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《山西医科大学》 2011年
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大鼠脑挫伤后血栓调节蛋白的时序性表达

李娜  
【摘要】:目的:应用酶联免疫吸附ELISA法、免疫组织化学SABC法检测大鼠脑挫伤后血浆及脑组织中血栓调节蛋白(TM)的表达变化规律,以期为法医学实践中推断脑损伤时间提供科学的参考依据。 方法:选取64只健康成年SD大鼠,雌雄不限,体重270±10g(由山西医科大学实验动物中心提供),随机分为实验组(N=56)及对照组(n=8),实验组依据挫伤时间不同再分为7个亚组。均实施腹腔麻醉后,实验组动物参照Feeney’s法,采用模拟自由落体装置于颅骨中线旁3mm处造成脑挫伤模型,通过常规HE染色认定挫伤部位及挫伤程度,对大鼠脑挫伤后7d内继发脑损伤的病理学改变及TM的分布特征进行光镜观察,同时分别于挫伤后1h、4h、8h、12h、24h、3d、7d七个时间点(n=8)取大鼠心血5ml,低温离心后留取血浆,置于-70℃保存备用;取挫伤处脑组织100mg,制作成蜡块保存备用。对照组仅进行手术、钻孔等同样处理,但不受打击,其余处理与实验组相同。应用酶联免疫吸附方法检测脑挫伤后血浆中TM的时序性变化,对检测结果进行统计学分析;应用免疫组织化学SABC法观察挫伤部位血管内皮中TM含量的时序性变化,结合图像分析技术及统计学分析进行结果分析,观察上述指标与挫伤时间的关系。 结果:两种方法统计结果显示:(1)大鼠脑挫伤后TM在血浆中的表达于伤后4h开始出现升高,24h达到峰值,随后血浆中含量逐渐减少,3d后仍有少量表达但仍高于对照组,7d后表达基本恢复至接近对照组水平;(2)脑挫伤后挫伤部位血管内皮中TM表达呈现出与血浆中相同变化规律。 结论:大鼠脑挫伤后血浆和脑组织中TM表达随着挫伤时间呈规律性变化,可望用于法医学鉴定及早期法医学损伤时间推断。酶联免疫吸附实验技术与免疫组织化学技术操作简单易行,适合法医学研究及检案的需要。
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:D919

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