收藏本站
《山西医科大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤MMP-2、MMP-9和TIMP-1动态变化及对细胞凋亡的影响

杨星星  
【摘要】:目的:新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)是围生期窒息、缺氧所致的疾病,是引起新生儿死亡和慢性神经系统损伤的主要原因之一。HIE可诱导多种细胞因子和炎性介质释放。近年来基质金属蛋白酶(MMPs)尤其是金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinases-2,MMP-2)、金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)被证实与缺氧缺血性脑损伤关系密切[1]。本实验通过建立新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxicischemic brain damage,HIBD)模型,观察HIBD后大鼠行为变化、脑组织病理变化,采用免疫组化法测定MMP-2、MMP-9和金属蛋白酶组织抑制因子-1(metalloproteinasesorganization inhibitory factor-1,TIMP-1)的动态变化,通过缺氧缺血侧脑组织细胞凋亡率测定,从金属蛋白酶对细胞凋亡的影响来探讨新生儿HIE的发病机制。 方法:(1)制备新生大鼠HIBD模型。(2)行为能力的检查:分别于术前和术后及缺氧时观察每只大鼠的行为变化。(3)将7日龄Wistar大鼠72只随机分为:假手术组和HIBD组,后者根据动物处死时间分为HIBD6h组、24h组、48h组、5d组和14d组,每组12只。假手术组给予颈部正中切口游离左侧颈总动脉,不进行缺氧缺血,24h后断头取脑组织。HIBD组游离并结扎左侧颈总动脉后放回母鼠旁母乳喂养2h,后置于低氧环境中缺氧2h,各组大鼠于相应时间点断头取脑组织后肉眼观察脑组织大体形态改变,石蜡切片HE染色光镜下观察左侧脑组织病理变化,各组一半大鼠用免疫组织化学方法检测左侧脑组织MMP-2、MMP-9和TIMP-1变化,各组另一半大鼠用流式细胞术检测左侧脑组织细胞凋亡率。 结果:(1)HI后大鼠出现不同程度的行为异常。(2)HI后可见脑组织大体有不同程度的异常改变,随着时间的推移,脑组织改变程度逐渐减轻。(3)HE染色:假手术组脑组织结构及细胞层次清晰,神经元排列整齐紧密,仅见个别细胞体积缩小,核深染;HIBD6h组皮层细胞轻度肿胀;HIBD24h组肿胀明显,神经元排列紊乱,细胞间隙增大,可见许多变性的神经元; HIBD48h组出现小片液化坏死;HIBD5d组情况较HIBD48h组好转,皮层水肿减轻,存活的神经元增多,仍有较多变性坏死的神经元;HIBD14d组损伤有所恢复,存活的神经细胞明显增多。(4)免疫组织化学染色:光镜观察发现,MMP-2、MMP-9和TIMP-1阳性染色呈棕黄色的细颗粒,阳性细胞表达于大脑皮层和海马,阳性着色主要位于胞质,MMP-2可能由缺血的内皮细胞和巨噬细胞[2]分泌,而MMP-9和TIMP-1则可能由小胶质细胞分泌[3]。假手术组中MMP-2表达弱或无表达(图7),HIBD6h组轻度增高(图8),HIBD5d组再次达高峰(图5),且峰值高于HIBD6h组,除HIBD24h组,与假手术组比较差异有统计学意义(P0.05,见表1)。假手术组中MMP-9有一定程度表达(图7),HIBD6h组轻度增高,HIBD24h组达高峰(图9),除HIBD14d组,与假手术组比较差异有统计学意义(P0.05,见表1)。假手术组中TIMP-1有一定程度表达(图13),HIBD48h组达高峰(图16),除HIBD6h组和HIBD14d组,与假手术组比较差异有统计学意义(P0.05,见表1)。(5)脑细胞凋亡率:HIBD24h组有轻度升高, HIBD5d组时达高峰, HIBD14d组则较HIBD5d组时下降,除HIBD6h组,与假手术组比较差异具有统计学意义(P0.05,见表2)。结论:(1)通过对HI后大鼠行为能力观察以及大鼠脑组织病理学观察,证实HIBD模型建立成功。(2)HIBD组MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表达有不同程度变化,可能参与了HIBD的发病与修复。
