人心包外脂肪干细胞诱导转化为心肌细胞

【摘要】：背景成体干细胞具有自我更新和分化为多种组织的能力，是组织工程学的重要组成部分。近来研究表明来源于吸脂术的人脂肪源性干细胞具有间充质干细胞的特点，能体外诱导分化为心肌细胞，但尚无对人心包外脂肪干细胞特点及诱导分化为心肌细胞的报道。 目的探讨人心包外脂肪干细胞体外培养及向心肌诱导分化的时期。材料与方法通过胶原酶消化法，由人心包外脂肪组织获得脂肪干细胞，通过细胞免疫学方法检测人心包外脂肪干细胞细胞表面抗原的表达，并定量分析；利用RT-PCR、real-time PCR法定量检测人心包外脂肪干细胞细胞多能性基因（Pluripotent mRNA）的表达；经心肌诱导培养基5–azacytidine诱导后，采用血细胞计数板计数并比较诱导获得的心肌细胞数量；免疫组化法检测诱导获得的心肌细胞表达心肌特异性抗α-actin、cTnT，进行表型鉴定。 结果人心包外脂肪干细胞体外培养过程中贴壁生长，通过形态学特征以及脂肪干细胞特异性相关抗原检测证实，得到高纯度人心包外脂肪干细胞。其表面标记物CD44，CD90表达阳性，并在3、4代传代细胞中荧光强度达峰值。多能性基因（Oct-4、Rex1、Nanog）的表达随细胞传代而下降。经心肌诱导培养基体外诱导培养后，分化的细胞大多呈肌细胞样，且在3、4代细胞数量达峰值。细胞免疫化学检测证实心肌特异性抗α-actin、cTnT表达阳性。 结论细胞表面荧光强度及多能性基因（Pluripotent mRNA）表达量的变化可影响脂肪干细胞向心肌细胞的诱导，脂肪干细胞处于传代早期时向心肌诱导的可能性大，因此可选择早期向心肌的诱导，这可能为脂肪干细胞移植治疗心肌梗死奠定基础。

【关键词】：脂肪干细胞 人心包外脂肪干细胞 诱导 分化 人体
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R329.2
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