004年
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小尾寒羊抑制素beta亚基基因RFLP及SSCP多态性的研究

薛昱  
【摘要】:本研究分析了四个绵羊品种的抑制素beta-A 亚基基因RFLP 多态性及抑制素beta-B 亚基基因SSCP 多态性。抑制素beta-A 亚基以两对引物进行PCR-RFLP 分析,第一对引物(M1)扩增产物为402bp 的beta-A 亚基基因外显子Ⅱ特定片段(本研究中记为INHBAⅠ),未发现多态性。第二对引物(M2)扩增产物为1100bp 的beta-A 亚基基因特定片段(记为INHBAⅡ)。因为目前尚无抑制素beta-A 亚基基因全序列的报道,所以通过比较绵羊抑制素beta-A亚基mRNA 全序列与牛抑制素beta-A 亚基基因全序列设计引物,所得扩增片段包括外显子Ⅱ全序列以及内含子序列。通过限制性酶MspⅠ的RFLP 分析鉴别出两种基因型,在1.5%琼脂糖凝胶上的酶切带型分别为641/183/163/107bp,641/390/183/163/107bp,记为AA 型与AB 型。 计算了这两种基因型在四个绵羊品种内的基因频率、基因型频率,A 基因为优势等位基因;Hardy-Weinberg 检验证明基因频率及基因型频率处于平衡状态。对INHBAⅡ的群体遗传特性分析显示该基因在四个绵羊群体中都呈低度多态。方差分析结果表明,INHBAⅡ基因型对小尾寒羊第一胎产羔数和第二胎产羔数均有显著影响(P0.05)。最小二乘均值的差异显著性分析表明,对一胎产羔数,AB 型小尾寒羊比AA 型平均多产0.45 只(P0.05);对二胎产羔数,AB 型小尾寒羊产羔数比AA 型平均多产0.53 只(P0.05)。 外显子Ⅱ直接编码成熟抑制素beta-A 亚基,对402bp 的片段测序并与已有的九个国外绵羊品种同一位点DNA 序列比较。结果发现小尾寒羊与已知的家养绵羊的序列图完全重合。除野生绵羊品种外,家养绵羊之间DNA 序列只有两个碱基突变,分别是Rhoenschaf 绵羊25bp 处G→A,引起氨基酸表达突变Ala→Thr;Merinolandschaf 绵羊165bp 处C→A,未引起氨基酸表达突变。抑制素beta-B 亚基基因的PCR-SSCP 检测,PCR 产物为294bp 的beta-B亚基基因外显子Ⅱ特定片段,未发现多态性。 由以上实验结果,我们认为抑制素beta-A 亚基基因可以作为小尾寒羊产羔数性状的分子遗传标记,用于标记辅助选择。
【学位授予单位】:山西农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:S826

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