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R722.1

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 蔡志友;晏勇;王凤英;赵宇;;急性脑梗死患者血清MMP-2、MMP-9与血糖、胰岛素及IGF-1相关性研究[J];重庆医学;2008年03期
2 陈大庆;张荣;朱烈烈;庄荣;;大鼠脑出血后MMP-2、MMP-9的表达与神经元凋亡关系的实验研究[J];福建医药杂志;2008年04期
3 刘胜达;;大鼠脑出血后脑组织MMP-2、MMP-9表达及其与脑水肿关系的研究[J];实用心脑肺血管病杂志;2007年04期
4 王卫东;黄虹;邹浩元;林红;;缺氧缺血对体外血脑屏障通透性的影响及其机制的研究[J];实用医学杂志;2008年04期
5 王菊莉,韩玉昆;新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经细胞凋亡时程[J];新生儿科杂志;2003年03期
6 汤泽中,周丛乐,虞人杰;新生鼠缺氧缺血脑损伤脑细胞凋亡与钙超载的研究[J];中华儿科杂志;2001年01期
7 许璟,刘伟国,杨小锋,林敏;MMP-2、MMP-9、TIMP-1在星形细胞瘤中的表达及其意义[J];中华实验外科杂志;2002年03期
8 吴婉芳;;新生儿缺氧缺血性脑病动物实验研究[J];中国实用儿科杂志;1995年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李晓东;;复方丹参注射液治疗新生儿缺氧缺血性脑病疗效观察[J];中医药临床杂志;2005年06期
2 王则骏,王振玺;新生儿窒息34例临床分析[J];安徽医学;1998年04期
3 储茂广;;纳洛酮治疗新生儿缺氧缺血性脑病的临床研究[J];安庆医学;2001年02期
4 杨礼环;;脑循环功能治疗仪治疗脑梗死患者60例的临床疗效观察[J];重庆医学;2009年05期
5 刘文英;;早期训练对缺氧缺血性脑病患儿智力发育的影响[J];当代护士;2007年01期
6 周文浩,邵肖梅,李瑾,陈莲;新生猪缺氧缺血脑损伤模型制备的研究[J];中国当代儿科杂志;2003年02期
7 唐红平,彭小明,袁隆建,汪秋珍;硫酸镁治疗新生儿缺氧缺血性脑病的临床研究[J];中国当代儿科杂志;2004年01期
8 申绍夫;;新生儿行为神经测定对复方丹参治疗新生儿缺氧缺血性脑病的评价[J];当代医学;2009年27期
9 毕丹东,肖玉清;苯巴比妥预防新生儿缺氧缺血性脑病的疗效及对脑脊液SOD、MDA含量的影响[J];中国医师杂志;2005年S1期
10 胡伟;赵聪敏;巩守平;;神经生长因子和神经节苷脂对新生鼠缺氧缺血性脑损伤海马神经细胞的保护作用[J];第三军医大学学报;2006年24期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张晓忠;“百会”透“曲鬓”对脑出血急性期大鼠MMP-2、CytC、VCAM-1、NGB影响的实验研究[D];黑龙江中医药大学;2011年
2 孙海燕;川芎嗪对大鼠脊髓继发性损伤神经保护作用及机制的研究[D];第二军医大学;2004年
3 汪吉梅;选择性头部亚低温治疗新生猪缺氧缺血性脑损伤脑电生理的变化[D];复旦大学;2005年
4 陈莉娜;新生鼠实验性缺氧缺血性脑损伤后μ-Calpain的活性变化及其抑制剂的脑保护作用研究[D];四川大学;2006年
5 孟培燕;电针对血管性痴呆大鼠学习记忆相关信号通路影响的研究[D];湖北中医学院;2007年
6 谢岷;骨髓基质细胞脑内移植治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的时间窗探讨[D];中南大学;2008年
