脂质体介导的质粒-TK在GCV作用下联合顺铂对人骨肉瘤mg-63细胞的杀伤作用
【摘要】:目的:研究脂质体介导的承载tk基因的质粒在GCV作用下联合化疗药物治疗骨肉瘤的可行性。初步研究GCV联合化疗药物顺铂对人骨肉瘤mg-63细胞的杀伤作用。
方法:订购重组质粒pIRES-EGFP-tk,培养和转染人骨肉瘤mg-63细胞株,流式细胞仪分析和荧光倒置显微镜下观察细胞生长状态,筛选稳定细胞系,MTT法检测GCV与不同浓度顺铂联合应用对mg-63细胞株的杀伤作用。
结果:成功构建重组质粒pIRES-EGFP-tk,并将tk导入mg-63细胞株,获得稳定表达;荧光显微镜下观察mg-63(tk+)呈现绿色荧光;流式细胞仪检测转染率在67.7%;GCV(10μg/ml)可明显抑制mg-63(tk+)细胞株的生长,顺铂最低有效浓度为1μg/ml;当顺铂与低浓度GCV (5μg/ml)联合应用时,其有效浓度可降为0.25μg/ml,并对mg-63(tk+)细胞株有明显杀伤作用。
结论:脂质体介导的质粒-tk在GCV作用下可对人骨肉瘤mg-63细胞产生杀伤作用,与顺铂联合应用可显著增强顺铂对转染骨肉瘤细胞的凋亡。这或许能为骨肉瘤的新辅助化疗提供实验依据。
【关键词】:TK基因 基因治疗 转染 骨肉瘤 丙氧鸟苷 顺铂 【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R738
【目录】:
- 摘要5-6
- Abstract6-7
- 英文缩略词对照表7-8
- 前言8-9
- 材料与方法9-12
- 结果12-18
- 讨论18-19
- 结论19-20
- 参考文献20-22
- 综述22-36
- 参考文献29-36
- 个人简介36-37
- 致谢37