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《山西医科大学》 2011年
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氧化苦参碱拮抗SiO_2刺激肺泡巨噬细胞对晚期糖基化终末产物受体及配体的影响

葛伦睿  
【摘要】:目的:探讨氧化苦参碱(Oxymatrine OM)拮抗SiO2刺激肺泡巨噬细胞对晚期糖基化终末产物受体(receptor of advanced glycation end-products RAGE)及配体-钙粒蛋白(S100),高迁移率组蛋白B1(high mobility group box protein 1 HMGB1)的影响。方法:提取SD大鼠肺泡巨噬细胞进行纯化培养和刺激培养。实验分为5组:空白对照组;100μg/ml SiO2组;100μg/ml SiO2+200μg/ml OM组;100μg/ml SiO2+400μg/ml OM组;100μg/ml SiO2+800μg/ml OM组,空白对照组只加无血清培养液,每实验组设四个平行样品及4h、24h、48h观察时点。荧光细胞免疫组化和Western blot技术检测肺泡巨噬细胞膜RAGE的表达;荧光细胞免疫组化技术测定肺泡巨噬细胞内S100的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺泡巨噬细胞培养上清液中HMGB1,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β(TGF-β)的含量。结果:1. RAGE结果显示:在同一观察时点,随着OM浓度的增加RAGE表达升高,且除48h100μg/mlSiO2+800μg/mlOM组外,其余各实验组RAGE表达均低于空白对照组,差异有统计学意义(P0.05);不同观察时点实验组结果比较显示:在不同浓度的OM组,随观察时间的延长,RAGE表达增加,差异有统计学意义(P0.05)。但在SiO2组却随观察时间延长,RAGE表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。2. S100结果显示:在同一观察时点,随着OM浓度的增加,S100表达量显著降低,且除48h100μg/mlSiO2+800μg/mlOM组外,其余各实验组S100表达均高于空白对照组,差异有统计学意义(P0.05);不同观察时点实验组结果比较显示:在不同浓度的OM组,随作用时间延长,S100表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。但在SiO2组却随作用时间延长,S100表达明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。3. HMGB1结果显示:在同一观察时点,随着OM浓度的增加,HMGB1表达量显著降低,且除24h和48h100μg/mlSiO2+800μg/mlOM组外,其余各实验组HMGB1表达均高于空白对照组,差异有统计学意义(P0.05);不同观察时点实验组结果比较显示:在不同浓度的OM组,随作用时间延长,HMGB1表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。但在SiO2组却随作用时间延长,HMGB1表达明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。4. TNF-α结果显示:在同一观察时点,随着OM浓度的增加,TNF-α表达量显著降低,且除48h100μg/mlSiO2+800μg/mlOM组外,其余各实验组TNF-α表达均高于空白对照组,差异有统计学意义(P0.05);不同观察时点实验组结果比较显示:在不同浓度的OM组,随作用时间延长,TNF-α表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。但在SiO2组却随作用时间延长,TNF-α表达明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。5. TGF-β结果显示:在同一观察时点,随着OM浓度的增加,TGF-β表达量显著降低,且除48h100μg/mlSiO2+800μg/mlOM组外,其余各实验组TGF-β表达均高于空白对照组,差异有统计学意义(P0.05);不同观察时点实验组结果比较显示:在不同浓度的OM组,随作用时间延长,TGF-β表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。但在SiO2组却随作用时间延长,TGF-β表达明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:1. RAGE在正常肺泡巨噬细胞膜上有表达,SiO2可以降低其表达。2. SiO2促使肺泡巨噬细胞分泌S100,HMGB1,TNF-α和TGF-β,且随作用时间的延长,分泌增多。3. OM可以拮抗SiO2刺激肺泡巨噬细胞对RAGE及配体的影响。
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R285.5

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