7 付强;滋补肝肾以调控NEI促进神经功能重塑的路径研究[D];山东中医药大学;2008年
8 杨钰楠;微泡联合诊断超声波开放血脑屏障及促药跨膜转运的研究[D];第三军医大学;2008年
9 王小云;不同时间电针干预对实验性脑出血大鼠炎性免疫反应的研究[D];湖北中医药大学;2012年
10 张素勤;电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织Ang-1、COX-2表达影响的研究[D];湖北中医药大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 薛豪杰;神经节苷脂对缺氧缺血性新生大鼠认知功能改善的研究[D];郑州大学;2010年
2 曹娟;电刺激小脑顶核对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织血管内皮细胞生长因子及其受体的影响[D];郑州大学;2010年
3 张海娇;神经节苷脂联合参附注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用[D];山西医科大学;2011年
4 白丹;EPO对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时脑组织Caspase-9和Caspase-3的影响[D];山西医科大学;2011年
5 熊壮;破血化瘀填精补髓法对脑出血大鼠灶周组织MMP-2/MMP-9的影响[D];长春中医药大学;2011年
6 李艳芸;新生大鼠缺氧缺血性脑损伤iNOS和COX-2 mRNA表达变化[D];天津医科大学;2002年
7 许春花;TMP、PGE_1对缺氧缺血新生大鼠脑细胞的影响[D];延边大学;2002年
8 曹艳华;缺氧缺血新生大鼠脑内NMDAR1、HSP70表达变化及GM1的脑保护作用[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
9 毕淑英;7-硝基吲唑在新生鼠缺氧缺血性脑损伤中的保护作用[D];天津医科大学;2003年
10 常丽;新生大鼠缺氧缺血脑损伤ICEmRNA,COX-2蛋白的表达变化及COX-2抑制剂NS398的抗氧化作用[D];天津医科大学;2003年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杜孝文;吴小候;余晓东;李俊;;p38MAPK对大鼠肾缺血再灌注损伤早期MMP-9表达的调控[J];重庆医学;2007年14期
2 余连芝;赖伟权;唐建平;余曼玲;;新生儿缺氧缺血性脑病脑脊液中TNF-α及IL-6水平的变化及意义[J];实用医学杂志;2006年11期
3 林奕浩;林少毓;廖耿辉;;新生儿缺氧缺血性脑病MRI弥散成像影像分度与临床分度的相关性[J];实用医学杂志;2006年15期
4 李洪琼;;新生儿缺氧缺血性脑病血清白介素变化及其临床意义[J];实用医学杂志;2007年05期
5 黎月华;吕炳霞;邱真;庞晓飞;;新生儿缺氧缺血性脑病血阴离子间隙分析[J];实用医学杂志;2007年16期
6 王天佑,阎军,彭亮,梁实,徐立新;体外培养的中枢神经细胞的“缺血”性损害[J];中国病理生理杂志;1989年05期
7 刘胜达,周志明,吴家幂;大鼠脑出血后脑组织MMP-2、MMP-9表达的实验研究[J];中风与神经疾病杂志;2003年02期
8 张尉华,饶明俐,吴江,胡利华,孟令秋,杜丹华,张颖,胡春光;实验性脑出血血肿周围组织的细胞凋亡[J];中风与神经疾病杂志;2003年05期
9 程国强;邵肖梅;刘先知;黄海娟;周文浩;张旭东;;选择性头部亚低温治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤对脑血流和氧合代谢的影响[J];中华围产医学杂志;2005年06期
