收藏本站
《山西医科大学》 2015年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

反向PCR精确定位人结肠癌SW480细胞CD133基因启动子区脱氧核糖核酸酶Ⅰ高敏感位点

郭凯庆  
【摘要】:目的:利用反向PCR(inverse-PCR)方法精确定位人结肠癌SW480细胞CD133基因启动子区对脱氧核糖核酸酶I(DNase I)酶切敏感位点,探讨此方法在研究肿瘤细胞基因调控方面应用的可行性。方法:以人结肠癌细胞系SW480为研究模型,细胞培养数量达到107时提取细胞核,10U/ml DNase I切割SW480细胞核中的染色质后,按照苯酚/氯仿/异戊醇(10:10:1)方法提取基因组,用限制性内切酶Eco RI和Xmal I片段化基因组,通过末端补平、T4连接酶连接成环等过程,利用反向PCR扩增产物,并将PCR产物经纯化后连入p MD-18 T载体,转入到大肠杆菌TOP10株中进行表达,筛选阳性克隆进行基因测序。结果:通过测序,人结肠癌SW480细胞CD133基因转录起始点上游9个DNase I高敏感位点被鉴别出来,它们位于第一个外显子-700~-300bp碱基区域内。结论:应用反向PCR的技术可以精确测定DNase I对人结肠癌SW480细胞CD133基因启动子区的剪切位点,而且这些位点聚集在一个特定的区域。
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R735.35

