收藏本站
《山西医科大学》 2018年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

基于代谢组学的深静脉血栓形成生物标志物研究

曹洁  
【摘要】:目的:应用代谢组学技术探索深静脉血栓形成(deep venous thrombosis,DVT)大鼠和人体内的内源性小分子代谢产物变化规律,筛选可用于DVT临床早期诊断和法医学鉴定的生物标志物。通过生物信息学手段分别寻找大鼠和人体内与DVT密切相关的代谢通路。方法:第一部分,建立DVT完全结扎大鼠模型,分为模型组、假手术组和对照组(n=10),模型组大鼠结扎并夹闭下腔静脉15min以形成血栓,假手术组开腹后不结扎不夹闭,对照组不做处理。实验动物采用HE染色和Masson染色对模型进行验证。模型组和假手术组大鼠在造模后48h于代谢笼中收集24h尿液,尿液收集结束即解剖取心血,离心收集血清,核磁共振(NMR)检测血清和尿液中的代谢产物。核磁谱图采用MestReNova 9.0软件进行预处理并归一化,导入至SIMCA-P 14.1软件进行多维统计分析,通过OPLS-DA模型中的VIP值结合t检验,筛选大鼠体液中的特征代谢物。通过生物功能分析,寻找血栓形成后大鼠体内发生紊乱的代谢通路。第二部分,收集确诊的DVT患者和性别年龄匹配的正常对照人群各85例,晨起空腹采血并离心收集血清,分别通过核磁共振(NMR)和液相色谱-质谱联用法(LC-MS)进行代谢组学检测。原始谱图分别采用MestReNova 9.0软件和Compound Discoverer 2.0软件进行预处理并归一化,导入至SIMCA-P 14.1软件进行多维统计分析,通过OPLS-DA模型中的VIP值结合t检验,筛选DVT患者血清中的特征代谢物。通过代谢物的生物功能分析,寻找DVT患者体内受影响的代谢通路,与大鼠代谢数据的比较,寻找人体内与遗传背景有关的代谢物和代谢通路。结果:第一部分,实验成功建立DVT大鼠完全结扎模型,HE染色和Masson染色显示模型组大鼠血栓呈紫红色,形成稳定,充满管腔;假手术组和对照组大鼠没有血栓形成,证明模型建立成功。模型组、假手术组和对照组大鼠血清和尿液中的代谢轮廓均呈现显著性差异,从模型组大鼠血清和尿液中筛选出各11个差异代谢物,受影响的代谢通路主要有缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成,丁酸代谢,丙酮酸代谢,糖酵解或糖原异生,酮体的合成和降解,乙醛酸和二羧酸代谢,半乳糖代谢,精氨酸和脯氨酸代谢,三羧酸循环,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢。通过ROC曲线分析得到血清中由丙氨酸、乙酰乙酸、葡萄糖、O-乙酰糖蛋白、甲醇和N-乙酰糖蛋白组成的标志物组;尿液中由亮氨酸、谷氨酰胺、肌酸、肌酐、蔗糖、3-羟基丁酸、乳酸、丙酮、α-酮戊二酸、柠檬酸和马尿酸组成的标志物组。2.第二部分,实验通过~1H NMR和LC-MS技术研究发现DVT患者和健康对照人群血清中代谢轮廓存在明显差异,从代谢谱中共筛选出DVT患者血清中65个差异代谢物,其中~1H NMR方法找出20个差异代谢物,LC-MS方法找出47个差异代谢物,谷氨酰胺和肌酸是两种分析方法均检测到的生物标志物。涉及的代谢通路主要有:酮体的合成与降解,丙酮酸代谢,谷氨酰胺和谷氨酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,苯丙氨酸代谢,丁酸代谢,糖酵解和糖异生作用,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成,精氨酸和脯氨酸代谢,氨酰tRNA生物合成,丙酸代谢,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸降解等。