10 周禾,殷金珠,段丹霞,尹忆民;CD4单克隆抗体在体内诱导小鼠胸腺细胞凋亡[J];中华微生物学和免疫学杂志;1995年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王艳,李富华;血清MMP-2检测的临床应用[J];现代中西医结合杂志;2003年22期
2 王海南;细胞外基质分解酶[J];肝脏;1999年02期
3 王喜梅,孙雷,刘逢吉,张朝,张众;甲状腺乳头状癌MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表达对肿瘤侵袭转移的影响[J];实用癌症杂志;2004年02期
4 范松青,魏启幼,李美容,梁青春,张利群;MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2在乳腺癌中的表达及临床意义[J];诊断病理学杂志;2003年02期
5 李莉,张声,林华,林建银;基质金属蛋白酶和组织金属蛋白酶抑制剂表达失衡与胃癌浸润转移的关系[J];癌症;2002年03期
6 魏启幼,吴元清,范松青,周金平;MMP-2,MMP-9,TIMP-1和TIMP-2在肝癌中原位表达[J];湖南医科大学学报;2003年03期
7 邱晓红,李荷莲;基质金属蛋白酶MMP-2 MMP-9及其抑制因子TIMP-1 TIMP-2在子宫内膜异位症中的表达及意义[J];中国实用妇科与产科杂志;2004年03期
8 周彩云,姚济芬,陈晓端;基质金属蛋白酶MMP-2、9及其抑制因子TIMP-1、2在子宫颈鳞癌中表达的研究[J];癌症;2002年07期
9 陈元美;基质金属蛋白酶2和9与缺血再灌注损伤关系探讨[J];福建医药杂志;2004年02期
10 魏红山;血浆基质金属蛋白酶及其抑制物水平作为慢性丙型肝炎的非侵入性判定指标[J];国外医学.消化系疾病分册;2000年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 谢梅林;;阿司匹林通过PPAR α/γ和TIMP1介导机制抑制MMP-2和MMP-9的表达及活性[A];苏州市自然科学优秀学术论文汇编(2008-2009)[C];2010年
2 张磊涛;殷学民;黄洪章;;TIMP-2基因过表达抑制成釉细胞瘤侵袭性生长的实验研究[A];第八次全国口腔颌面—头颈肿瘤会议论文汇编[C];2009年
3 左俏;夏丽芳;王战建;;糖尿病大鼠肺脏AGES、TGF-β1、MMP-9和TIMP-1的表达及人工虫草和罗格列酮对肺脏的保护作用[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
4 王永贤;刘平;应朝霞;葛文娱;;强脉冲光对培养的人成纤维细胞表达MMP-1和TIMP-1的影响[A];2010全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2010年
5 姜艳;罗小良;靳路远;谢晓莉;;大蒜素对人牙周膜成纤维细胞MMP-1和TIMP-1表达的影响[A];全国第八次牙体牙髓病学学术会议论文汇编[C];2011年
6 李芳;林蓓;张淑兰;;MMP-2、MMP-9及TIMP-2、TIMP-1在宫颈鳞癌中的表达及意义[A];第八次全国妇产科学学术会议论文汇编[C];2004年
7 姚济芬;周彩云;付晓敏;韦兰芳;王水英;;子宫颈鳞癌和腺癌中MVD、MMP-2、9和TIMP1、2表达的研究[A];第八次全国妇产科学学术会议论文汇编[C];2004年
8 钟理;何国祥;李德;冉擘力;景涛;唐波;;逆向酶谱法检测TIMP-4抑制MMPs酶解活性[A];中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2004年
9 赖逸贵;区志穗;罗仁;刘友章;宋雅芳;;胃炎Ⅰ号对CAG大鼠胃黏膜MMP1与TIMP1mRNA表达的影响[A];中华中医药学会第二十二届全国脾胃病学术交流会暨2010年脾胃病诊疗新进展学习班论文汇编[C];2010年