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 冯银;袁金玲;伍勇;漆涌;陈体;;反向PCR扩增Ⅰ类整合酶基因侧翼序列[J];国际检验医学杂志;2013年08期
2 杜志杰;董金垚;师如意;肖帅帅;马小乐;郭建昇;;青蒿琥酯联合奥沙利铂对人结肠癌细胞HCT116的作用研究[J];世界中西医结合杂志;2014年07期
3 陆合;朱钰;黄尤田;;反向PCR克隆黑根霉R306Δ6-脂肪酸脱饱和酶基因[J];微生物学杂志;2008年01期
4 Xue-Fei Yang;Kai Pan;;Diagnosis and management of acute complications in patients with colon cancer:bleeding,obstruction,and perforation[J];Chinese Journal of Cancer Research;2014年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 王静;;反向PCR分离侧翼序列技术研究进展[J];北方园艺;2010年03期
2 黄玉宝;黄学军;邓俊晖;张志健;;完整肠系膜切除术对结肠癌治疗的临床疗效研究[J];结直肠肛门外科;2014年05期
3 杨明利;石晓明;赵伟;王建升;;水通道蛋白-8对结肠癌细胞化疗药敏性的影响及意义[J];河北医药;2015年05期
4 张庆庆;谢志皓;李松;孙全霞;汤斌;;匍枝根霉cbh2基因的克隆表达与结构分析[J];食品与发酵工业;2015年04期
5 张劲松;黄文静;沈观乐;吴海青;;奥沙利铂诱导的细胞外基质重构介导的非小细胞肺癌H1299细胞系凋亡机制研究[J];临床和实验医学杂志;2015年14期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 王萍萍;盾壳霉产孢相关基因的克隆及腺苷脱氨酶(CMADA)基因的初步研究[D];华中农业大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 陈非;郑大荣;罗舒;程中;;青蒿琥酯对人胃癌SGC-7901细胞生长的影响[J];华西医学;2009年02期
2 凌华志;徐元宏;李涛;沈继录;王中新;;739株革兰阴性杆菌中Ⅰ类整合子的分布及其基因盒结构分析[J];临床检验杂志;2010年04期
3 单霞;黄茂;梅亚宁;;鲍曼不动杆菌耐药性与Ⅰ类整合子关系研究[J];南京医科大学学报(自然科学版);2010年01期
4 刘亮;左静;左连富;郭建文;;青蒿琥酯诱导食管癌Eca109细胞凋亡[J];基础医学与临床;2012年05期
5 钱海洪;胡义德;;青蒿素类药物抗肿瘤作用机制的研究进展[J];中华肿瘤防治杂志;2006年11期
6 崔颖鹏;徐鸿绪;罗炯;曾燕;姜傥;;鲍曼不动杆菌整合子分型与耐药性的初步研究[J];中国微生态学杂志;2009年06期
7 李彬;傅蔷;黄心宏;曹颖平;潘玉红;;整合子与多重耐药大肠埃希菌相关性研究[J];中国微生态学杂志;2010年02期
8 ;Report of Incidence and Mortality in China Cancer Registries,2008[J];Chinese Journal of Cancer Research;2012年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵慧,郑文岭,崔东,马文丽;泛素启动子的研究进展[J];广东医学;2003年12期
2 高刚;鲁艳芹;韩金祥;赵丽;;双启动子对增强型绿色荧光蛋白表达的影响[J];中国生物制品学杂志;2009年10期
3 程元桥,林菊生,王文琦,廖家智,姜晓丹,冯玮,熊平;诱导型一氧化氮合酶基因启动子-969G→C多态性的功能[J];世界华人消化杂志;2004年09期
4 吴志香;邵敬伟;袁凤山;;胰岛素样生长因子结合蛋白-1启动子的克隆与序列分析[J];生物技术通讯;2005年06期
5 王秀亮;陈卫;梁光萍;陈建;苏踊跃;杨程;罗向东;;人β1整合素启动子核心启动序列初步分析[J];现代生物医学进展;2009年01期
6 周天鸿,李月琴,朱嘉明,云泓若,肖小敏;真核细胞转录系统启动T7启动子起始的研究[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);2000年03期
7 朱立红;倪培华;应雅韵;张洁;金磊;樊绮诗;;血脂与肝脂酶启动子514C/T多态性的关系[J];诊断学理论与实践;2005年06期
8 朱爱华,彭大新,刘秀梵,张如宽;鸡痘病毒载体启动子的优化[J];病毒学报;2000年04期
9 丁清泉,戴顺英;σ~(38)识别的启动子-35区核酸序列特征研究[J];中国生物化学与分子生物学报;1999年01期
10 黄小东,张俊武,阳学贤,王以弘,赵华路;人Aγ-珠蛋白基因-173T→C突变对启动子功能的影响[J];中国医学科学院学报;1999年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 徐昌杰;胡桂兵;张上隆;;果实成熟特异启动子研究进展[A];中国园艺学会第五届青年学术讨论会论文集[C];2002年
2 萧凤回;段承俐;薛刚平;;快速检测干旱和脱水可诱导植物启动子瞬间表达特性的方法[A];中国遗传学会七届一次青年研讨会暨上海高校模式生物E——研究院第一届模式生物学术研讨会论文汇编[C];2005年
3 龙海涛;李洪清;李玲;;蓝猪儿捕获启动子系统建立[A];2006中国植物细胞发育与分子生物学学术研讨会论文集[C];2006年
4 杨俊;刘继红;郭小林;王涛;王军凯;陈美元;王少刚;叶章群;;人肾组织GGCX基因启动子区克隆与活性分析[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
5 马小娟;侯林;陈曦;马飞;;人类选择性剪接基因与选择性启动子关联的系统分析[A];“基因、进化与生理功能多样性”海内外学术研讨会暨中国生理学会第七届比较生理学学术会议论文摘要[C];2009年
6 陈慧峰;林育纯;林丽娜;方飞;陈雯;林忠宁;;蛋白磷酸酶2A不同亚基基因启动子区遗传变异性位点筛查[A];遗传学进步与人口健康高峰论坛论文集[C];2007年
7 李静;刘学群;王春台;;一个烟草葡糖基转移酶基因启动子的克隆与诱导表达[A];湖北省植物生理学会第十五次学术研讨会论文集[C];2007年
8 吕杰;赵莹子;黄玉屏;沈萍;陈向东;;嗜盐古生菌Haloarcula hispanica淀粉酶基因启动子的研究及其跨域表达载体的构建[A];基因开启未来:新时代的遗传学与科技进步——湖北省遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2009年
9 夏定国;张婷婷;赵巧玲;张国政;裘智勇;;家蚕脂肪酶Ⅰ基因的启动子分析[A];第十届家(柞)蚕遗传育种及良种繁育学术研讨会论文集[C];2013年
10 王小华;姜广水;吴钦贞;姜萍萍;刘浩;江浩;;二价双启动子防龋DNA疫苗的构建及鉴定[A];2007年第七次全国牙体牙髓病学学术会议论文集[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前3条
1 记者 钱铮;人类DNA上启动子数量可能超过十九万[N];人民日报;2006年
2 钱铮;人类DNA上启动子数量可能超过19万个[N];医药经济报;2006年
3 ;儿童系统性红斑狼疮中白细胞介素-10启动子区单核苷酸多态性对自身表达水平的影响[N];中国医药报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 马洪鑫;ZHX2调控脂蛋白脂酶参与脂肪肝及肝细胞肝癌的作用及机制研究[D];山东大学;2015年
2 宋剑平;基质金属蛋白酶-3基因启动子区多态与散发性脑动静脉畸形的遗传易感性分析与功能研究[D];复旦大学;2014年
3 杨予涛;一个光合组织特异表达启动子的克隆、功能分析及其转录因子的鉴定[D];山东农业大学;2005年
4 杨晓敏;环加氧酶-2启动子区抑制性结合蛋白的鉴定和功能分析[D];南京医科大学;2007年
5 柳小庆;玉米胚特异性高表达启动子的基因组规模筛选、克隆和功能鉴定[D];中国农业科学院;2014年
6 李哲;酿酒酵母和大肠杆菌的启动子特性及其代谢工程应用研究[D];北京理工大学;2015年
7 陆超;人CD2AP基因启动子的鉴定及其功能研究[D];南京医科大学;2010年
8 宋斐;胚乳特异性ALP type-B基因启动子的克隆及其功能分析[D];华中科技大学;2012年
9 姜安丽;人同源盒基因NKX3.1启动子的克隆及其调控区的鉴定[D];山东大学;2005年
10 岳扬波;AAV-2 P5启动子功能的分子基础研究[D];复旦大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 余霜;家蚕血细胞特异启动子的筛选与鉴定[D];西南大学;2015年
2 王璇;水曲柳节律基因LHY启动子克隆及功能研究[D];东北林业大学;2015年
3 赵夏云;芥菜开花整合子SOC1的启动子克隆及其与FLC、SVP蛋白相互作用[D];西南大学;2015年
4 张鑫平;拟南芥和油菜花药特异表达启动子的克隆与功能分析[D];华中农业大学;2015年
5 于璐;受体相互作用蛋白激酶3转录调节特性研究[D];苏州大学;2015年
6 李玉姣;猪肝脏特异性TTR基因启动子驱动扣囊复膜孢酵母菌BGL1基因在转基因鼠中的表达验证[D];华中农业大学;2015年
7 郭凯庆;反向PCR精确定位人结肠癌SW480细胞CD133基因启动子区脱氧核糖核酸酶Ⅰ高敏感位点[D];山西医科大学;2015年
8 杨丹;大豆诱导型NAC转录因子基因启动子克隆及功能研究[D];山东大学;2015年
9 李杰;杨树木质部特异性启动子的功能及JCesAP关键调控域研究[D];河北农业大学;2015年
10 汪泽宇;c1orf109结合cyclin D1启动子序列特征研究[D];哈尔滨工业大学;2015年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026