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营养性肥胖对青春期雄性大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

陈明明  
【摘要】:目的:用高脂、高热量饲料配方建立营养性肥胖大鼠模型,探讨营养性肥胖对青春期雄性大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。 方法:健康雄性Wistar大鼠40只,按随机化原则分为两组,每组20只,对照组给予普通饲料喂养,高脂组用高脂、高热量饲料喂养建立营养性肥胖大鼠模型,10周末处死大鼠摘取睾丸。全自动生化分析仪(ACA)检测外周血总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);光镜观察睾丸组织病理学改变;原位缺口末端标记法(TUNEL)检测睾丸组织凋亡细胞;免疫组化法检测Bcl-2和Bax蛋白的分布和表达;RT-PCR法检测睾丸组织Bcl-2mRNA和BaxmRNA的表达。 结果:1.动物模型的建立:对照组给予普通饲料喂养,高脂组给予高脂、高热量饲料喂养,喂养10周后,高脂组较对照组大鼠体重增加均大于20%,符合营养性肥胖大鼠模型。高脂组TC、TG、HDL-C和LDL-C(5.17±0.17、1.18±0.09、1.76±0.11、5.08±0.18)较对照组(1.38±0.12、0.39±0.05、0.97±0.07、0.75±0.06)显著升高(P0. 05); 2.大鼠睾丸组织病理观察:10周末,对照组可见生精小管内的各级生精细胞发育正常,排列整齐,管腔内可见大量成熟的精子,生精小管间可见疏松的间质组织。高脂组的睾丸组织出现病理性改变,生精小管管壁变薄,各级生精细胞的数量减少,排列紊乱,成熟精子数量显著减少,可见有细胞脱落现象,个别大鼠生精细胞与基底膜之间出现脱离,生精细胞成团脱落于管腔之中。 3.大鼠睾丸组织中凋亡细胞情况:10周末,对照组大鼠睾丸组织见仅有散在分布凋亡的生精细胞,高脂组生精细胞凋亡指数(37.17±2.74)较对照组(5.16±0.81)显著升高(P0.01),凋亡细胞以精原细胞和精母细胞为主。 4.大鼠睾丸组织中Bcl-2、Bax蛋白表达情况:高脂组Bax蛋白(153.26±8.74)表达较对照组(101.81±6.14)明显升高(P0.01);高脂组Bcl-2蛋白(139.26±7.21)表达较对照组(159.37±8.96)明显降低(P0.01)。 5.大鼠睾丸组织中Bcl-2mRNA、BaxmRNA表达情况:高脂组BaxmRNA(1.08±0.12)表达较对照组(0.37±0.04)明显升高(P0.01);高脂组Bcl-2mRNA(0.46±0.05)表达较对照组(1.05±0.11)明显降低(P0.01)。 结论: 1.高脂、高热量饮食可以引起大鼠营养性肥胖;青春期营养性肥胖可造成睾丸组织结构的异常; 2.营养性肥胖可以使青春期大鼠睾丸精原细胞和精母细胞凋亡明显增多,并出现转化障碍,使精子细胞和精子数目生成减少; 3.营养性肥胖对青春期大鼠睾丸发育及凋亡的影响可能与Bcl-2表达降低和Bax表达升高相关。


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