10 钟理;何国祥;李德;冉擘力;景涛;唐波;;腺病毒介导TIMP-4基因转染对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响[A];中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;2004年度国家科技进步奖获奖项目之一(二等奖)[N];中国医药报;2005年
2 付东红;肿瘤转移有重要标记物[N];健康报;2002年
3 本报通讯员;市中医两项科研达国内领先水平[N];济南日报;2011年
4 ;QQ为何如此耗费资源[N];电脑报;2005年
5 中国医学科学院医药生物技术研究所 徐峰;阻断肿瘤推进步伐[N];医药经济报;2001年
6 陈茂梁 余宁宁;浙医二院解决脑癌治疗难题[N];中国医药报;2001年
7 付东红;北大基础医学院基质金属蛋白酶作用机理初步揭示[N];人民日报海外版;2003年
8 印高乐;台湾医生发现羊膜具有抑制血管增生功能[N];中国高新技术产业导报;2002年
9 印高乐;羊膜可抑制血管增生[N];医药经济报;2002年
10 记者 陈茂梁 通讯员 余宁宁;肿瘤侵袭转移会露出“马脚”[N];健康报;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王春玲;TIMP-2、MT1-MMP、MMP-2的表达对人类单核细胞白血病细胞系SHI-1细胞侵袭力影响的研究[D];苏州大学;2010年
2 董静;PAR-1,HIF-1a,MMP-9及TIMP-1在人脑出血灶周表达的实验研究[D];吉林大学;2012年
3 宁豪;TIMP-3对树突状细胞免疫功能的影响及其机制的研究[D];山东大学;2012年
4 侯予龙;转染TIMP-1-shRNA基因的骨髓间充质干细胞治疗大鼠缺血性心肌病的实验研究[D];苏州大学;2010年
5 李鹏;CCNL1和TIMP1基因对人乳腺癌细胞增殖及相关基因表达的影响[D];吉林大学;2012年
6 陈俊香;TIMP-1通过PTEN途径影响衰老相关肾脏微血管生成障碍的机制研究[D];中南大学;2009年
7 金蕊;特发性眼眶炎性假瘤发病分子机理研究[D];北京工业大学;2010年
8 谢国平;膝骨关节炎中医证型与关节液中MMPs TIMP-1等指标的相关性研究[D];广州中医药大学;2012年
9 罗健英;MMP9/TIMP1在缺氧滋养细胞中的表达与子痫前期关系的研究[D];华中科技大学;2010年
10 王蔚;基质金属蛋白酶及其抑制剂对心肌重构的影响[D];南方医科大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨星星;新生大鼠缺氧缺血性脑损伤MMP-2、MMP-9和TIMP-1动态变化及对细胞凋亡的影响[D];山西医科大学;2011年
2 潘涛;新生大鼠急性高氧肺损伤时P38丝裂原活化蛋白激酶的磷酸化和MMP-2、MMP-9、TIMP-1 mRNA表达的研究[D];苏州大学;2010年
3 高庆;MMP-2、MMP-9、TIMP-2在人脑胶质瘤中的表达及意义[D];郑州大学;2010年
4 张显娟;TGF-β1、MMP-2和TIMP-2在煤工尘肺病中的表达及意义[D];山西医科大学;2011年
5 郜菲;益气活血化痰通络法对脑缺血小鼠海马组织MMP-9、TIMP-1表达的影响[D];河北医科大学;2011年
6 曹纪伟;MMP-9及其抑制剂TIMP-1、TIMP-2在非小细胞肺癌中的表达与临床意义[D];广西医科大学;2010年
7 李勇子;TIMP-2基因转染FDM豚鼠模型早期后部巩膜MMP-2动态表达研究[D];青岛大学;2010年
8 戴磊;非小细胞癌组织中EMMPRIN,MMP-9及TIMP-1的表达及其相关性研究[D];广西医科大学;2011年
9 付久园;MMP-2与TIMP-2在宫颈鳞状细胞癌进展中的表达及临床意义[D];吉林大学;2010年
10 冯未萍;MMP-13、MMP-14、TIMP-1在压力性尿失禁患者阴道壁组织中的表达[D];郑州大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026