通过ROC曲线分析得到42个AUC值大于0.7的代谢物,这42个代谢物组成的代谢物组有望成为深静脉血栓形成诊断的生物标志物。结论:本实验从代谢组学的角度研究DVT大鼠和患者体液中的特征代谢物谱,分别从DVT大鼠血清、尿液和DVT患者血清中各找到一组有望用于疾病诊断的差异代谢物,并发现深静脉血栓形成机体内所发生的一系列代谢变化,包括糖酵解、氨基酸代谢、三羧酸循环、脂肪的分解等能量代谢途径。研究结果可为深静脉血栓形成的诊断、法医学鉴定和发病机制的深入研究提供科学依据。
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:D919

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵冲宇;王兵;娄振凯;李兴国;何卫;赵学凌;;深静脉血栓形成模型小鼠沉默信息调节因子1和氧化应激损伤标志物的表达[J];中国组织工程研究;年期
2 柏敏;徐双燕;方萍萍;金静芬;;住院患者深静脉血栓形成的现况分析及护理对策[J];护理与康复;2018年01期
3 朱敏芳;周宏珍;;机械性预防深静脉血栓形成的研究新进展[J];广东医学;2018年05期
4 柳国芬;;预防性护理在颅脑外科患者深静脉血栓形成中的应用价值探究[J];中西医结合心血管病电子杂志;2016年21期
5 奚雪琴;;86例下肢骨折后深静脉血栓形成的预防护理体会[J];临床合理用药杂志;2016年35期
6 万芳;王琳;段宝英;高溧鲜;;恶性肿瘤并发深静脉血栓形成患者20例诊治分析[J];内科;2017年01期
7 龚理花;包健星;黄淼;;循证护理在深静脉血栓形成护理中的应用[J];内蒙古中医药;2016年16期
8 郑淑彬;陆秀娟;;深静脉血栓形成的高危因素及预防护理进展[J];当代护士(下旬刊);2017年02期
9 田丰;;下肢深静脉血栓形成的预防及护理进展[J];当代护士(中旬刊);2017年03期
10 景慧云;孙海燕;蒋云芬;;老年患者人工关节置换术后深静脉血栓形成的高危因素分析及护理对策[J];实用临床医药杂志;2017年12期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘政;;侯玉芬教授辨治深静脉血栓形成的经验[A];2009全国中西医结合周围血管疾病学术交流会论文集[C];2009年
2 虞九天;梁金荣;张伟忠;;18例患者下肢深静脉血栓形成治疗回顾[A];2009年浙江省外科学学术年会论文汇编[C];2009年
3 石绍文;马世云;吴仕鹏;;骨折术后下肢深静脉血栓形成的诊治体会[A];玉溪市第三届二次骨科学术研讨会论文汇编[C];2009年
4 李令根;王艳明;;从中西医结合角度谈下肢深静脉血栓形成[A];2010年中国中西医结合周围血管疾病学术交流会论文集[C];2010年
5 李明秋;郭瑞君;;深静脉血栓形成的临床流行病学调查[A];中国超声医学工程学会第十一届全国超声医学学术大会论文汇编[C];2012年
6 费建惠;章秋萍;;5例阿尔茨海默病伴下肢深静脉血栓形成的护理观察与体会[A];2013年浙江省医学会精神病学分会老年精神障碍学组学术会议论文汇编[C];2013年
7 王春华;;下肢深静脉血栓形成的护理体会[A];全国中西医结合周围血管疾病学术研讨会论文选编[C];2001年
8 张秀军;李俊海;张晶;;中西药结合治疗慢性下肢深静脉血栓形成的治疗体会[A];第四次全国中西医结合中青年学术研讨会论文集[C];2002年
9 管淑萍;;1例胆管癌伴多发性深静脉血栓形成患者的护理[A];全国内科护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2003年
