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《山西医科大学》 2011年
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血脂康对2型糖尿病大鼠颈动脉内中膜厚度影响的研究

郗光敏  
【摘要】:目的采用动物实验,观察血脂康干预治疗对高糖高脂喂养诱导的2型糖尿病大鼠血清及颈动脉肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的改变,同时检测干预前后颈动脉内中膜厚度(IMT),探讨血脂康改善2型糖尿病动脉粥样硬化的作用。 方法54只4-5周龄(150g-180g)清洁级雄性Wistar大鼠,适应性喂养1周后(5只/笼),随机分为对照组(空白对照组,A组,n=18)和2型糖尿病组(T2DM组,n=36),其中对照组给予常规饲料(13.4kJ/g,其中脂肪提供热量占10.2%,蛋白质占23.3%,碳水化合物占66.5%);2型糖尿病组给予高糖高脂饲料(21.8kJ/g,其中脂肪提供热量占56.0%,蛋白质占7.0%,碳水化合物占37.0%)。均自由饮水,室温控制在18~22℃,相对湿度30%~70%。两组大鼠每日早晚投食两次,每日每只大鼠的投食量为其体重的3%。12周时,做葡萄糖耐量试验(OGTT):禁食8h后,鼠尾采血用快速血糖仪测空腹血糖(FBG),以50%葡萄糖注射液2g/kg体重灌胃,2h后再次鼠尾采血测餐后2h血糖(2hPG)。以餐后2小时血糖(2hPG)≥16.7mmol/L并持续一周以上为造模成功。对照组血糖正常,继续给予常规饲料喂养,自由饮水;2型糖尿病组成模大鼠随机分为糖尿病对照组(T2DM对照组,B组,n=18),血脂康干预组(T2DM干预组,C组,n=18),两组均继续给予高糖高脂喂养,自由饮水。T2DM对照组和T2DM干预组继续饲养12周后开始血脂康干预。血脂康干预组给予血脂康胶囊0.15g/kg/d(人用量的7.5倍)混悬液灌胃,空白对照组和T2DM对照组给予等体积生理盐水灌胃。 于实验的第4周、8周、12周各取6只Wistar大鼠称重,实验结束的前1天禁食12~14h后,鼠尾采血用快速血糖仪测空腹血糖,随后用5%水合氯醛0.6ml/100g体重腹腔注射麻醉大鼠,腹主静脉取血,血标本迅速离心留取血清-70℃保存,待测各相关指标。切取颈动脉组织一部分冻存于-70℃冰箱,用于RT-PCR法测定TNF-α的表达,另一部分固定、包埋、制备病理切片用于光镜下观察颈动脉组织形态学改变及测定颈动脉内中膜厚度IMT。 所有数据应用SPSS13.0统计软件处理,计量资料结果以均数±标准差(x±s)表示;采用完全随机分组析因设计的方差分析;相关性研究采用Pearson直线相关分析,取P0.05有统计学意义。 结果 1.B组和C组大鼠血清TNF-α水平较A组显著升高,差异有统计学意义(P0.05);C组较B组血清TNF-α水平降低,差异有统计学意义(P0.01)。 2. RT-PCR结果显示,B组和C组大鼠颈动脉组织中TNF-α的mRNA表达较A组明显升高,差异有统计学意义(P0.01);C组与B组比较颈动脉组织中TNF-α的mRNA表达减少,差异有统计学意义(P0.01)。 3.颈动脉内中膜厚度IMT:B组和C组大鼠较A组显著升高,差异有统计学意义(P0.01);C组较B组降低,差异有统计学意义(P0.01)。 4.光镜下观察组织形态学变化:B组大鼠颈动脉内皮细胞排列逐渐紊乱,中膜平滑肌细胞明显增生,导致颈动脉管壁显著增厚,管腔狭窄。经血脂康干预后,上述病理改变显著减轻,且随时间延长病变改善更显著。 5.直线相关分析结果显示:2型糖尿病大鼠颈动脉TNF-α的mRNA表达与IMT存在明显正相关关系,随着TNF-αmRNA在颈动脉中表达量的增加,IMT逐渐增大。 结论 TNF-α在血清、颈动脉组织中的表达水平升高伴随着2型糖尿病大血管病变的整个过程,且随病程的发展逐渐升高。血脂康干预后颈动脉IMT显著降低,组织形态学得以改善,糖尿病大血管病变逐渐减轻。相关性分析显示颈动脉TNF-α的表达与颈动脉IMT有正相关关系。血脂康减低颈动脉IMT的机制可能是通过下调TNF-α的表达。因此推测血脂康具有降脂以外的血管保护作用。
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