10 普素;王恩江;杨春秀;那桂萍;;彩超对深静脉血栓形成后遗症的疗效评价[A];中国中西医结合学会周围血管疾病专业委员会第六届换届暨学术交流会论文集[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 衣晓峰 王雪;突然腿肿,当心深静脉血栓形成[N];中国医药报;2015年
2 本报记者 衣晓峰 通讯员 王雪;你了解深静脉血栓形成吗?[N];中国中医药报;2015年
3 吕乃群;具有深静脉血栓形成倾向的人[N];卫生与生活报;2008年
4 西山煤电古交矿区总医院 武丽霞;下肢深静脉血栓形成观察与护理[N];山西科技报;2009年
5 通讯员 刘素芳 王建新;久坐打麻将可致下肢深静脉血栓形成[N];湖南日报;2010年
6 记者 唐江澎 通讯员 刘素芳 王建新;久坐打麻将可致下肢深静脉血栓形成[N];长沙晚报;2010年
7 ;你了解人体内的“管道”吗?[N];人民政协报;2003年
8 广西南宁市人民医院主任医师 李艳鸣;老年人进行人工髋关节置换术后须提防下肢深静脉血栓形成[N];上海中医药报;2015年
9 志;FDA批准延长Arixtra的疗程[N];医药经济报;2003年
10 李宾;这就是一份监查报告![N];医药经济报;2016年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 曹洁;基于代谢组学的深静脉血栓形成生物标志物研究[D];山西医科大学;2018年
2 赵学凌;创伤性肢体深静脉血栓形成的新型动物模型建立及相关研究[D];昆明医学院;2004年
3 刘政;消栓通脉颗粒剂对深静脉血栓形成干预机制的研究[D];山东中医药大学;2006年
4 张春强;炎症反应在急性创伤性深静脉血栓形成中的变化和作用[D];昆明医学院;2007年
5 莫建文;创伤性深静脉血栓形成及低分子肝素预防的基因表达变化研究[D];昆明医学院;2008年
6 吕勃川;康脉Ⅱ号胶囊治疗下肢深静脉血栓形成患者的临床疗效与分子机制研究[D];黑龙江中医药大学;2014年
7 周为民;深静脉血栓形成病因学及基因治疗的初步研究[D];苏州大学;2010年
8 郭伟光;大黄蟅虫丸治疗下肢深静脉血栓形成后遗症的实验和临床研究[D];黑龙江中医药大学;2009年
9 陆烨;不同给药方式在置管溶栓治疗下肢深静脉血栓形成中的疗效及安全性比较[D];华中科技大学;2014年
10 王艳明;康脉Ⅱ号胶囊治疗迁延期下肢深静脉血栓形成的实验研究[D];黑龙江中医药大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李铁;利湿通脉方对下肢深静脉血栓形成后遗症期血瘀湿重证的干预作用[D];北京中医药大学;2018年
2 范蒙;恶性肿瘤合并深静脉血栓形成相关因素的研究[D];昆明医科大学;2013年
3 陈伟达;中西医结合优化方案治疗下肢深静脉血栓形成的临床研究[D];黑龙江中医药大学;2011年
4 孙木华;维尔迈5号治疗下肢深静脉血栓形成后遗症的临床观察[D];黑龙江中医药大学;2010年
5 季博;下肢深静脉血栓形成中促炎性细胞因子的变化意义与中医证型的相关性研究[D];山东中医药大学;2008年
6 艾明瑞;康脉Ⅱ号胶囊治疗下肢深静脉血栓形成的临床观察[D];黑龙江中医药大学;2007年
7 刘晓;下腔静脉滤器置入与下肢深静脉血栓形成复发的相关性分析[D];新疆医科大学;2010年
8 严雪芹;康脉Ⅱ号胶囊治疗骨折后下肢深静脉血栓形成的临床研究[D];黑龙江中医药大学;2011年
9 张锦生;中西医结合治疗下肢深静脉血栓形成的临床研究[D];湖北中医药大学;2010年
10 张雷;康脉Ⅱ号胶囊治疗下肢深静脉血栓形成的临床研究[D];黑龙江中医药大学;2009年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026